159648. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az SL 3238 antibiotikum előállítására
3 159648 4 Az egyik előnyös módszer abban áll, hogy a fermentlétől elválasztott micéliumot mechanikusam elroncsoljuk, és a vizes mieéliumszuszpenziót és a micéliummentes tenyészoldatot etilénkloriddal extraháljuk, de más szerves ol- 5 dószerek, például benzol, kloroform, butilacetát, metilénklorid vagy butanol is használhatók. Az új antibiotikum közvetlenül a koncentrált kivonatból való kicsapással izolálható. Az új SL 3238 antibiotikum jellemző adatai io a következők: Bruttőképlete C27H41NO7; molekulasúlya 492; olvadáspontja 160—161 C°. Fajlagos forgatóképessége [a]20 D =—102° (c = 0,47, kloroformban). 15 Ultraibolya színképe (metanolban) ^ max. = = 203 nm {log £ = 4,57), 291 nm (log e == = 3,75) (lásd 1. ábrát). Infravörös színképe (Nuj ólban) 3450, 3300, 3150, 2900, 2840, 1650, 1580, 1560, 1540, 1460; 2 0 1380, 1350, 1245, 1150, 1130, 1105, 1095; 1045; 940, 790 cm-'' (lásd a 2. ábrát). Az új antibiotikum erős fuingisztatikus hatást fejt ki gombafertőzéseik különféle kórokozóival 25 szemben. Különösen kiemelkedő a jó in vitro hatékonyság a következő mikroorganizmusokkal szemben: 30 35 40 45 50 55 60 fi? Legkisebb gátló hatóanyagMikroorganizmus koncentráció /tg/ml Candida albicans 2 Candida tropicalis 4 Trichophyton mentagrophytes ; 1 Histoplasma capsulatum 10 Aspergillus fumigatus 40 Trichophyton tonsurans 2 Trichophyton rubrum 1 Epidermophyton floccosum 2 Microsporum audouinii 1 Microsporum canis 1 In vivo 10—50 mg/kg (melegvérű testsúly) a szükséges adag dermatofiták elleni rendszeres hatás elérésére, az elérni kívánt hatástól és az alkalmazás módjától függően. Általában nagy emlősállatok részére 150—250 mg-os napi adag bizonyult előnyösnek, célszerűen naponta egyszer beadva. Perorális alkalmazásra szánt gyógyszerkészítmények 150—200 mg hatóanyagot tartalmaznak folyékony vagy szilárd hordozóval keverve. Helyi kezelésre 0,1—2% hatóanyagot tartalmazó porok, permet, kenőcsök, tinktúrák használhatók. A találmány szerinti SL 3238 jelű antibiotikumot gyógyszerként magában, akár olajos formában, akár nyerskoncentrátumként, vagy helyi vagy perorális alkalmazásra szánt gyógyszerformákban használhatjuk. A következő példában szemléltetjük az eljárást korlátozás szándéka nélkül. A hőmérsékleti adatokat Gelsius-fo'koban adjuk meg. Az olvadás-, illetve bomláspontokat Kofler-blokkon határoztuk meg. Példa: Egy fermentofba betöltöttünk 2900 liter; literenként a következő összetételű táptalajt: Cerelose • 40,0 g nátriumnitrit 8,5 g káliumhidrogénfoszfát 2,7 g magnéziumszulfát • 7 H9O 1,2 g vas(II)szulfát-7H2 0 28,0 mg cinkszulfát • 7 H2 0 3,0 mg ionmentesített vízzel kiegészítve 1 literre A táptalajt beoltjuk a Penicillium purpurogenum Stell NRRL 3364 törzsének a következőkben leírt módon előállított előtenyészetével, és levegőztetés (1,2 liter levegő/perc/liter-táptalaj) és keverés (100/perc) közben 90 óráig 27°-on inkubáljuk. A fermentlevet (2600 liter, pH = 5,6) centrifugáljuk. A micéliumot (165 kg) 2 ízben 210—210 liter metanollal Ultra-Turraxban feltárjuk. Szűrés és 50 liter víz hozzáadása után a metanolt ledesztilláljuk, a vizes fázist és a fermentlé-szűredéket együtt azonos térfogatú etilénkloriddal extraiháljuk. A szerves fázist vákuumban 5 literre bepároljuk, és ezt a bepárolt kivonatot 3 ízben 4—4 liter petroléter és 9:1 arányú metanol-víz elegy között megosztjuk. A metanolos-vizes fázist vízzel felhígítjuk, majd a metanolt vákuumban elűzzük. A visszamaradó vizes fázist 3 ízben 10—10 liter kloroformmal extraháljuk, és a kloroformos oldatot 1,5 literre bepároljuk. A tömény kloroform oldatból a tiszta SL 3238 antibiotikumot éter hozzáadásával kiválasztjuk. Az előtenyészet a következőképpen készül: Két fokozatban — 50 illetve 300 literes — tenyésztjük az előtenyészetet az előzőekben leírt főtenyészettel azonos módon. Az első, 50 literes fokozat beoltására használt spcraszuszpenzió az eredetileg izolált törzs tenyészetéből készül, azt 19 napig 27°-on a következő összetételű agaros táptalajon tenyészt-Cerelose . 20 g szálas agar 20 g malátakivonat 2 g élesztőkivonat 2 g pepton 2 g káliumhidrogénfoszfát 2 g magnéziumszulfát • 7 H2 0 2 g ionmentesített vízzel feltöltve 1 literre 2
