162074. lajstromszámú szabadalom • Detergens enzimet tartalmazó mikrokapszula és eljárás ennek előállítására

7 Egységnyi aktivitású az az enzim, amely percenként 1 /Ag tirozinnak megfelelő Folin-színreakciót kiváltó, tiriklórecetsavbam oldódó anyagot termel. II. meghatározás: Lipáz-aktMitás meghatározása : A meghatározást Wdllstätter alternatív módszerével végeztük. 20% zsiradékot és 20% Tweent tartalmazó vizes szuszpenziót 10 percig turbókeverőben kevertetünk. 10 ml így kapott szuszpenzióit, 5 ml 0,1 rn foszforsav-puifferoldatot (pH = 7,0) és 1 ml enzimoldatot elegyítünk, és a kapott elegyet 50 percig -37 °C-on tartjuk. Ezután a reakció leállítása céljaiból az elegyhez 30 ml 1 : 1 arányú aceton :etamol elegyet adunk. A kapott reakeióelegyhez 1 ml 1%-os fenoäjftalein oldatot adunk, és nátriumhidroxiddal tiitráljuk. Egységnyir aktivitású az az enzim, ainely percenként 1 ^M savat szabadít fel. 1. példa: 500 ml-es Erlenmeyer-lombikokba részletekben 100 ml, 7,2 pH-értékű, 6 g búzakoirpát, 1 g vörös irizskorpat és 3 g fehér rizskoirpát tartalmazó táptalajt töltünk, és a lomibikokait gőzzel 120 °C-on 20 percig sterilizáljuk. A táptalajt Bacillus auibtilis AT1CC—9943 törzzsel oltjuk be, és forgó rázógépen, 300 fordulat/perc forgássebességgel 30 °C-«n 40 órán át tenyésztjük. A tenyészetet szűrjük. SO ml szűrt fermentlevet kapunk, amelynek proteáz^aktívitása 4.450 egység/iml. Kb. 450 ml, fenti módon előállított szűrletet csökkenitett nyomáson, 30 °C-ot meg nem haladó hőmérsékleten 90 ml-^re betaményítünk. 22.OO0 egység/ml proteáz-aktívitású konicenitrátumot kapunk. Az így kapott konoanitráitumhoz 40 g nátriuimiszulfátot, 10 g gumi arabicum-ot, és az enzim stabilizálódása céljaiból 0,1%. kalciumkloiridot adunk. A kapott homogén oldatot turbinában porlasztva szárítjuk. A belépő légáram nyomása 3,5 kg/cm2, hőmérséklete 100 °C, a kilépő légáram hőmérséklete 75 °C. 65 g enzimtar talrnú imikrokapszulát kapunk. A kapszulák szemcsemérete kb. 20—130 jug, proteázakitívitáSa 27.600 egység/g. A proteáz aktivitása szempontjából optimális pH-érték 8,0. A kapszulák vízzel érintkezve azonnal felnyílnak. 2. példa: 90 ml, az 1. példában leírt módon előállított proteáztartalmú fermentlé-koncanitrátumhoz (az enzim aktivitása szempontjából optimális pH-érték '= 8,0) 20 g szilikagélt, 10 g gumi arabicum-ot és 0,1% kalcium-kloridot adunk. A kapott oldatot az 1. példában megadott körülmények között porlasztva szárítjuk. 45 g enzimtartalmú m-ikirokapszulát kapunk. A mifcrokapszulák szemcsemérete 20—130 JU, proteáz-aktívitása 3960 egység/g. A kapszulák vízzel érintkezve azonnal felnyílnak. 8 3. példa: 90 ml, az 1. példában leírt módon előállított proteáztantaimú fermentlé-koncentrátumihoz (az 5 enzim aktivitása szempontjából optimális pH-érték = 8,0) 40 g dextriinit, 10 g 5%,-os metilcellulózt és 0,1% kaldumkloiridot adunk. A kapott oldatot az 1. példában megadott körülmények között porlasztva szárítjuk. 53 g emziim-0 tartalmú mikroikiapszulát kapunk. A mikrokapszulák szemiosamérete 20—130 ju, proteázaktívitása: 31.800 egys./g. A kapszulák vízzel érintkezve azonnal felnyílnak. 4. példa: Az 1. példában kapott, szűnt ferimentlevet l/önére betömónyítjük. A koncentriátumhoz eta-20 nolt adunk, és 11 g csapadékot választunk le. Az elegy etanol'tartalma ekkor 60—80%. A kapott poralakú enzim aktivitása 05,000 egység/g, az aktivitás kifejezése szempontjából optimális pH-érték = 8,0. 20 g kapott por-alakú enzimet 25 vízben oldunk, és a kapott 90 ml oldathoz 40 g nátriumiszulfátot és 10 g gumi amaibiicum-qt adunk. A kapott oldatot az 1. példában megadott körülmények között porlasztva szárítjuk. 68 g enzimtantalmú miikrokapszuiiát kapunk, A 30 mifcrokapszulák szemcsemérete kb. 20—130 u, proteázaktívitása: 14.700 egység/g. A kapszulák vízzel érintkezve azonnal felnyílnak. 5. példa: 35 Chromabacteirium váscosuim var. pair-alypolyticum (FERM P—137) törzs tenyésztésével előállított, lipáztartalmú, szűrt fermentléhez acetent adunk, és 11,0 g/l csapadékot választunk 40 le. Az elegy aoeton-ikonaentirációja ekkor 60— 80%. A kapott poralakú enzim lipázaktívitása 550 egység/g (az enzim aktivitása szempomtjából optimális pH-érték—8—9). 20 g fenti módon előállított poiralakú enzimet vízben oldunk, 45 és a kapott 90 ml oldathoz 40 g nátriumszulfátot és 10 g gumi arabicum-ot adunk. A kapott oldatot az 1. példában megadott körülmények között porlasztva szárítjuk. 67,6 g enzimtartalmú mikrokapszulát kapunk. A mikrokapszu-50 Iák szemcsemérete kb. 20—li3ű /.<, lipázaktívitása 150 egység/g. A kapszulák vízzel érintkezve azonnal felnyílnak. 55 6. példa: , 20 g Alkalase -enzim-part (a Novo Industry, Dánia cég gyártmánya proteázaktíváitása 83.800 egység/g, a prateáz aktivitása szemipontjából 60 optimális pH-érték = 10) vízben oldunk és a kapott 90 ml oldathoz 40 g nátriumiszulfátot és 10 g gumi arabioum-ot aduink. A kapott oldatot az 1. példában leint körülmények , között porlasztva szárítjuk. 68,5 g enzimtantalmú -mik-65 rokapszulát kapunk. A miferokapszulák szem-4