160041. lajstromszámú szabadalom • Eljárás oxim-0-szénsav-fenilészterek előállítására
160041 10 eentráció eléréséhez szükséges hatóanyagmenynyiséget összekeverjük a fent megadott menynyiségű oldószerrel, és a koncentrátumot a megadott adalékokat tartalmazó vízzel felhígítjuk. A permetezőszerrel 2 x 30 db kb. 2—4 hetes 5 rizsnövényeket csuromvizesre permetezünk. A növényeket 22—24 °C hőmérsékletű, kb. 70% relatív nedvességtartalmú melegházban tartjuk, amíg meg nem száradnak. Ezután a növények egy részét Piricularia oryzae 100 000—200 000 io spóra/ml koncentrációjú vizes szuszpenziójával megfertőzzük, és 24—26 °C hőmérsékletű, 100% relatív nedvességtartalmú helyiségben tartjuk. A növények másik részét maláta-agáron tenyésztett Pellicularia-sasaikii kultúrával fertőz- 15 zük meg, és 28—30 °C-on, 100% relatív nedvességtartalmú helyiségben tároljuk. 5—8 nappal az inakuláció után meghatározzuk az összes, a Piricularia oryzae-val való fertőzéskor meglevő levél fertőzöttségét a kezeletlen, azonban éppen úgy inokulált kontrolinövények százalékában. A Pellicularia sasakiival fertőzött virágok esetében a fertőzöttségét ugyanannyi idő múlva határozzuk meg a leve- 25 lek hüvelyén. 0% azt jelenti, hogy nincs fertőzöttség, 100% pedig azt, hogy a fertőzöttség ugyanolyan mértékű, mint a kontroli-növények esetén. Fertőzöttség a kezelétlen kontroll növények Hatóanyag fertőzöttségének százalékában száma " 0,05% 0,025% 0,05% 0,025% hatóanyagkoncentráció esetén a b 18 19 20 22 27 26 25 28 29 0 0 16 50 0 0 25 25 33 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 25 0 0 0 0 0 0 20 4. példa: Micéliumnövekedés-próba Alkalmazott táptalaj: 20 súlyrész porított agar-agar 30 súlyrész maláta extraktum 950 súlyrész desztillált víz A kurativ fungicid hatás vizsgálata céljából megismételjük a fenti próbát oly módon, hogy a hatóanyagot nem az inokulációs előtt, hanem csak 16 órával utána alkalmazzuk. A hatóanyagokat, hatóanyagkoncentrációkat és a kapott eredményeket az alábbi I. táblázatban adjuk meg. I. táblázat Piricularia(a) és Pellicularia(b) próba pr: protektiv kur: kurativ Fertőzöttség a kezeletlen ] kontroll növények Hatóanyag fertőzöttségének százalékában száma 0,05% 0,025% 0,05% 0,025% hatóanyagkoncentráció esetén a b XXXIII képletű vegyület (ismert) pr. 25 100 1 pr. 0 0 kur. 0 10 pr. 0 17 11 pr. 0 0 12 0 25 13 12 42 14 0 . 75 16 0 8 0 0 17 0 17 35 40 45 50 55 60 Az oldószer és táptalaj aranya: 2 súlyrész aceton 100 súlyrész agar-táptalaj A táptalajban a kívánt hatóanyagkoncentráció eléréséhez szükséges hatóanyagmennyiséget összekeverjük a megadott mennyiségű oldószerrel. A koncentrátumot a fenti súlyarányban alaposan összekeverjük a folyékony, 42 °C-ra hűtött táptalajjal, és 9 cm átmérőjű Petri-csészékbe öntjük. Ezenkívül kontroli-lemezeket készítünk, amelyekbe nem keverünk hatóanyagot. Amikor a táptalaj lehűlt és megszilárdult, a lemezeket beoltjuk az alábbi II. táblázatban megadott gombákkal és kb. 21 °C-on inkubáljuk őket. A kiértékelést a gombák növekedési sebessége szerint, 4—10 nap múlva végezzük. A kiértékelés során összehasonlítjuk a radiális micéliumnövekedést a kezelt táptalajon és a kontroli-táptalajon, és az alábbi értékekkel jelöljük: 0 nincs gombanövekedés, 1 erősen gátolt növekedés, 2 középerősen gátolt növekedés, 3 gyengén gátolt növekedés, 4 a növekedés ugyanolyan mértékű, mint a kezeletlen kontrollokon. A hatóanyagokat, hatóanyagkoncentráciőkat és a kapott eredményeket az alábbi II. táblá-65 zatban adjuk meg. 5