160860. lajstromszámú szabadalom • Reagens vércukor meghatározásához

160860 4 keresztül forró vízfürdőn kell melegíteni a szín kifejlesztése végett. |Az ismert, szalicilsavat tartalmazó reagensnél i|nár körülbelül 1 órai levegőn való állás után bekövetkezik az oldott anyagok kikristályosodása. Egy további hátrány végül még az is, hogy a jégecet helyett felhasznált anyagok lényegesen drágábbak és ezzel a gazdasági versenyképességük csökken. A találmány célja egy, a vércukor meghatározására szolgáló olyan; új reagens készítése,. amelynek felhasználásával az ismert reagensek említett hátrányai kiküszöbölhetők, továbbá megbízhatók, érzékenyek és gazdaságosak. A vércukor meghatározására szolgáló találmány szerinti o-toluidint, tiokarbamidot, etilénglikol-mono-(rövids2énláncú)-alkilétert és savat tartalmazó reagenst az jellemzi, hogy 1. savként ftálsavat és 2. oldásközvetítőként dimetilformamidot tartalmaz. A. H,aertel,.H. Lang, Ärztl. Lab, 15, 60 (1986) közleményéből ismert, hogy hidroxil-csoportot nem tartalmazó dikarbonsavak az ecetsavat nein tudják helyettesíteni, hanem a kívánt színezék képződését megakadályozzák. Ezért felettébb meglepő volt,, amikor azt találtuk, hogy a ftálsav kitűnő katalizátor az o-toluidin aldózspecifikus színreakciójára, míg például izoftálsav és tereftálsav használhatatlanok erre a célra. A találmány szerinti reagens célszerűen 0,1— 5 súlyrész tiokarbamidból, 10—65 súlyrész ftálsavból, 50—130 térfogatrész dimetilfor mamidból és 20—100 térfogatrész etilénglikol-mono-(rövidszénláneú)-alkíléterbŐl és 5—30 térfogatrész ö-toluidinból áll. A dimetilformamid és etilénglikol-mono-i(rövidszénláncú)-alkiléter együttes mennyisége azonban a 150 térfogatneszt célszerűén ne lépje túl. Egy különösen előnyös összetétel 0,15—0,3 súlyrész tiokarbamidból, 40—50 súlyrész ftálsavból, 70—110 térfogatrész dimetiíformamidból, 40—80 térfogatrész etiléngUkol-mon:o~(rövidszénlánGÚ)-alkiléterből és 15—120 térfogatrész o-toluidiniból áll. „Rövidszénláncú-alkil" kifejezésen, a találmány keretében 1—6 saénatomos alkil-csoportot értünk. A találmány szerinti reagens körülbelül 5%-ig terjedő mennyiségben vizet is tartalmazhat anélkül, hogy ez a reagens használhatóságát befolyásolná, A találmány szerinti reagensnél nincs sem kellemetlen szag, sem nem történik meg az oldásközvetítő elpárolgása, ha a reagenst a színezék .•'kialakítása végett melegítjük, A reagens színtelen vagy gyengén sárga színű, viszkozitása csekély úgy, hogy a piipettázást sem levegőbuibofékok képződése, sem utánfolyás nem befolyásolja. Az utánfolyás a szokásos pipettázásnál J$ lP/o, 2,0 ml reagensnél tehát < 0,02 ml. A reagens raktározhatósága is jó, jóllehet megnövelt hőmérsékleten (33 °C) való raktározásnál a sárga elszíneződés erősödése léphet fel. Ez azonban sem a. mérés érzékenységét nem befolyásolja jelentősebben, sem pedig a képződött szín tartósságát nem csökkenti. A találmány szerinti reagens egy különleges előnye abban van, hogy már alacsony glükóz-tartalomnál is kitűnő az érzékenysége. így már 20—400 m,g% (és tovább egészen lg%-on túl is) glükóztartalom, tartományban nagyon jó egyenes arányosság áll fenn az 578 nm-nél mért extinkció-értékek és a glükózkoncentráció között. Ezzel kapcsolatban a csatolt rajz 1. ábrájára utalunk, Amennyiben a glükóztartalöm 400 m% felett van, a próbát célszerű hígítani, például 1 : 10 arányban, mivel ennél a tartalomnál már 0,65 extinkciót mérünk. A találmány szerinti reagens az ismert reagensek érzékenységét jelentősen felülmúlja, ahogy ez az alábbi 1. táblázatból kitűnik. 1. táblázat A különböző vémikormeghatározó módszerek érzékenységének Összehasonlítása (kísérleti kombinációk) Megjelölés Érzékenység — 200 mg% glükóz E578 vak E578 próba /ÍE57P, Érzékenység % (l)-re vonatkoztatva (1) o-toluidin-^módszer jégecettel 0,084 (2) o-toluidin-módszer jégecet nélkül glikolsawal 0,080 (3) o-toluidin-ötódszer jégecet nélkül szalicilsavval 0,054 (4) találmány szerinti reagens-elegy o-toluidin-mMszer + ftálsav 0,049 * Összehasonlítás (4) a (2)4iÖz<=== 1,82' az 1,0-hez (4) a'(3)4toe^'l,2!2'' 1,0-hez 0,201 0,285 0,326 0,382 0,117 0,205 0,272 0,333 = 100% 175,5% 232% 2