160678. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A16884 jelzésű antibiotikum előállítására

7 kum monoammóniumsó jaként 23 mg/kg ED50 értéket ad Proteus PR6-tal fertőzött egerekben, és 33,8 mg/kg ED50-értéket Shigella SH3-mal fertőzött egerekre, a sokkal tisztább A16884 monoammóniumsójaként Escherichia coli EC14- S el fertőzött egerekre 3,64 mg/kg, Salmonella typhosa SA12-vel beoltott egerekre 23 mg/kg, és Klebsiella pneumoniae Kl törzzsel fertőzött egerekre 93,4 mg/kg ED50 értéket mutat. Az adagolást szubkután végeztük. 10 Mint azt az előzőkben említettük, az A16884 antibiotikum és sói a baktériumellenes hatás mellett féregellenes hatást is mutatnak. Ezért adagolhatjuk az A16884 antibiotikumot vagy sóit melegvérű állatokba azért is, hogy elpusz- is títsunk különböző belső parazitákat, főleg gyomor- és bélférgeket, pl. Ascaris lumbricoides var. suum-ot, Nematospiroides dubius-t, Aspiculuris tetraptera-t, Syphacia obvelata-t és ehhez hasonló élősködőket. A beadagolás általában orá- 20 lisan történik, pl. az A16884 antibiotikumot vagy valamelyik sóját az állat táplálékába keverve, tablettaként, folyékony készítményként stb., amelyek A16884 antibiotikumot vagy sóját tartalmazzák, vagy más módszerekkel. Általa- 25 ban az 1—500 mg/kg állatsúly, vagy ennél magasabb dózisok hatékonyak egyszeri adagolás esetén. Ha az A16884 antibiotikumot vagy valamilyen sóját a szokásos táplálék összetevőjeként alkalmazzuk, 0,0001—0,05%, vagy ennél na- 30 gyobb anyagkoncentrációk hatásosak. Az A16884 és sóinak előnyös koncentrációja a táplálékban 0.01 és 0,05o/o között van. Az A16884 antibiotikumnak és sóinak féregellenes hatását a következő meghatározásokkal 35 szemléltetjük. Az első meghatározások során az A16884 antibitikum monoammóniumsót egyszeri dózisban adtuk, mindkét Aspiculuris tetraptera-val, ill. Syphacia obvelata-val (tűférgekkel) fertőzött 40 egerekbe. A dózis 500 mg A16884 antibiotikum monoammóniumsó per kg egyedi állatsúly volt, melyet szuszpenzióként adtunk be, szuszpendálószefként 0,125% metilcellulózt tartalmazó fiziológiás sóoldatban. Egy kontroll egércsoportot 45 alkalmaztunk a meghatározáshoz, mely szintén Aspiculuris tetraptera-val és Syphacia obvelataval volt fertőzve. Mindkét csoportot normál laboratóriumi körülmények között tartottuk, a kezelt csooorthoz történő adagolás után számít- 50 va 48 óráig. Az összes egeret felboncoltuk, és megállapítottuk a jelenlevő tűférgek számát, melyet a következő táblázatban közlünk: III. táblázat *= Tűférgek száma állatonként Aspiculuris Syphacia tetraptera obvelata Kontroll 26 52 A16884 antibiotikum monoammóniumsó 500 mg/kg 0 2,5 65 8 Egy másik vizsgálat során az A16884 antibiotikum monoammóniumgóját standard egértáplálékba kevertük, így egy kezelt tápláléksorozatot állítva elő, amely 0,005, 0,01 és 0,05 súlyszázalék A16884 monoammóniumsót tartalmazott. A táplálékokkal elválasztott, öt-öt egérből álló csoportokat etettünk. A táplálás kezdete után 24 órával az egereiket Ascaris lumbricoides var. suum-mal fertőztük meg. Egy másik egércsoportot kezeletlen táplálékkal tápláltunk; ez a csoport szolgált kontrollként és ezeket az előző csoporttal megegyező módon fertőztük Ascaris lumbricoides var. suum-mal. 10 napon át mindegyik csoportot a saját megfelelő táplálékával tápláltuk, normál laboratóriumi körülmények között tartva ezeket. A tizenegyedik napon mindegyik egeret felboncoltuk, és tüdején megvizsgáltuk az Ascaris lumbricoides var. suum által okozott elváltozásokat és számukat. A táplálékban levő A16884 antibiotikum monoammóniumsó szintje és az egyes állatokban talált elváltozások száma a különböző csoportokban az alábbi táblázatban látható IV. táblázat A tüdőelváltozások Csoport átlagos száma csoportonként Kontroll 2,2 0,005% A16884 monoammóniumsó 0,5 0,01% A16884 monoammóniumsó 0,4 0,05% A16884 monoammóniumsó 0,4 Az A16884 antibiotikum egy eddig még le nem írt, Délamerikából származó talajmintából izolált organizmussal termelhető. Az organizust úgy izoláltuk, hogy a fenti talajmintákból keveset steril desztillált vízben szuszpendáltunk, majd a szuszpenzióval agar táptalajos lemezeket oltottunk le. A beoltott agarlemezeket néhány napig 25—35 °C-on inkubáltuk, majd ezután az A16884 antibiotikumot termelő organizmus telepeit steril platinakaccsal agaros csövekre oltottuk át. Az agaros csöveket inkubálva állítottunk elő megfelelő mennyiségű inokulumot az A16884 antibiotikum termeléséhez. A találmány szerint A16884 antibiotikum termelésre használt Actinomyces Streptomyces Iipmanii Waksmann and Curtis-nak neveztük. Az új, A16884 antibiotikumot termelő organizmus hosszú időtartamon keresztül eltartható elváltozás nélkül, a Northern Utilization Research and Development Division, Agricultural Research Service, US. Department of Agriculture (azelőtt Northern Regional Research Laboratories), Peoria, Illionis 61604 törzsgyűjteménynek megfelelően és NRRL 3584 számmal van lajstromozva. 4