161567. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enzimek és enzim-inhibitorok dúsítására
7 161567 8 Inhibitorgyanta a gyantán megkötött inhibitor-mennyiség tipus (IU)a Adszorbeált kaltikreinmennyiség (KE)b % c A 0,4—1 mól guanidínsóoldatokkal leoldott %-os kallikrein-mennyiség (az adszorbeált kalllkrein-mennyiségre vonatkoztatva) az alábbi pH—n N. 110,9 221,9 9790 24940 4,9 6.2 7,0 15 6,0 53 64 5,0 59 72 64 a tripszinre vonatkoztatott \ml 1 ImU körülbelül 1 n g tripszint gátol: 0,27 Mg tfcztu inhibitornak es a nn inhibitorkészítményünkbó'l 0,33 Mg-nak felel meg: b 1 KE (biológiai kallikreinegyseg) (1), a tiszta kallikrein 20 körülbelül 0,7 /ug-nyi proteinje (2) eredményez ilyen hatást; c arra az enzim-mennyiségre vonatkoztatva, amelyet ugyan-" ilyen mennyiségű inhibotor oldatban gátol; "l: E.K. Frey, H. Kraut, E. Wcrle, Kallikrein-Padutin, I. 25 Enke-Verlag, Stuttgart, 1950; 2: H. Fritz, 1. Eckert, E. Werle, Z. physiol. Chem. 348 , 1120, (1967) Ábra-magyarázat: 30 Az N- tripszingyantákat a szövegben leírt módon állítottuk elő; az A-tripszíngyanták előállítású analóg módon történt, de N,N- dimctiletiléndianiin hozzáadása nélkül. Folytonos görbe: 35 N-illetve A-tripszingyanta- komple.x kallikrcin-in-hibitorral. Szaggatott görbe: a sertéshasnyálmirigyből előállított specifikus tripszin-inhibitorral alkotott N- illetve A-tripszingyanta-komplex. Ordináta: a szuszpenzió megfelelő pH-értékén a komplexként leoldott inhibitor %-os mennyisége. SZABADAIM1 IGYÉNPONT Eljárás enzimek, ül. enzim inhibitorok dúsítására oly módon, hogy az enzim inhibitorát, ill. az enzimet vízben oldhatatlan vagy oldható hordozón kovalensen megkötjük, a kapott adduktot vizes közegben megfelelő enzim, ill. enzim inhibitor oldatával hozzuk érintkezésbe és a kapott komplexet ismert módon mossuk, disszociáltatjuk és a végterméket izoláljuk, azzal jellemezve, hogy az adduktot ;i komplexképzés előtt olyan alifás poliaminvegyülettel reagáltatjuk, amelynek csak egy amino-csoportja szabad, valamennyi többi amino-csoportja acilezéssel szemben védett. 2 db rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 730237, OTH, Budapest