161526. lajstromszámú szabadalom • Enzimtartalmú készítmény és eljárás előállításukra

11 5. példa: Az előző példákban leírt módon 144 g cellulóz-triacetát és glicerin-víz eleggyel 60 g-ra felhígított 9 g „Invertase concentrate B. D. H." segítségével olyan szálakat állítunk elő, amelyekben a polimer/enzimoldat aránya 1/0,416. Ebben a? esetben az „Invertase concentrate" koncentrációja a szálak előállítására használt enzimoldatban 15%. Az így előállított szálakból 90 g-ot motring alakban 50 mm átmérőjű, és 800 mm magasságú üvegoszlopban helyezünk el és az üvegoszlopot hőszabályozás céljából termosztátba rakjuk. A leírt üvegoszlopon 20 °C állandó hőmérsékletre beállítva 20 súly% 0,1 mólos foszfátpuffer-tartalmú szacharózoldatot vezetünk keresztül folyamatosan adagoló szivattyú segítségével. Az adagolási sebességet 2900 ml/24 óra értékre állítjuk be, ilyen körülmények mellett az első hónapban a szacharóz kb. 70%-a invertált cukorrá alakítható át, amely 24 órára számítva kb. 400 g invertált cukornak felel meg. Egyhónapos folyamatos üzemeltetés után az invertáz katalitikus aktivitása csökken, és a szálak külső kinézése is az üvegoszGopban megváltozik, vagyis megsárgulnak és különböző helyeken baktériumtelepeket tartalmaznak. Ekkor az üvegoszlopból a motringot kivesszük és mossuk. A motring mosását úgy végezzük, hogy azt 55 súly°/o glicerintartalmú glicerin-víz elegyben mechanikailag keverjük. A műveletet addig ismételjüki míg a mosóvíz tiszta marad. Hasonló mosást végzünk n-butilalkohollal, végül toluollal. A mosási műveletek eredményeképpen a szálat eredeti állapotában nyerjük vissza. A motringókat vákuumban szobahőmérsékleten megszárítjuk, és ismét behelyezzük az üvegoszlopba, majd megkezdjük a 20%-os szacharózoldat ismételt beadagolását. A kísérletek eredményeit az alábbi 3. táblázatban foglaljuk össze, megjegyezve azt, hogy a katalitikus aktivitás az eredeti értékére regenerálható. 3. táblázat Egymás után következő Kapott invert cukor napok száma mennyisége g/24 óra 1 400 10 380 20 360 30 330 31 mosás 32 395 60 340 61—62 mosás 63 390 80 345 81 mosás 82 395 12 30 napos aktivitási periódus után a mosást az előzőekben ismertetett módon megismételjük, ily módon az enzim katalitikus aktivitását 10 hónapig megtartja anélkül, hogy aktivitásában 5 számottevő csökkenés következne be. 6. példa: Ribonukleázt (Ribonuclease grade II Seravac) 10 tartalmazó cellulóz-triacetát szálakat állítunk elő az alábbi módszerrel: 48 mg rihonukleázt 14,5 ml desztillált vízben feloldunk, majd ezt az oldatot keverés közben 3,5 g cellulóz-triacetát 66,5 g metilénkloridban 15 képzett oldatához adjuk. Az elegyet 20 percig 1000 fordulatszám/perc sebességgel kevertetjük, a kapott emulziót pedig 30 g cellulóz-tfiacetátból és 180 g metilénkloridból képzett oldatba adagoljuk. Az emulziót az 1. példa szerint megfonjuk. A szálba beépített ribonukleáz aktivitását dn tidil-(2',(3')-ciklusos foszfátszubsztrátum dimetilglutársavas pufferben képzett oldatában határozzuk meg, amelynek optikai sűrűsége 186 /A hullámhosszon 1,2. 10 ml szubsztrátumoldatra számítva 190 mg szálat alkalmazunk. 24 óra eltelte után a reakciókeverék optikai OQ sűrűsége állandó marad. Vékonyréteges kromatográfiás analízis alapján megállapítható, hogy a szubsztrátum teljes mértékben eltűnik az oldatból. 3g 7. példa: Az 1. példa szerinti eljárással fonóemulziót készítünk, amely metilénkloridban 14 súly% cellulóz-triacetátot és „Invertase concentrate B. D. 4Q H." enzimet tartalmaz. Az emulzióban a B. D. H. jelű invertázkoncentrátum 15 súly% koncentrációban van jelen. Az emulziót szárazon megfonjuk egyetlen 200 mikron átmérőjű nyílással rendelkező fonófejen keresztül, az oldószer eltávo-45 lítására használt üvegcső átmérője kb. 80 mm, hossza kb. 2 méter és az üvegcsövön keresztül 50 °C-on levegőáramot vezetünk. Az így kapott egyszálat keresztcsévélő gépen 80 m/perc sebességgel összegyűjtjük. A szálba 50 beépített enzim katalitikus aktivitása az enzimoldathoz képest kb. 6%. 8. példa: 55 /S-galaktozidázt tartalmazó szálat az alábbi módszerrel készítünk: 15 g 225 mg ,,/9-galactosidase from yeast B. D. H."-ot tartalmazó oldatot 70 g 5%-os cellulóz-triacetát metilénkloridos oldatához aidagoljuk. 60 Keveréssel emulziót képzünk, majd az emulziót 210 g, 14,3%-os metilénkloridos cellulóz-tri-^ acetát-oldathoz adjuk. Az emulziót az 1. példa szerint nedvesen megfonjuk. 65 Az így előállított szál katalitikus aktivitását 6