160060. lajstromszámú szabadalom • Eljárás penicillin előállítására

1600&0 6 A fermentáció 45— 61 órás korig 61— 75 órás korig 75— 85 órás korig 85—105 órás korig 90 NE/ml/óra 130 NE/ml/óra 76 NE/ml/óra 65 NE/ml/óra penicillin bioszintetizáló sebességet ért el. A fermentációt 105 órás korig folytattuk. 25 °C-on. A fermentáció csúcsaktivitása 105 órás io korban 7520 NE/ml volt. A 105 órás fermentáció cellás vákuum dobszűrővel előállított szűrletéből pH •= 2,5 értéken 1:5 arányban végzett butilacetátos extrakcióval, majd a szerves fázis 1 : 2 arányban végzett 4%-os nátriumhidrokar- 15 bonátos extrakciójával, a szervetlen fázis pH = = 2,5 értéken végzett újabb 1 : 5 arányú butilacetátos extrakciójával, ezt követően nátriumszulfáttal végzett vízmentesítés után sayszámra számolt káliumacetát mennyiséggel végrehajtott 2

c kicsapással, kiszűréssel és szárítással a fermentléből a penicillint kinyertük. A fermentációból 81,3 milliárd egység V-penicillin K-sót nyertünk ki. 25 2. példa: Az előző példában alkalmazottal megegyező a0 törzset 3 mS-es keverős vasfermentorban 1 : 0,7 arányú levegőztetés mellett 25 °C-on, 2 % szaharózt, 1,8% kukoricalekvárt, 0,5% kalciumkarbonátot, 0,5% pálmaolajat tartalmazó 6,l-es pH-jú steril táptalajon 44 órán át inokulummá növesztettük, ekkor pH-ja 6,6 volt. Az inokulum fermentációt 30 m3

-es keverős vasfermentorban elkészített 18 m3

, 1 % kukoricalekvárt, 1,8 % 'földimogyorólisztet, 0,1 % napraforgóolajat, 0,27% fenoxiecetsavat tartalmazó steril táptalajba oltottuk. A fermentációs táptalaj mennyiségéhez viszonyítottan az inokulum fermentlé mennyisége 10% volt. A fermentáció alatt átlagosan 1 :0,7 arányú, megfelelő keveréssel 3,7 szulfitértéket jelentő levegőztetést biztosítottunk. A fermentlé induló pH-ja 6,1 volt, ami fokozatosan emelkedett, majd 28 órás kortól a fermentáció végéig 0,07% nagyságú szaharóz adagok — 50%-os oldatban — folyamatos adagolásával a pH-t 7,0 értéken tartottuk. Ily módon összesen a fermentlé térfogatára számolva 5,0% szaharózt használtunk fel. A szaharóz koncentrációja a fermentleben 65 órás korban közelítette meg (0,2%) és 85 órás kor-35 40 45 50 55 60 65 ban haladta meg (0,28%)-a, katabolit represszió 0,25%, szintjét. A fermentációhoz habzás esetén habgátlóként 0,7 kg nagyságú adagokban steril napraforgóolajat adagoltunk, összesen 120 kg mennyiséget. A fermentáció 45— 65 órás korig 65— 85 órás korig 85—105 órás korig . 80 NE/ml/óra 125 NE/ml/óra 90 NE/ml/óra penicillin bioszintetizáló sebességet ért el. A fermentációt 105 órás korig folytattuk, 25 °C-on. A fermentáció csúcsaktiyitása 105 órás korban 7840 NE/ml volt. A 105 órás fermentáció feldolgozását az 1. példával egyező módszerrel végeztük el. A fermentációból 86,4 MME V-penicillin K-sót nyertünk ki. 3. példa: Az előző példában alkalmazotttal megegyező törzset 3 mS-es keverős vasfermentoriban 1:0.7 arányú levegőztetés mellett, 25 °C-on, 2 % szacharózt, 1,8% kukorioalekvárt, 0,5% kálciumkaribonátot, 0,5% pálmaolajat tartalmazó 6,l-es pH-jú steril táptalajon 44 órán át inokulummá növesztettük, ekkor pH-ja 6,6 volt. Az inokulum fermentációt 30 ms

-es keverős vasfermentorban 5,8 %r

tejsavóport (laktózt ártalma: 72%) 0,6 % szójalisztet, 0,9 % kukoricalekvárt, 0,27% nátriumtioszulfátot tartalmazó steril táptalajba oltottuk. A fermentációs táptalaj mennyiségéhez viszonyítottan az inokulum fermentlé mennyisége 10% volt. A fermentáció alatt átlagosan 1:0,7 arányú, megfelelő keveréssel 3,7 szulfitértéket jelentő levegőztetést biztosítottunk. A fermentáció induló pH-ja 6,1 volt, ami fokozatosan emelkedett és 35 órás korra elérte a 7,0 értéket. A fermentációhoz 30 órás kortól kezdve 85 órás korig adagoltunk steril ammóniumszulfát oldatot. Egy adag ammóniumszulfát 14 liter 40%-os oldat volt. 30—65 órás korig 65—85 órás korig 2 óránként 3 óránként 3