159347. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hasnyálmirigyek extrahálására
7 159347 8 Az eredményekből világosan 'látható, hogy a kénsav, majd sósav jelenlétében végrehajtott extrafcaió utján az elegy oentráifugálhatósága erősen javul, és a 8-as pH-n végrehajtott szűrés ideje jelentősen csökken. Az elkülönített fehérje mennyisége a csak sósav jelenlétében végzett extraikció sarán (kapott fehérje mennyiségeven lényegében tazomas. 2. példa: 200—200 g sertés-hasnyálmiTigyet az 1. példában leírt módon extoahálunk, azzal a különbséggel, hogy a kénsavas extrakeiót 30 percig végezzük. Az extrakció összideje 105 perc. Az eredményeket a 3. táblázatban foglaljuk össze. 3. táblázat Sav pH Extrakció ideje, perc Sziűrés ideje, perc pH = 8-tan levált csapadék térfogata, a nyers .kivonat %-ában Biurets reakció eredménye hasnyálmirigy kg-4sónt H2 iS0 4 H2 ß0 4 majd HCl H2SO4 majd HCl H2íS0 4 majd HCl 2,0 105 2,5 30 2,0 75 3,0 30 '2,0 75 3,5 30 2,0 75 76 313 76 60 4,7 4,3 3,7 4,0 31,5 41,91 50,81 616,213 Az eredményebői látható, hogy hosszabb ideig tartó kénsavas extralkció esetén az elegy cantiiifugálhatösága jelentősen javul, és a 8^as pH-^n levált csapadék szűrésének ideje tovább csökken. 3. példa: Az előző példákban leirt módon öt extrákciós kísérletet hajtunk végre. Két kísérletben 50—50 i]jg szairvasmadhaHha^snyálimiirigyből, míg három kísérletten 50—50 kg sertés-hasnyálmirigyből indulunk ki. A kénsavas extrakció során a közeg pH-ja .rendire 2,8, 2,8, 2,5, 2,3, ill. 3,0. A kénsavas extralkoiót minden kísérletben 30 percig végezzük. Ezután iaz elegy pH-ját sósavval 2,0-ira csökkentjük, és az extrakciót további 1/2 óráin át folytatjuk, majd az elegyet centrifugáljufc. A 12 peréig tartó oentrifugálás után kapott 900 g hasnyálmirigyet még kétszer extraháljuk. A '.második extirakciót 2,5, a harmadikat 1 térfogatrész 60%-os etanolaH végezzük, a közeg pH-ját kénsavval, majd sósavval a fent .megadott éirtékre állítjuk be. Centrifugélás után a kivonatokat egyesítjük, és pH-ját 8~m állítjuk, majd 3 m2 felületű présszűrőn szűrjük. A szűnés az egyes kísérletekben kb. 12 percet vett igénybe, míg az 35 40 45 50 55 azonos körülmények között, azonban csak sósav jelenlétében végzett extralkciót követő szűrés 3 órán át tart. Szabadalmi igénypontok: 1. El járás inzulin kivonására hasnyálmirigyekből, azj inzulint oldó, megsavainyítiott oldószerrel, azzal jellemezve, hogy a hasnyálmirigyet első lépésben kénsavval megsavainyított oldószerrel extraháiljuk, majd az extrakciós elegyhez sósavat adunk, és folytatjuk az extrahálást. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kénsavas extralkciót 2,4—5,12. közötti pH-órtéken végezzük. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jielllemezve, hogy a kénsavas extrakeiót legalább 30 percig végezzük. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a sósav hozzáadásával az elegy pH-ját 2,0 körüli értékre alítjuk be, és .az extrakeiót előnyösen 2,0 pH-értéken előnyösen 75 percig végezzük. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 7207186. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. 4
