160777. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szpiramicinszármazékok előállítására

5 160777 6 ben szuszpendálunk. Szobahőmérsékleten való 42 órai keverés után nagyon kevéssé zavaros oldatot kapunk. SuperceJen átszűrjük, és a szűredéket liofiliaáljuk. A kapott maradékot ismét leloldjuk 136 ml n, nátriumhidröxid-oldat és 3,2 liter desztillált víz elegyében, és 'szobahőmérsékletein 6 óra hosszat keverjük. Ezután 2. g aktívszenet adunk hozzá, 10 percig keverjük, és Superoelen átszűrjük." A szűredéket liofilizáljuk. A maradékot felvesszük 500 ml etilacetátban, az oldhatatlan részt (súlya 8,2 g szárazon) szűréssel elválasztjuk, a szűredéket feltöltjük egy 1,5 kg kovasavgélt tartalmazó 8 cm átmérőjű oszlopra, és kromatograf áljuk 1—1 literes frakciókat felfogva. Eluálósaar Frakció etilacetát 1— 5 75 : 25 térfogatarányú etilacetát-metanol elegy 6—10 50 : 50 térf ogatarányú etilacetát-metanql elegy 11—25 metanol 26—30 Az egyesített 11—16. frakciókat bepárolva 50 g nátrium tartalmú elszappanosított szpiramicint kapunk. A 17—25. frakciókból további 35 g termék nyerhető. Rf = 0,43 (metanol-víz 75 : 25 arányú), a. szpiramicin I Rf értéke 0,57. összetétel: N % 3,1 (elméletileg 3,03%), Na% 2,65 (elméletileg 2,50%). 3. példa: 5 g szpiramicin I-et szuszpendálunk 5,65 ml n-nátriumhidroxid-oldat és 135 ml desztillált víz elegyében. Az oldaton át nitrogénáramot vezetve és 18 óra hosszat szobahőmérsékleten keverve nagyon kevéssé zavaros halványsárga oldatot kapunk 10,8 pH-val. Ezt az oldatot 5 ízben 50—50 ml izopropiléterrel extraháljuk. A vizes fázist leszűrjük, majd liofilizáljuk. Így 4,0 g elszappanosított szpiramicint kapunk a 2. példa termékével azonos jellemző tulajdonságokkal. Rf — 0,43 (metanol-víz 75 : 25 arányban). 4. példa: 300 g nátrium tartalmú elszappanosított szpiramicinnek 2 liter desztillált vízzel készült oldatához kis adagokban 15 perc alatt hozzáadunk 132 g kristályos embonsavat. A reakciókeveréket 1 óra hosszat keverjük. Az oldhatatlant szűréssel eltávolítjuk, és a szűredéket liofilizáljuk. így 430 g nátrium tartalmú el~ szatroanosított szpiramicin-embanátot kapunk. összetétel: számított: C 62.35, H 7,21, N 2,20, Na 1,81% talált: C 62,20, H 7,34, N 2,91, Na 1,87% 5. példa: 843 mg szpiramicin I-nek 25 ml desztillált vízzel* készült szuszpenziójához hozzáadunk 56 5 mg kalciumoxidot. A reakciókeveréket nitrogén alatt kb. 25 °C-on 48 óra hosszat keverjük. Ezután 50 °C-on 20 torr nyomáson szárazra bepároljuk. A .maradékot 5 : 5 térfogatarányú 1 ml etilacetát-metanol' elegyben oldjuk, és 10 feltöltjük iegy 18 g kovasavgélt tartalmazó oszlopra. 50 ml 5 : 5 térfogatarányú • etilaoetát-metanol eleggyel, majd metanollal eluálunk, .10 ml-es frakciókat felfogva. A 3—7. frakciót egyesítjük, és 20 torr nyomáson 50 °C-on szá-15 razra bepároljuk. így 673 ttlg elszappanosított szpiramicin-kalciumsót kapunk. Rf = 0,25 [szilikagélen 50 : 50 térfogataráíiyú 1,2-diklóretári: .". •; -metanol eleggyel]. 20 6- példa: Arbor Acre fajtájú kiscsirkéiket 14-esével ketrecekbe zárunk, minden ketrecbe azonos nemű csirkéket. Ugyanannyi tyúkot használunk, mint kakast. A csirkéket meleg helyen neveljük egy napos koruktól a 4 hetes próba egésiz tartalma alatt. A vizsgált eleséget a második naptól kezdve adjuk a csirkéknek. A csirkék súlyát lemérjük és a fogyasztott eleség mennyiségét meghatározzuk a 2. és a 4. héten, A súlygyarapodást és a fogyasztási tényezőt meghatározzuk a 2. és 4. hét végén. A csirkék kétféle alapeleséget kapnak. 25 30 39 40 45 50 55 60 6b 1. eleség: közepes összetétele a következő: búzaliszt kukoricaliszt zsiradék szójaliszt halliszt tejpor szeszmoslék 15 % 45 % 0,8% 25 % 7 % 1,2% 2 % szervetlen só-vitaminos készítmény 4 % Ez az eleség 21% emészthető fehérjét tartalmaz. Vitamintartalma 100 kg-ra számítva a következő: A vitamin 1 400 000 NE C vitamin 1 000 mg D3 vitamin 401 500 NE E vitamin 2 700 mg Bi vitamin 600 mg K-\ vitamin 125 mg B2 vitamini 750 mg PP vitamin 6 200 mg B3 vitamin 1 600 mg folsav 85 mg Bg vitamin 200 mg _ biotin 10 mg B12 vitamin 3,1 mg kolin 176 500 mg 2. eleség: összetétele hasonló az előzőhöz, de csak 18% emészthető fehérjét és 2% szervetlen só-vitaminos készítményt tartalmaz. A kísérletben a csirkéket 6 csoportra osztottuk (csoportonként 4 ketrec, azaz 28 tyúk és 28 kakas). 3