161392. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált 9 alfa-halogén-11 béta -hidroxi- delta3-A-norandrosztének előállítására
161392 gyakorlati végrehajtását. A hőmérsékleti adatokat Celsius-fokban adjuk meg. 1. példa 90L-Fluor-11 ß-hidroxi-A 3 -A-norandrosztén-2,17-dion a) Fermentáció A következő összetételű táptalajon /A/: glukóz 10 g élesztőkivonat 2,5 g dikáliumhidrogénfoszfát 1 g agar 20 g desztillált vízzel kiegészítve 1 literre 2 kéthetes ferde agar tenyészetet készítünk Fusarium javanicum var. ensiforme QM-524 (Army Quartermaster, Natick, Mass., Amerikai Egyesült Államok) mikroorganizmus törzsből, és a ferde agar tenyészet felületéről vett mintát 5 ml 0,01%-os vizes nátriumlaurilszulfát oldatban szuszpendáljuk. Ebből a szuszpenzióból 1 ml-es adagokkal beolthatunk hat, 50-50 ml következő összetételű steril táptalajt (B) tartalmazó 250 ml-es Erlenmeyer-lombikot: glukóz kukoricalekvár ammóniumdihidrogénfoszfát élesztőkivonat kalciumkarbonát desztillált vízzel kiegészítve 1 literre. 25°-on állandó rázó keverés (280 fordulat percenként, 5 cm sugár) közben végzett 72 órai inkubálás után 10 tf%-nyi mennyiségeket átviszünk harmincnégy, 50-50 ml frissen sterilizált B táptalajt és 300 Mg/ml 9a-fluor-11 (3-hidroxi-A- norprogeszteront tartalmazó 250 ml-es Erlenmeyer-lombikba. A szteroidot úgy adagoljuk, hogy minden lombikba 0,25-0,25 ml N,N-dimetilformamidos, 60 mg/ml koncentrációjú steril szteroid oldatot adunk. Összesen 510 mg-ot fermentálunk. A fentiekkel azonos körülmények között végzett további 72 órai inkubálás után a lombikok tartalmát egyesítjük, és a fermentlevet Seitz-féle derítő szűrőbetéten át leszűrjük. A lombikokat, a micéliumot és a szűrőbetétet többször 50 ml meleg vízzel mossuk. Az u g 6 g 3 g 2,5 g 2,5 g 10 15 20 25 egyesített szüredék és mosóvizek térfogata 2000 ml. b) Elválasztás Az így kapott szüredéket 3 ízben 600-600 ml kloroformmal extraháljuk. A kloroformos kivonatokat 3 ízben 600-600 ml vízzel mossuk, nátriumszulfáton megszárítjuk, és szárazra pároljuk. A maradékot aceton és izopropiléter elegyéből kikristályosítva 254 mg 9cí-fiuor-l 1 /3-hidroxi-A3 -A- norandrosztén-2,17-diont Kapunk. Olvadáspontja 243-244°. 2. példa 9<x-Fluor-A3 -A-norandroszten-2ß, l\ß, 17/3-triol 100 mg 9a-fluor-ll |3-hidroxi- A3 -A-norandrosztén-2,17-dion és 150 mg nátriumbórhidrid keverékét 2 ml 2 n nátriumhidroxid oldattal és 25 ml metanollal visszafolyatás közben 16 óra hosszat forraljuk, majd vízbe öntjük, megsavanyítjuk, és kloroformmal extraháljuk. A kloroformos kivonatot 8%-os nátriumklorid oldattal mossuk, nátriumszulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A száraz maradékot etilacetátból átkristályosítva 20 mg cím szerinti vegyületet kapunk. Olvadáspontja 200-201°. Az etilacetátból ismét átkristályosított analitikai minta 207-208°-on olvad, rTMS 9,13/e, 18-Me/, 8,63 /e, 19-Me/ és 4,72 /e, 3 . H / d -ÜMSO Összetétel: C x 8 H 2 7 0 3 F /310,40/-re számított: C 69,65, H 8,77% talált: C 69,69, H 8,79% 30 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az I általános képletű új szubsztituált 9a-halogén-llB-hidroxi-A3-A -norandrosztének előállítására - ebben a képletben R oxigénatomot vagy 35 hidroxilcsoportot és hidrogénatomot és X halogénatomot jelent — azzal jellemezve, hogy egy II általános k épletű 9a -halogén-11 ß -hidroxi-A-norprogeszteront - ebben a képletben X halogénatomot jelent — aerób körülmények között egy Fusarium nembeli mikroor-40 ganizmus hatásának teszünk ki, majd adott esetben az így kapott 9a -halogén-11 ß hidroxi-A3 -A-norandroszt én- 2,17-diont 9a -halogén-A3 -A-norandrosztén- 2(3, 11(3, 1Iß -triollá rendukáljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 45 módja azzal jellemezve, hogy mikroorganizmusként javanicum var. ensiformis QM-524 törzset használunk. Az E. R. SQUIBB AND SONS, INC. cég helyett a meghatalmazott 1 lapon 2 képlet A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 73-1937 - Dabasi Nyomda, Budapest-Dabas
