159088. lajstromszámú szabadalom • Eljárás parcialisan dezaminalt L-aszparaginaz előállítására
5 159088 6 5. példa: 10 g, kb. 180 egység/mg anyag tisztaságú L-aszparaginázt kb. 100 cm3 vízben feloldunk. 1 g nátriumnitritet, 1 g nátriumacetátot és 500 mg 5 szalicilsavat adunk hozzá, és az oldatot + 4°C-ra hűtjük. Lehűlés után a pH-értéket 1 n ecetsavval 4,8-ra állítjuk be, és az elegyet kb. 14—16 órán át + 4 C C hőmérsékleten tartjuk. Ezután 1 g karbamidot adunk az oldathoz, és 10 szobahőmérsékleten melegítjük, majd frakcionáltan lecsapjuk a reakcióelegyet. Ezt úgy végezzük, hogy 40 térfogat% olyan vizes polietilénglikololdatot (mólsúly 1550) adunk hozzá, amely 50 súlyrész polietilénglikolból és 50 súlyrész vízből 15 áll. 30 perc állás után a csapadékot hűtőcentrifugán elválasztjuk, és a felső ré+eget eldobjuk. Az így kapott csapadékot jéghideg acetonban diszpergáljuk és újra centrifugáljuk, majd szobahőmérsékleten vákuumban szárítjuk. 20 Kitermelés az elméleti kitermelés 80—90%-a. 6. példa: 25 Az 5. példa szerinti módon járunk el, azonban szalicilsav helyett 100 mg fenolt adunk hozzá. 7. példa: 30 Az 5. példa szerinti módon járunk el, azonban szalícilsav helyett 300 mg szulfoszalicilsavat adunk hozzá. 35 8. példa: Az 5. példa szerinti módon járunk el, azonban szalicilsav helyett 200 mg cc-naftolt alkalmazunk. A kitermelés kb. az elméleti kitermelés 40 80%-a. 9. példa: Az 5. példa szerinti módon járunk el, azonban szalicilsav helyett 200 mg ^-naftolt alkalmazunk. A kitermelés kb. az elméleti kitermelés 80%na. 10. példa: Az 5. példa szerinti módon járunk el, azonban szalicilsav helyett 200 mg naftol-1-szulfonsav-4-et alkalmazunk. A kitermelés kb. az elméleti kitermelés 80%-a. A kiadásért felel: a Közgazdasági 7108844. Zrínyi (T) Nyomda, Budapí 11. példa: Az 5. példa szerinti módon járunk el, azonban szalicilsav helyett 200 mg fenol-szulfonsav-2-t alkalmazunk. A kitermelés kb. az elméleti kitermelés 80%-a. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás parciálisan dezaminált L-aszparagináz (aszparagináz X) előállítására, azzal jellemezve, hogy L-aszparaginázt valamely oldószerben salétromossavval vagy a salétromossav vízoldható sójával vagy a salétromossav valamely 1—7 szénatomos alifás alkohollal képezett észterével reagáltatunk, adott esetben sav jelenlétében. (Elsőbbsége: 1968. október 18.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót oldószerként víz jelenlétében vagy víz és szerves oldószerek, így egy- vagy többértékű alifás alkoholok, vagy ketonok elegyeinek jelenlétében valósítjuk meg. (Elsőbbsége: 1968. október 18.) 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 1 mól L-aszparaginázra kb. 5—180 mól, előnyösen 40— 80 mól salétromossavat adagolunk. (Elsőbbsége: 1968. október 18.) 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az L-aszparaginázt az oldószerre számítva kb. 0,1—15 súly%, előnyösen 3—10 súly% koncentrációban adagoljuk. (Elsőbbsége: 1968. október 18.) ' 5. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót —30 °C és 20 °C közötti, előnyösen 0 °C és 5 °C közötti hőmérséklettartományban valósítjuk meg. (Elsőbbsége: 1968. október 18.) 6. Az 1—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót valamely vízben oldódó nukleofil akceptor jelenlétében valósítjuk meg. (Elsőbbsége: 1969. április 19.) 7. A 6. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy akceptorkénf teljesen vagy részben vízben oldódó aromás vegyületeket, így fenolokat, fenilkarbonsavakat, fenilszulfonsavakat vagy aromás alkoholokat alkalmazunk. (Elsőbbsége: 1969. április 19.) 8. A 6. vagy 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az akceptort a dezaminálandó L-aszparaginázra számítva 0,1—10 súly'% mennyiségben adagoljuk. (Elsőbbsége: 1969. április 19.) és Jogi Könyvkiadó igazgatója. st V., Balassi Bálint utca 21—23. 3
