160094. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-(6-amino-purin-9-il)-4-deoxi-D-eitronsav előállítására

160094 5 6 táppal etetjük. A szerűm koleszterin-koncentrációja a 4. napon 231 mg/dl, mely a kontroll-esoport 480 mg/dl értékéhez viszonyítva 52%os depressziónak felel meg. Eljárásunk további részleteit a példában is- D mertetjük anélkül, hogy azt a példákra korlátoznánk. 1. • példa: 10 10 kg friss Lentinus edodest triturálunk és 20 liter 80%-os vizes metanolt adunk hozzá. Az elegy hatóanyag-tartalmát visszafolyató hűtő alkalmazása mellett 3 órán át extraháljuk. A fenti műveletet kétszer megismételjük. Az extrakto- 15 kat egyesítjük, vákuumban 6 literre betöményítjük és éterrel rázzuk. A vizes réteget elválasztjuk, 20 liter vízzel hígítjuk és erősen savas ioncserélő gyantán (H-típusú Amberlite IR—120: kereskedelmi név) vezetjük át. A gyantát vízzel 2

o mossuk, majd 2%-os vizes ammóniával eluáljuk. Az eluátumot vákuumban betöményítjük és liofilizáljuk. A kapott barna port (60 g) 400 ml vízben oldjuk, majd az oldhatatlan anyagok eltávolítása után az oldatot erősen savas ion- 25 cserélő gyantán (H-típusú Dowex 50x2; kereskedelmi név) vezetjük át. A gyantát vízzel mossuk, majd In—4n sósavval fokozatosan eluáljuk. Az ultraibolya abszorpciós spektrumban 260 m/x körül abszorpciós maximumot mutató frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk. A kapott fehér port vízben oldjuk és az oldatot erősen savas ioncserélő gyantán (H-típusú Dowex 50x2; kereskedelmi név) ismét átvezetjük. A gyantát vízzel mossuk és 2%-os vizes ammóniával eluáljuk, majd az eluátumot liofilizáljuk. A kapott sárgás port 0,1 mólos piridin-acetát pufferben oldjuk. Az oldatot 0,1 mólos piridin-acetát pufferrel előkezelt, erősen savas (H-típusú Dowex 50x2; kereskedelmi név) ioncserélő gyantán vezetjük át. A gyantát 0,1 mólos piridin-acetát pufferrel . eluáljuk. Az eluátumot 25 ml-es frakciókra választjuk szét. Az ultraibolya abszorpciós spektrumban 260 m/j. körüli abszorpciós maximumot mutató frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk. A kapott nyers kristályokat vízből átkristályo- 45 sítjuk. Tiszta kristályok alakjában kb. 250 mg (íj képletű purin-vegyületet kapunk. Op. 279 °C (bomlás). 2. példa: 2,5 kg szárított Lentinus edodest megőrlünk és 20 liter 80%^os vizes metanolt adunk hozzá. Az elegyet az 1. példában ismertetett módon dolgozzuk fel. Tiszta kristályok alakjában kb. 265 mg (I) képletű purin-vegyületet kapunk. 3. példa: 50 mg szárított Lentinus edodest megőrlünk és 400 liter 50%-os vizes metanollal extrahálunk. Az extraktot vákuumban betöniényítjük és a koncentrátumot erősen savas ioncserélő gyantán (H-típusú Amberlite IR—120; kereskedelmi név) átvezetjük. A gyantát. vízzel mossuk és 2%-as vizes ammóniával eluáljuk. Az eluátumot betöményítjük és 2150 g koncentrátumot képezünk. 10 g koncentrátumot 80 ml ecetsav-ammóniumhidroxid pufferben (pH 5, 0,1 n mint ecetsav) oldunk és az oldatot a fenti pufferrel előkezelt erősen bázikus ioncserélő gyantán (ecetsav-típusú Amberlite IRA—400; kereskedelmi név) vezetjük át. A gyantát a fenti pufferrel mossuk és 0,5 n ecetsavval eluáljuk. Az ultraibolya abszorpciós spektrumban 260 ím«, körül abszorpciós maximumot mutató frakciókat összegyűjtjük, vákuumban betöményítjük és vákuumban szárítjuk. Tiszta kristályok alakjában 120 mg (I) képletű purin-vegyületet kapunk. 4. példa: 20 g, a 3. példában ismertetett eliárás szerint kapott koncentrátumot 200 ml vízben oldunk és az oldatot erősen bázikus ioncserélő gyantán (ecetsav-típusú Amberlite IRA—400; kereskedelmi név) vezetjük át. A gyantát sorrendben vízzel, 0,03 n ecetsavval és 0,3 n ecetsavval mossuk és 0,5 n ecetsavval eluáljuk. Az ultraibolya abszorpciós spektrumban 260 mp. körül abszorpciós maximumot mutató frakciókat öszszegyűjtjük, vákuumban betöményítjük és vákuumban szárítjuk. Tiszta kristályok alakjában 100 mg (I) képletű purih-vegyületet kapunk. 5. példa: 200 g, a 3. példában ismertetett eljárással előállított koncentrátumot 1 liter vízben oldunk és erősen bázikus ioncserélő gyantán (ecetsav típusú Amiberlite IRA—400; kereskedelmi név) vezetjük át. A gyantát sorrendben vízzel és ecetsav-ammóniunTihidroxid pufferrel (pH 5. mint 0,1 n ecetsav) mossuk és 0,5 n ecetsavval eluáljuk. Az ultraibolya abszorpciós spektrumban 260 m,ß körül abszorpciós maximumot mutató frakciókat egyesítjük, vákuumban betöményítjük és vákuumban szárítjuk. Tiszta kristályok alakiäban 2,80 g (I) képletű purin-vegyületet kapunk. 6. példa: 50 kg Lentinus edodest 400 liter vízzel szobahőmérsékleten 24 órán át extrahálunk. Az extraktot erősen savas ioncserélő gyantán (H-típusú Amberlite IR—120; kereskedelmi név) vezetjük át. A gyantát vízzel mossuk és 2%-<>s vizes ammóniával eluáliulk. Az eluátumot betöményítve 2300 g koncentrátumot kaounk. 200 g koncentrátumot az 5. példában ismertetett módon dolgozunk fel. Tiszta kristályok alakjában 3,0 g (I) képletű vegyületet kapunk. 7. példa: 50 ,kg szárított Lentinus edodest 400 liter 50%-os vizes metanollal extrahálunk. Az ex-15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 ó