160547. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (-)-(cisz-1,2-epoxipropil)-pirofoszfonsav és sói előállítására
3 160547 4 ződnek. A reakciót általiban 25—100 C° közjjtti hőmérséklettartománybaan, előnyösen aä50©fc«n 50—75 C°-on hajtjuk végre. A reakcióban közegként bármely közömbös vízmentes oldószert', pl. étert, tetrahidrofuránt, benzolt., toluolt vagy hasonló anyagokat alkalmazhatunk. A Beajbciéelegyet általában a reakció hőméKSékiletér]) 1-^-5 órán át keverjük, majd az elegyet letoutjiufet és azs asűhMridet ismert módszerekkel elválaszjijiiiik a reakcióelegytől. A (—)-^isz-l,2-«ep©xií^pil)^fos,zfonsavat és sóit bizm^M StreftowaycesHtöKsek, pl. Streptomyces fr,adiae (MA—£915, NRRL—3417), Streptomyces wedmoreosis (MA—3269, ATCC 21239), vagy Streptomyees viridochromogenes (MA-— 2903, NRRL^34,13) megfelelő táptalajon, szabályozott körülmények között végrehajtott aerob fermentációjával állíthatjuk elő. A fermentációt 25—38 C°-os hőmérsékleten végezhetjük. A foszfonsav^zármazékofcat termelő Str-eptomyees törzsek növekedésének az 5,5-^-7,5 pH-jú táptalajok kedveznek. A {—)-(risz-l,2-epoxiprop'il)-foszfonsavat a fermentlébaí bázikus, vagy savval kimosott ajímípiuniqxidte adszorbeálva választhatjuk el. Az alumíniumoxidról kb. 1,1,2 pH-jú vizes vagy vizes^alkoholos ammóniaoldattal eluálhatjuk az adszorbeált anyagot, és az eluátumot frakciónként gyűjtjük össze. Ily módon a termék ammónáirasófját kapjuk. A sav egyéb sóit úgy állíthatjuk elő», hogy az ammóniumsó oldatát pl. megfelelő kationcserélő gyantán bocsátjuk át, vagy más, szakemberek előtt ismert módszereket alkalmazhatunk. A (—Mcisz-il ,2-epoxipropil)-pirofoszf onsav igen sokféle mikroorganizmus-- növekedését gátolja. Általába» a Staphylococci és Salmonella fajok ellen fejt ki gátló, hatást-. Az antibiotikurmok, hatásterületébe tartozó kórokozók közül a Salmonella schottmuelleri-t, Salmonella gallinarum-ot, Staphylococcus aureus-t és Staphylococcus pyogenes-t említjük meg. A pirofoszfonsavat fertőtlenítőszerként alkalmazhatjuk as gyógyszerészettij fogászati; és orvosi esizközökön tapadt mikroorgariizmuso'fc eltávolításária, vagy egyéb, a félsorolt mikroorganizmusokikai fertőzött területeken. Minthogy ez az? antibiotifcum és: sói a különféle Sajrmonella-törzsek növekedését' hatékonyan gátolják, tojások mosására, és egyéb, Saimonella-fertőzésnek kitett* területeken, fertőtlenítőszerként használhatók. A (—Hcisz-l,2-epoxipropil)pirofoszfonsav és sói továbbá ipari bakteráeid a^&gökfeénife is felhasználhatók, pl a» papírmalmoktoan alkalmazotti „fehér víz'-ben; és az ipari f<^ték©ken, pli p^vámlacetát-latex- festéken teépzödő, káró» baktériumtelepek növekedésének vjss^saörftásál». A- pirofosrfonsav« továbbá állatok bakteriális fertőzéseinek kezelésére is felhasználható. A találmány szerinti eljárást! az- oltalmi kör korlátozása: nélkül az- alábbi példában részleteismertetjük. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 Példa Dinátri>um.-.bisz-i(—)-cisz-l,2-epoxipropil)-piro-f oszfonát 75 ml ecetsavarahidridben 9,2 g dinátrium-(—-)cisz-1,2-epoxipropil)-foszf onátot szuszpendálunk. A szuszpenziót 2,5 órán át 75 C°-on kawerjük, majd 25 C°-ra hűtjük, 500 ml éterrel keiverjük és szűrjük. A szűrőlepényt 500 ml éterrel kezeljük, a szilárd anyagot leszűrjük és éterrel mossuk. A maradékot 40 C°-on vákuumban szárítjuk. Infravörös és NMR spektrum» alapján bisz(—-)-(cisz-l,2-epoxipropil)-pirofoszfonsav-dinátriumsót kapunk, kb. 90%-os kitermeléssel. Azonosítási adatok: Infravörös spektrum széles sáv széles sáv széles sáv kis éles maximum kis éles raaxäma» gyenge-maximum széles sáv erős sáv gyenge sáv. gyenge sáv nagyon széles sáv széles sáv (Nujol): 3,0 mikron 64 mikron mikron mikron 7,29 mikron 7,35 mikron mikron mikron mikron 9,55 mikron 10;9 iirukroii 11,84 mikron 6,9 7,1 8,2 9,0 9,3 NMR^spektrum (D2 0-ban): Legkiemelkedőlbb maximumok: 8,42 tau (C—CH3) 8;b3 tau 7;00 tau 7;0* tau 6;58 tau (imultiplet) Farmakológiai adatok A bisz-ä(—)-H(CÍSZ-Ű ,2-epoxipropil)-pirofoszfonsav dinátriumsó hatását kísérleti úton megfertőzött egereken 'határoztuk meg. Nőstény, svájci fehéregereket intraperitoneálisan megfertőztünk 3—30 LD50 (halálos adag az egerek 50%-a számára) Salmonella schottmuelleri adagokkal és a fertőzéskor, majd 6 órával később a pirofoszfönát-vegyülettel kezeltük orálisan az állatokat. 7 nappal a fertőzés után a túlélők számából kiszámítottuk az ED50 értéket (ez- az a pirofószfonát-vegyület mennyiség, amely a megfertőzött állatok 50%-ának megvédéséhez szükséges). Az ED50 érték 13 mikrogramm/adag. volt. A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagként felhasználható vegyületeket a következőképpen- állíthatjuk elő: (—)^CiszHl,2^epoxipropil)-ifoszfonsav Egy 250 -ml-es ledugaszolt Brlénmeyer*-lombika ban lévő 50'ml steril»közeget-liofilizált Strepto*myces-fradiae í(MA—Z913, ATCC 21099) tenyészettel altunk be. A közeg összetételé a következő: 2
