161477. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibiotikus hatású oligopeptidamidok és hidrazidok szintézisére
tiloxikarbonil, terc.-butilészter, terc.-butiléter) védőcsoportokkal látjuk el a szintézis időtartamára, az a-amino-csoportok átmeneti védésére pedig a fentiekből szelektíven eltávolítható, pl. karbobenzoxi védőcsoportot használunk. Előnyös továbbá, ha az oligopeptidek szintézisében az aminosavakat a C-terminálistól elindulva egymás után kapcsoljuk össze (a stepwise szintézis elvét követjük), de a molekulában ismétlődő szekvenciarészeket ugyanazon formában, pl. mint védett dipeptidazidot vagy aktív észtert építjük be, végül az ilyen módon nyert védett Oligopeptid védőcsoportjait eltávolítva a szabad oligopeptidet vagy savaddíciós sóját izoláljuk. A fentiek értelmében az I és II képletű vegyület szintézisénél úgy járunk el, hogy az ismert Z-D-Phe-Leu-NHNH2-ből nyert azid és az ismert H-Lys(BOC)-OMe kondenzációjával előállítjuk az új Z--D-Phe-Leu-Lys(BOC)-OMe tripeptidésztert, amelybűi előbb az ismert Z-Lys (BOC)-ONP segítségével az új Z-Lys(BOC)-D-Phe-Leu-Lys(BOC)-OMe védett tetrapeptidésztert, majd a fenti Z-D-Phe-Leu-N3 -dal az új Z-D-Phe-Leu-Lys(BOC)-D-Phe-Leu-Lys(BOC)-OMe védett hexapeptidésztert alakítjuk ki. Ez utóbbi aminolízise vagy hidrazinolízise a megfelelő új védett hexapeptidamidhoz, illetve hexapeptid-hidrazidhoz vezet, melyekből a védőcsoportok eltávolításával kapjuk a kívánt I és II képletű vegyületet. A III képletű vegyület előállítása a fenti Z-Lys(BOC)-D-Phe-Leu-Lys(BOC)-OMe védett tetrapeptidészterből indul ki, melyet előbb amidálunk, majd az ismert Z-Phe-Leu-N3 segítségével az új Z-Phe-Leu-Lys(BOC)-D-Phe-Leu-Lys(BOC)-NH2 védett hexapeptidamidot alakítjuk ki. Ennek védőcsoportjait eltávolítva kapjuk a kívánt III képletű vegyületet. A IV képletű hexapeptidamid előállításánál az ismert Z-Lys(BOC)-ONP és H-D-Phe-Leu-OMe származékokból az új védett tripeptidésztert, illetve amidálás után az új Z-Lys(BOC)-D-Phe-Leu-NH2-t nyerjük, melyet előbb a már felhasznált Z-D-Phe-Leu-N3 segítségével az új Z-D-Phe-Leu-Lys(BOC)-D-Phe-Leu-NH2 védett pentapeptidamiddá, majd az ugyancsak már alkalmazott Z-Lys(BOC)-ONP segítségével az új védett hexapeptidamiddá: Z-Lys(BOC)-D-Phe-Leu-Lys(BOC)-D-Phe-Leu-NH2 alakítjuk. Ez utóbbiról a védőcsoportokat eltávolítva a kívánt IV képletű vegyületet nyerjük. A V képletű hexapeptidamid szintézise a fentieknek megfelelően szintén lépésenkint haladó szintézis, amennyiben a C-terminális H-Leu-NH2-től elindulva előbb a Z-Lys(BOC)-Leu-NH2 -t, majd a Z-D-Phe-Lys(BOC)-Leu-NH2-t, s azután a Z-Lys(BOC)-D-Phe-Lys(BOC)-Leu-NH2-t állítjuk elő. A di-, tri- és tetrapeptid egyaránt új vegyület. Az utóbbi N-terminálisát szabaddá téve a már alkalmazott és ismert Z-D-Phé-Leu-N3-dal acilezünk, amikor az új Z-D-Phe-Leu-Lys(BOC)-D-Phe-Lys(BOC)-Leu-NH2 keletkezik. A védő Z és BOC csoportok el"'" : 4 távolítása után kapjuk a kívánt V képletű hexapeptidamidot. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi példákat adjuk meg. 5 A példákban a peptidkémiai irodalomnak megfelelő rövidítéseket használjuk, tehát az aminosav rövidítések elő vagy után „—" jellel írt rövidítés az a-amino-, illetve a-karboxilcsoporthoz, az utána zárójelbe írt rövidítés az 10 «-funkcióhoz kapcsolódik. BOC = terc.-butiloxikarbonil-, Z = karbobenzoxi-, ONP = p-nitro-fenoxi-csoportot jelent. A hőmérsékleti értékeket C°-ban adtuk meg. A rétegkromatográfiához használt alábbi ol-15 dószerelegyeket az R^. érték kitevőjében jelöljük: 1 = kloroform-aceton — 8:2 2 = kloroform-metanol — 95:5 20 3 = kloroform-metanol — 9:1 4 = etilacetát-piridin-ecetsav-víz — 60:20:6:11 5 = etilacetát-piridin-ecetsav-víz — 60:40:12:22 1. példa 25 a) Z-D-Phe-Leu-Lys(BOC)-OMe előállítása 2,7 g (6,37 mmol) Z-D-Phe-Leu-N2H 3 [Yung Chem-Su et al.: Coll. Czech. Chem. Commun. 29, 2633 (1964)] 19 ml dimetilformamidos ol-30 datához 3,18 ml 6 N sósavat adunk, majd az oldatot —10°-ra hűtjük és keverés közben 1,27 ml 5 mólos nátrium-nitrit-oldatot csepegtetünk be. Tizenöt perc keverés után előbb 2,67 ml (19,11 mmól) trietilamint, majd 35 a keletkezett azid-oldathoz 2,45 g (7 mmól) H-Lys(BOC)-OMe.(COOH)2 és 1,96 ml (14 mmól) trietilamin 10 ml dimetilformamidos oldatát adjuk. A reakcióelegyet állni hagyjuk éjszakán át, majd váguumban bepárol-40 juk és a párlási maradékot oldjuk 100 ml etilacetátban. Az etilacetátos oldatot mossuk 1 N citromsav-oldattal, vízzel, 5%-os kálium-bikarbonátoldattal, vízzel, majd szárítjuk és bepároljuk. A maradék éteres eldör-45 zsölése után 2,6 g (70%) védett tripeptidésztert kapunk. Op.: 139—141°. Rj. 0,65. [ag° —8,9° (c = 1,. metanolban). b) Z-Lys(BOC)-E5-Phe-Leu-Lys(BOC)-OMe elő-50 állítása 13,0 g (20 mmól) fenti védett tripeptidésztert 260 ml metanolban feloldunk és csontszenes palládium jelenlétében hidrogenolizá-55 lünk. A dekarbobenzoxilezés végén a katalizátort kiszűrjük és az oldatot bepároljuk. Az N-terminálisán szabad védett tripeptidésztert (Rj. 0,1) feloldjuk 40 ml piridinben, majd hozzáadunk 10 g (20 mmól) Z-Lys 60 (BOC)-ONP-t és éjszakán át állni hagyjuk. A piridint vákuumban ledesztilláljuk és a maradékot feloldjuk 300 ml etilacetátban. Az etilacetátos oldatot mossuk 1 N citromsavoldattal, vízzel, 5%-os káliüm-bikarbonát-ol-65 dattal, vízzel, majd szárítjuk és bepároljuk. 2
