159356. lajstromszámú szabadalom • Eljárás B12-vitamin előállítására
MAGTAR NÉPKÖZTABSASÄG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1969. XII. 19. (Rí—382) Közzététel napja: 1971. III. 16. Megjelent: 1972, V. 31. 159356 Nemzetközi osztályozás: C 12 d 5/06 Feltalálók: Tulajdonos: Kiss János vegyész, 19%, Zeller István vegyésztechnikus, 19%, Szemler Richter Gedeon László vegyészmórilök, 13%, Székely Dénes vegyészmérnök, 13%, Dr. Jo- Vegyészeti Gyár Rt., han Béla mikrobiológus, 12%, Simon István vegyésztechnikus, 12%, Budapest Tornyi Mihály vegyipari szakmunkás, 12%, Budapest Eljárás B12-vitamin előállítására A találmány új eljárás B12 -vitaminnak (cianakobalamin) és egyéb B12 -vitaminhatású faktoroknak metámtermelő vegyes baktériumpopulációval lefolytatott anaerob szeptikus fermentáció útján történő termelésére és az így kapott B12 -vitaminnak a fermentációs termékből való kinyerésére. Ismeretes, hogy a B12 -vitaminnak és B 12 -vitaminhatású fajktoiroknjaik a metánltenmelő vegyes bafctériumpopulációval, anaerob körülmények között lefolytatott szeptikus fermentációja során a baktériumpopuláció összetétele és sajátságai, valamint B12 -ternie ! lőképessége nagymértékben függ a fermentáció körülményeiitől és az alkalmazott táptalaj összetételétől, de valamennyi ismert ilyen B12 ^vitami>nterrnelő mikroorganizmus közös tulajdonsága, hogy egyrészt a bioszintézis útján létrehozott cianokobalamint ás egyéb B12 -haitású faktorokat saját sejtjükön belül, a plazmafehérjéhez kötve halmozza fel és így a fermentáció befejezésekor külön feltárási műveletre van szükség ahhoz, hogy a termelt Bi2 -vitamint és B 12 -hatású faktorokat a sejtből kiszabadítva kinyerhető állapotba hozzuk, másrészt a mikroorganizmusnak a cianokobalaimin és a B12 -ihatá!sú faktorok bioszintéziséhez egy specifikus prekurzorvegyületre, 5,6-dimetilbenzimidazolra van szüksége, hogy a oianokobalamiinmölekula nukloetid-részét kialakíthassa. Különféle egyéb aromás vegyületeket adva a B12 -vitam;int termelő törzsek (Streptomices griseus sp., Aerobacter Aerogenes sp., stb.) táptalajához, hatástalan B12 -ana-5 lógok keletkeznek. [Dellweg H., Becher E., Bernhauer K.: Biochem. Zeitech. 327, 422—449 (1956); 945 648 sz. NSZK szabadalmi leírás.] Ezt a prekurzort, az 5,6-dimetilibenzimida2olt, 10 amely vízben igen rosszul oldódik, az ismert eljárások esetében alkoholos, pl. metanolos oldatban adják a (táptalajhoz, egy liter táptalajra általában 1 mg mennyiségben. A B12 -vitamin bioszintézise úgy történik, hogy a mik-15 roorganizmus^sejten belül fehérjéhez kötött alakban kialakult korrin-vázhoz riibózfoszfát segítségével hozzáépül a táptalajhoz adott 5,6-^dimatfflbenzimidazol, s így a sejtlen belül fehérjekötésiben jön létre a metabolizmusban 20 fontos szerepet játszó tkobamid tooenzim. A sejt feltárásával ez a kobamid koenzim lehasad a sejt-fehérjéről s a B12 -viitamin oldatba kerül [Berinhauer K., Friedrich W.: Angew, Chem. 66, 776—780 (1954); 842 527, 947 193 és 25 884 856 sz. NSZK szabadalmi leírások], A fermentáció során termelt Bi2 -vitamin kinyerése céljából végzett feltárást általában hőhatással végezték: a fermenitlé (vagy esetleg a fermentléből előzetesen elkülönített biomassza) 60—90 30 C°-on történő hőkezelése elpusztítja a mikro-159356
