160073. lajstromszámú szabadalom • Eljárás citosztatikus hatású 2',3'-didexoxi-3'-fluor-pirimidin-nukleozidok előállítására
3 dot, amelynek képletében R 1—4 szénatomszámú alkil-csoportot, R' szulfoniloxi-, előnyösen meziloxi-csoportot vagy a pirimidin-gyűrű 2-helyzetű keto-csoportjához kapcsolódó hidat jelent, fluorozószerekkel kezelünk. A találmány szerinti pirimidin-02 ,3'-ciklo-2'dezoxi-nukleozidokat legfeljebb 20%, előnyösen 4—6% vízmentes hidrogénfluoridot tartalmazó szerves oldószerben, előnyösen egy éterben, mint dioxánban vagy tetrahidrofuránban melegítjük 15 perc és 6 óra közötti ideig, előnyösen 30—60 percig 60—100 C°, előnyösen 80—90 C hőmérsékleten. A reakció befejeződése után a fölösleges hidrogénfluoridot egy alkalmas vegyülettel, pl. CaC03-tal semlegesítjük, adott esetben a keletkezett CaF2-t elválasztjuk, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a kapott terméket kristályosítással vagy oszlopkromatográfiás úton tisztítjuk. A találmány szerinti eljárást más módon úgy kivitelezzük, hogy egy pirimidin 02 ,3'-ciklo-2'-dezoxi-nukleozidot szerves oldószerben, előnyösen egy- vagy többértékű alkoholban, mint metanolban, etanolban, glikolban vagy dietilénglikolban 1—10 órán át, előnyösen 1—2 órán át melegítünk egy fluoriddal, előnyösen KHF2-dal vagy NH4 F-dal 130—230 C° hőmérsékleten. A reakció befejeződése után az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a terméket oszlopkromatográfiásan, pl. celiten tisztítjuk. Pirimidin 02 ,3'-ciklo-2'-dezoxinukleozid helyett a találmány szerint a 3'-<helyzetű OH-csoporton szulfonilezett, pl. mezilezett pirimidin-nukleozidot is használhatunk, amely az adott reakciókörülmények között 02 ,3'-ciklo-2'-dezoxi-nukleozid közbeeső termékké alakul át. A találmány kényelmesen járható utat nyit az eddig ismeretlen 2',3'-didezoxi-3'-fluor-jpirimiidin-nukleozidok előállításához. A reakció megfelelő körülmények között nagy hozamot eredményez. Az érintetlen nukleozidba való fluorbevitel különös előnye, hogy a glikozidos kötés változatlan marad és így a reakciótermék szerkezete e tekintetben egyértelmű. A cukorrész más OH-csoportjain elhelyezkedő, a kiindulási vegyület előállítása során adott esetben szükséges védőosoportok, amelyek nem okoznak ciklonu!kleozid-képződést — ilyen például a tritilcsoport —, nem. befolyásolják a találmány szerinti reakciót. A találmány szerinti eljárással előállított 2', 3 '-didezoxi-3 '-f luor-pentof uranozil-pirimidin-nukleozidok meglepően erős citosztatikus hatást mutatnak. Így pl. az l-(2',3'-didezoxi-3'-fluor-/?-D-pentofuranozil)-timin erősen gátolja egerek Ehrlich—Ascites rákos sejtjeinek szaporodását és a DNS-szintézist. 3.10~5 m hatóanyagkoncentrációval in vitro a sejtszaporodás 97%-os gátlását, 2-10-4 m hatóanyagkoncentrációval a DNS-szintézis 50%-os gátlását értük el. A találmányt az alábbi példák világítják meg közelebbről. 4 1. példa 1 g 3'-0-mezil-timidin és 10 g KHF2 vagy NH4 F 100 ml dietilénglikollal készített oldatát 5 előmelegített fürdőn 90 perc alatt 190 C° fürdőhőmérsékletig melegítjük fel. Az oldószert vákuumban ledesztilláljuk (olajszivattyúval, legfeljebb 140 C° fürdőhőmérsékleten), a maradékhoz 3 ml forró vizet adunk, azután összekever-10 jük 10 g celittel. A keveréket 400 g celitet és 120 ml vizet tartalmazó 3,6X83 cm-es kromatografáló oszlopra visszük fel, és vízzel telített etilacetáttal eluáljuk. 10 ml-es frakciókat szedünk. A 6—18. frakció kartográfiai tisztaságú 1~(2',3-15 -didezoxi-3'-fluor^-D-pentafuranozil)-timint tartalmaz, amely kristályos alakban kiválik, ha az oldatot vákuumban betöményítjük és esetleg absz. etanollal újra desztilláljuk. Hozam: 106 mg (14%). A termék olvadáspontja 20 vízből vagy etilacetátból, petroléter hozzácsepegtetésével való átkristályosítás és 100 C°-on, 1 Hgmm nyomáson, foszforpentoxidon történő szárítás után 176—177 C°. A termék vékonyrétegkromatográfiás R/ értéke 0,25 mm vastag szilika-25 gélen vízzel telített etilacetáttal futtatva 0,41. UV abszorpció vizes oldatban: ímax 265,5 nm, 30 /min 234 NM, 0,ln NaOH-ban: /.max 266 nm, 35 Imin 245 nm. Ez a vegyület vizes-alkoholos nátronlúgban 16 órás forralás után majdnem teljesen átalakul 2',3'-didehidro-3'-dexoxi-timidinné. 40 2. példa 900 mg 02 ,3%ciklo-M2'-dezoxi-/?-D-xilofuranozil)-timin és 10 g KHF2 vagy NH/.F dietilén-45 glikolos oldatát az 1. példa szerinti módon 10 percig melegítjük 190 C°-on, vagy az említett reagensek etanolos oldatát bombacsőben 20 órán át melegítjük 150 C°-on, és a rekacióelegyet az 1. példában leírtakhoz hasonló módon 50 feldolgozzuk. 100—120 mg (12—14%) l-(2',3'-didezoxi-3'-f]uor-jS-D-pentafuranozil)-timint kapunk, amelynek jellemzői megegyeznek az 1. példában megadottakkal. 55 3. példa 330 mg 0-2 ,3'-ciklo-l-(2'-dezoxi^D-xilofuranozil)-timin és 30 ml 4—6%-os vízmentes dio-60 xános hidrogénfluorid oldat keverékét zárt acél vagy nikkel edényben 45 percig melegítjük 90 C°-os fürdőn. Az oldathoz lehűtés után kevés vizet adunk, kalciumkarbonát vagy nátriumhidrogénkarbonát hozzáadásával semlegesítjük, és a 65 kicentrifugált szerves csapadékot bőséges meny-2
