159675. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrapeptidamidok előállítására
5 159675 6 góljuk. A 20 óráig tartó stressz után a patkányokat felboncoljuk, a gyomrukat eltávolítjuk és megvizsgáljuk. Az eredményeket a III. táblázatban foglaljuk össze. III. táblázat Vegyületek N-t-butoxikarboml-glicil-L-triptofil-L--metionil-glicinamid N-t-butoxikaiiboml-glicil-L-triptofil-L-metionil-glicinamid N-t-butoxikanbonil-glicil-L-triptofil-L-meticHiil-glicinamid N-t-amiloxikarbonil-glicil-L-triptofil-L-metioinil-glicinamid Glutamin Reszerpin fekély Stressz fekély Megelőző Megelőző Dfe, is hatás Dóf s hatás m-/ k S mértéke mg/kg mértéke 5 — 10 10 + 25 20 ++ 50 25 00 100 Megjegyzés: megelőző hatás mértéke % fekélyképződés ellen: (++): >V5% (+): 50—75% (±): 25-50% (-): 25% Ha N-t-butoxikarbonil-glicil-L-triptofil-L-metionil-glicin-amidot 1—2 hónapon keresztül 15—50 mg napi adagban intravénásán vagy 0,5—2,5 g napi adagban szájon át adagolunk 1—2 hónapon keresztül gyomor- és nyombelfékélyben szenvedő felnőtt betegeknek, akkor a gyomortáji fájdalmak, étvágytalanság és gyomorégés szubjektív tüneteinek enyhülését figyeltük meg. A találmány oltalmi körébe tartozó vegyületek alacsony toxicitásúak. Az LD; -,o értéke egéren szájon át történő adagolásnál számítások alapján 5000 mg/kg-nál nagyobbnak adódik, míg intravénás adagolásnál számítás alapján 300 mg/kg-nál nagyobb. A találmány szerinti eljárás értelmében az új tetrapeptid-amidokat védett végihelyzetű [a-amino-csoportot tartalmazó glicil-L-triptofil-L-metionil-glicinészterek amidálásával állíthatjuk elő. A tetrapeptidek megfelelő' észterei közé azok tartoznak, amelyek legfeljebb 6 szénatomos rövidszénláncú . alkil-csoportot (pl. metil-, etil-, propil- vagy hu til), helyettesítetlen vagy nitro-, metil-, metoxi-csoporttal vagy halogénatommal helyettesített benzil-csoportot tartalmaznak. Az amidálást akként hajtjuk végre, hogy a megfelelő tetrapeptid-észtert oldószeres, pl. alkoholos közegben ammóniával kezeljük. Előnyösen ezt a reakciót alacsony hőmérsékleten végezzük. A reakcióközeg eltávolítása után a kapott maradélkot megfelelő oldószerből átkristályosítjuk, amikoris tiszta alakban a megfelelő tetrapéptid-amidhoz jutunk. Az átkristályosí.tásnál oldószerként etilacetát, alkanolok, vizes aikanolok stb. használhatók. 25 30 40 45 50 55 60 65 Véghelyzetben védett a-amino-csoportot tartalmazó glicil-L-triptofil-L-metionil-glicinészter a peptidkémiáiban szokásos módszerekkel állítható elő. Eszerint az aminosavakat az előbb említett szekvenciában kondenzáljuk külön-külön vagy előzőleg kisebb peptidegységeket képzünk, míg közben a reakcióban részt nem vevő funkciós csoportokat védjük. A kondenzációs reakció jellegétől függően a funkciós csoportok védelmére számos módszer áll rendelkezésre. Az amino-csoportok védelmére pl. az N-acilezés vált be és acil-osoportkánt a már említett vegyületeket használjuk fel. A metionin amino-csoportját azonban hidrolízissel könnyen eltávolítható védőcsoport felhasználásával (pl. izobutoxikaíbonil-, t-butoxikarbonil-, t-amiloxikarfoaml- vagy orto-nitroszulfonil-csoport) védjük. A karboxil-csoportot előnyösen észterezéssel védjük a reakció közben, vagyis alkil-észt«rt (pl. metil- vagy etilésztert) vagy aril-észtert (pl. benzilésztert) képzünk. A peptid kívánt észterét vagy szakaszos módszerrel alakítjuk ki, vagy a több lépéses kondenzációs módszert alkalmazzuk. Az utóbbi esetben a molekulát felépítő részek tetszés szerinti kombinációját alkalmazhatjuk. A kondenzációs reakciót a szokott módon is lefolytathatjuk. így a kafbo-diimides, azidosmódszer, az aktivált észterek vagy kevert anhidrideik módszere felhasználható a találmány szerinti tetrapeptidészterek előállításánál. A kondenzációs reakciót az első három esetben célszerűen 0 C° alatti, főként —5 C° és —10 C° közötti hőmérsékleten végezzük. Az utolsó esetben pedig a reakciót szobahőmérsékleten folytatjük le. Iners oldószerek, mint kloroform, diklórmetán, tetrahidrofurán, dioxán és dimetilformamid a felsorolt reakcióknál oldószerként szolgálhatnak. A védett amino-csoport fel-3
