161653. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alkalokus proteáz mikrobiológiai előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TANULMÁNYI HIVATAL SZABADAL LEÍRÁS Bejelentés napja: 1970. I. 19. GO/1122 Közzététel napja: 1972. május 28. Megjelent: 1974. június 29. I 161653 Nemzetközi osztály: C 12 d 13/10 Feltalálók: SHiMAMURA Mutsuo tudományos kutató, Soka ONUMA Shunichi tudományos kutató, Soka AMANO Hideo tudományos kutató, Nagareyama, Japán Tulajdonos: GODQ SHUSEI KABUSHIKI KAISHA Tokió, Japán Eljárás alkalikus proteáz mikrobiológiai előállítására A találmány alkalikus prpteázok előállítására szolgáló módszerre vonatkozik, melyben Bacillus licheniformist alkalmas táptalajon tenyésztünk, ezáltal a tápoldatban előállítjuk az említett alkalikus proteázt, majd a tápoldatból kinyerjük a. kapott alkalikus proteázt. Azelőtt, mint ismeretes, a Bacillus subtilis fajhoz tartozó baktériumokat használtak, alkalikus. prpteáz előállítására, ezek azon a nagy aikaljtású tartományon belül fekvő optimális pH-értéken fejtik ki aktivitásukat, melyet M. Ottessen és társai a „Nature" c. folyóirat 270, 802., (1952) számában, vagy Fukumoto és társai a „Journal of the Agricultural Chemical Society of Japan" című folyóirat 33, 9., (1959) számában, vagy Fur kumoto és társai az „Agr. BioL Chem." című folyóirat 30, 1261., (1966) számában, vagy Hagihara és társai a „J. Biochem." című folyóirat 45, 251., (1958) számában írtak le. Ilyen alkalikus pre,, teázt kiterjedten alkalmaznak élelmiszerekhez és más ipari célokra, meg kell azonban jegyezni, hogy ezt az alkalikus proteázt a Bacillus subtir lishez tartozó törzsekből állították elő-Megvizsgáltuk a talajból elkülönített különböző fajtájú baktériumok enzimaktivitását és agt találtuk, hogy bizonyos baktériumok erős pppteáztermelő képességgel rendelkeznek. Megvizsgáltuk a baktériumok morfológiai, fiziológiai és bakteriológiai tulajdonságait a „Bergey's Manual of Determinative Bacteriology" 7. kiadásában le-10 15 20 25 30 írt eljárás szerjnt és azt találtuk, hogy ezek 3 Ba* cillus licheniformishoz tartozó baktériumokhQz sorolhatók és azokkal azonosíthatók. Korábban R. W. Bernlohr a „J. Biol. Chem." című folyóirat 23?, 538., (19J4) számában beszAr molt egy, Bacillus licheniformis által termejt proteázról és megállapította, hogy a prpteázt §z etiléndiamintetraacetát (ÍJ.D.T.A.) nem gátolta és, hogy hőstabilitáf tekintetében hasonló vql$ a Bacillus subtilis által termelt proteázhoz, aktivjr tását széles pH-tartpmányban 6,0 és 10,0 pjjr érték között fejtette ki, azonban az optimális pH-értéket nem derítette fel. M. Damodaran és társai a „Biochem. Biophys. Acta" c. folyóirat 17, 99., (1955) számában ugyancsak beszámoltak egy, Bacillus licheniformisból származó enzinjr ről, és megállapították, hogy az enzim 7,4 opfr malis pH-értékű proteázból és peptidázból ál|. Továbbá, Bacillus liehenifarmisbó! származó enzimről számolnak be B: F. Hall és társai az „Arch. Biochem. Biophys." című folyóirat 114, 145., (1966) szánjában, és megállapítják, hogy az enzim kétféle proteázból és egyfajta peptidázból állt és, hogy a proteáz ka^einalapii táptalajban 7—8 pH-értéken fejteit ki optimális aktivitást. Az általunk talált és azonosított, Bacillus lieheniformisbói származó proteázt a fenti hivatkozásokban ismertetett proteázokból tulajdonságai, és különösen optimális pH-értéke különbözteti meg, mely fontos tényező a prpteáz működésé-161653