162142. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 11-dezacetoxi-wortmannin antibiotikum előállítására

5 A 3—8. frakciókat összegyűjtjük, az eluálószert ledesztilláljuk, és a maradékot metilénkloridból metanol hozzáadásával átkristályosítjuk. Olvadáspontja 202—206 C°. 2. példa Literenként 20 g cerelózt, 2 g malátakivonatot, 2 g élesztőkivonatot, 2 g káliumdihidrogénfoszf átot és 2 g magnéziumszulfát-4ieptahidrátot, továbbá ionmentesített vizet tartalmazó 150 liter tápoldatot egy fermentorban beoltunk a Penicillium funiculosum Thom NRRL 3363 törzsének spóraszuszpenziójával, és levegőztetés (percenként 150 liter levegő) és keverés (percenként 100 fordulat) közben 27 C°-on 112 óra hosszat inkubáljuk. A fermentlevet leszűrjük, és a szüredéket 2 ízben 100—100 liter etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázist egyszer 60 liter vízzel mossuk, és vákuumban 5 literre koncentráljuk. A koncentrátumot vízmentes magnéziumszulfáton megszárítjuk, és bepároljuk. A maradékot háromszor megosztjuk petroléter és 91 arányú metanol-víz elegy között. A metanolos fázist bepároljuk, majd háromszor etilacetáttal extraháljuk. Az etilacetátos oldatokat egyszer vízzel mossuk, vízmentes magnéziumszulfáton megszárítjuk, és bepároljuk. A kivonatot 50 szeres mennyiségű kovasavgélen kromatograf áljuk. A ll-dezacetoxi-wortmannint 99:1 arányú kloroform-metanol eleggyel eluáljuk. A termék metilénklorid és éter elegyében kétszer átkristályosítva 178—180 C°-on olvad. Hozam 320 mg. 3. példa Egy fermentorban literenként a 2. példában megadott összetételű 30 liter tápoldatot beoltunk Aspergillus janus NRRL 3807 törzsének 3 liter alább leírt előtenyészetével, és levegőztetés (percenként 6—24 liter levegő) és keverés (percenként 150 fordulat) közben 18 C°-on 90 óra hosszat inkubáljuk. A fermentlevet leszűrjük, és a szüredéket 2 ízben 20—20 liter jégecettel extraháljuk. A szerves fázist egyszer 12 liter vízzel mossuk, és vákuumban 1 literre koncentráljuk. A koncentrátumot vízmentes magnéziumszulfáton megszárítjuk, és bepároljuk. A maradékot háromszor megosztjuk petroléter és 9:1 arányú metanol-víz elegy között. A metanolos fázist bepároljuk, majd háromszor etilacetáttal extraháljuk. Az etilacetátos oldatot egyszer vízzel mossuk, vízmentes magnéziumszulfáton megszárítjuk, és bepároljuk. A kivonatot 50-szeres mennyiségű kovasavgélen kromatografáljuk. A ll-dezacetoxi-wortmannint 99:1 arányú kloroform-metanol eleggyel eluáljuk. Metilénkloridéter elegyből kétszer átkristályosítva 178—180 C°-on olvad. Hozam 5 mg. 6 A felhasznált elő tenyészet a következőképpen készül: A 2. példában ismertetett tápoldatból 3 literhez hozzáadunk 2 g peptont literenként, majd 5 beoltjuk az NRRL 3807 törzs spóraszuszpenziójával, és 7 napig 27 C°-on rázás közben inkubáljuk. 10 4. példa Injekciós készítmény 1 mg ll-dezacetoxi-wortmannint melegítés 15 közben 0,1 g 94'%-os etanolban oldunk, és az oldatot 0,35 g 1,2-propilénglikollal hígítjuk, majd 6,2 pH-jú pufferoldattal kiegészítjük 1,0 g-ra. A puff er oldat a következőképpen készül: 157,5 mg citromsav monohidrátot és 460 mg dinátri-50 umhidrogéníoszfát-dihidrátot desztillált vízben oldunk, és az oldatot desztillált vízzel kiegészítjük 100 g-ra. 25 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az I képletű 11-dezacetoxi-wortmannin előállítására azzal jellemezve, hogy a) a II. képletű A9(H)-8,9-dihidro-ll-dezacetoxi-30 -wortmannint izomerizáljük, vagy b) a Penicillium funiculosum Thom gombafaj NRRL 3363 jelű vagy az Aspergillus janus Raper et Thom gombafaj NRRL 3807 jelű új törzsét táptalajon vagy táptalajban tenyésztjük, majd a 35 keletkezett ll-dezacetoxi-wortmannint a fermentléből ismert módon elkülönítjük, és tisztítjuk. (Elsőbbsége: 1970. május 12.) 2. Az 1. igénypont b) változata szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy a 40 Penicillium funiculosum gombafaj NRRL 3363 jelű új törzsét használjuk. (Elsőbbsége: 1969. szeptember 10.) 3. Az 1. igénypont b) változata szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy az 45 Aspergillus janus Raper et Thom gombafaj NRRL 3807 jelű új törzsét használjuk. (Elsőbbsége: 1970. május 12.) 4. Az 1. igénypont a) változata szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy az 50 izomerizálást vízmentes szerves bázisban hajtjuk végre. (Elsőbbsége: 1969. május 14.) 5. Az 1. igénypont a) változata vagy a 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy az izomerizálást szer-55 ves nitrogénbázisban végezzük. (Elsőbbsége: 1969. május 14.) 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy az izomerizálást piridinben végezzük. (Elsőbbsége: 1969. má-60 jus 14.) 7. A 4—6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy az izomerizálást magasabb hőmérsékleten, előnyösen a szerves bázis forráspontján végez-65 zük. (Elsőbbsége: 1969. május 14.) 3