161143. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (+-)-(cisz-1,2-epoxipropil)-foszfonsav származékai előállítására
161143 35 36 folyadékot összegyűjtjük és cíklohexilaminnal gyorsan pH 5-re lúgosítjuk, majd az oldat szárazra pároljuk. (+)-(Cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonsav-mono-ciklohexilaminsót kapunk. (2) 7 g dietil-(±)-(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonát és 75 ml 2%-os trirnetilammóniumkarbonát-oldat elegyét kyarclombikban 25—30 C°-on 2 órán át ultraibolya fényforrással világítjuk meg. Az elegyhez 5 ml trietilamint adunk és az oldatot vákuumban szárazra pároljuk, majd a maradékot alkoholból kristályosítjuk. Bisz-trimetilammónium-(+)-(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonátot kapunk. (3) 40 ml, 7,0 pH-jú, 0,8% táptalajt, 0,2% élesztőkivonatot, 3% gabonakivonatot és 0,3% malátakivonatot tartalmazó közeget 250 ml-es Erlenmeyer lombikban 15 percig 121 C°-on és 15 p. s. i. nyomáson autoklávban tartunk. A közeget ezután platinakacsnyi mennyiségű Aspergillus niger ferde agar-tenyészettel oltjuk be, és a lombikot mechanikus rázógépen (220 fordulat percenként) 28 C°-on addig inkubáljuk, amíg a tenyészet jó növekedést ér el (2—4 nap). 10 ml ferment levet aszeptikus körülmények között centrifugacsőbe töltünk, és a sejteket 25.000 xg értékben tömörítjük. A felső folyadékréteget elöntjük és a sejteket 4 ml desztillált vízben szuszpendáljuk. 2 ml így kapott sejtszuszpenziót aszeptikus körülmények között 2y nátrium-metil-(±)-(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonátot és 2 ml vizet tartalmazó, 2X200 mm méretű steril kémcsőbe viszünk át. A kémcsövet mechanikus rázógépen (220 rezgésszám percenként) 28 C°-on 20 órán át inkubáljuk, majd a sejteket centrifugálással (25.000 xg) eltávolítjuk és a felső folyadékréteget vákuumban szárazra pároljuk. Nátrium-(+)-(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonátot kapunk. A helyettesített alkil- vagy ariiésztereket általában lúggal, pl. alkáli- vagy alkáliföldfém-hidroxiddal vagy -oxiddal hidrolizáljuk. A következő eljárást végezhetjük el: 0,1 mól bisz-(acetoximetil)-(+)-(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonátot 50 ml vízben oldunk és az oldathoz 0,1 mól kalciumoxidot adunk. Az oldatot keverés közben 2 órán át 60—80 C°-on melegítjük, majd vákuumban szárazra pároljuk. Maradékként kalcium-( ± )-(cisz-l ,2-epoxipropil)foszfonátot kapunk. 50 millimól difenil-(±)-(eisz-l,2-epoxipropil)-foszfonát, 10 ml 30%-os vizes etanol és 2-szeres fölöslegben vett báriumhidroxid elegyét nitrogénatmoszférában 1,5 órán át visszafolyatás közben forraljuk. Az elegyet lehűtjük, 4 N kénsavval pH 8-ra állítjuk, és etilacetáttal háromszor extraháljuk. A kapott vizes szuszpenziót 30 g nátriumszulfát jelenlétében éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. A szilárd anyagot szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet szárazra pároljuk. (±)-(Cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonsav-dinátriumsót kapunk. Az R és/vagy Rí helyén aril- vagy helyettesített aril-csoportokat tartalmazó vegyületeket általában tercier aminban fémnátriummal kezelve alakíthatjuk sóvá. 20 A következőképpen járhatunk el: 100 ml trimetilaminhoz 5 ml metanolban oldott 5 g difenil-(±)-(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonátot adunk, és az elegyhez kis darabokban, 5 fokozatosan összesen 2,0 g nátriumot adunk. Az oldószert lepárlással eltávolítjuk és a terméket metanolban extraháljuk. A metanolos oldatot 5 C°-ra hűtött hidrogénciklusú IR—120 ioncserélő gyantaoszlopon bocsátjuk át. A lecsurgó 10 folyadékot fenetilaminnal pH 8,2-re lúgosítjuk és betöményítjük. (±)-(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonsav-bisz-fenetilaminsót kapunk. A (—)-(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonsav a polarizált fény síkját az óramutató járásával ellen-15 kező irányban (a megfigyelő szempontjából balra) forgatja el. A mérést dinátriumsó 5%-os vizes oldatával, 405 m^-on végeztük. A „cisz" megjelölésen azt értjük, hogy a pro" pilszulfonsav-csoport 1 és 2 helyzetű szénatomjához kapcsolódó hidrogének az epoxid-gyűrű azonos oldalán helyezkednek el. 49,1 g racém (cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonsavmonobenzilammóniumsó 490 ml vízzel képezett oldatát 0—5 C°-ra hűtjük és 0—2 C°-ra hűtött, 25 330 ml savciklusú szulfonsavas kationcserélő gyantaoszlopon (Dowex 50) bocsátjuk át. A foszfonsavsóoldatot 20—40 ml/perc sebességgel adagoljuk. Az oszlopot ezután ugyanilyen sebességgel 660 ml vízzel mossuk. Az egyesített átfo-30 lyó folyadékokat keverés közben 24,2 g (+)-afenetilamin 100 ml vízzel képezett elegyében fogjuk fel. A kapott oldat pH^ját óvatosan, cseppenként adagolt vizes (+)-a-fenetilamin-oldattal 4,8-ra állítjuk. A kapott oldatot vákuumban 95— 35 100 ml végtérfogatra bepároljuk és olyan menynyiségű, 70 C°-ra melegített izopropanolt (kb. 320 ml) adunk hozzá, hogy a képződő elegy kb. 20% vizet tartalmazzon. A kapott oldatot keverés közben 75—79 C°-ra melegítjük, majd gyor-40 san 60 C°-ra hűtjük, és kismennyiségű mono(+)-fenetüammónium-(—)-(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonáttal beoltjuk. Az oldatot 0—3 C°-ra hűtjük, 16—24 órán át lassan keverjük, és a kristályosan kivált diasztereomer csapadékot 45 szűréssel összegyűjtjük. A szűrőlepényt 40 ml 9:1 arányú hideg izopropanol: víz eleggyel, majd 40 ml hideg izopropanollal mossuk, és 40 G°-on vákuumban súlyállandóságig szárítjuk. A kapott mono-(+)-fenetilammónium-(—)-(cisz-l,2-epo-50 xipropil)-foszfonát 129—132 C°-on olvad (a mintát 125 C°-os térbe helyeztük és a hőmérsékletet percenként 2 C°-kal emeltük). A termék forgatóképessége (a)28 c ° 2,6° (c = 5%, víz-405 m^ 55 ben). A termék vizes izopropanolból átkristályosítva 133—136 C°-on olvad, forgatóképessége nem változik. Ha a 28D példa szerinti eljárásban optikailag aktív cisz-propenilfoszfonitből indulunk ki 60 (amelyet az optikailag aktív cisz-propenilfoszfonit enantiomerjeinekel egyéből rezolválással kaptunk), túlnyomórészt az egyik enantiomert tartalmazó (cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonát enantiomer elegyet kapunk. 65 Az 1., 2. és 4. példában leírt eljárásban átme-18
