159088. lajstromszámú szabadalom • Eljárás parcialisan dezaminalt L-aszparaginaz előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1969. X. 17. (BA—2295) Német Szövetségi Köztársaság-beli elsőbbségei: 1968. X. 18. (P 18 03 782.6), 1969. IV. 19. (P 19 20 045.4) Közzététel napja: 1971. II. 06. Megjelent: 1972. IV. 30. 159088 Nemzetközi osztályozás: C 12 d 13/10 Feltalálók: Tulajdonos: Dr. Irion Eckart vegyész, Dr. Arens Alfred vegyész, Dr. Rauenbusch Farbenfabriken Bayer AG. cég, Erich vegyész, Dr. Bauer Klaus vegyész, Dr. Wagner Otto vegyész, Leverkusen, Dr. Bierling Robert biológus, Dr. Pütter Johann vegyész, Német Szövetségi Köztársaság Wuppertal^Elberfeld, Német Szövetségi Köztársaság Eljárás parciálisan dezaminált L-aszparagináz előállítására A találmány tárgya eljárás parciálisan dezaminált L-aszparagináz (aszparagináz X) előállítására. Az eljárást az jellemzi, hogy L-aszparaginázt valamely hígítószerben salétromossavval vagy valamely, salétromossavat szolgáltató ve- 5 gyülettel reagáltatunk. Az eljáráshoz bármilyen, tetszőleges módszerrel kapott L-aszparaginázt felhasználhatunk. Általában mikroorganizmusokból, például E. coli 10 sejtekből (Id. Biochemistry 6, (1967) 721—730) vagy Serratia marcescens sejtekből kinyert L-aszparaginázt alkalmazunk, azonban természetesen a régebbi módszerekkel nyers kristályos L-aszparaginázokat is felhasználhatjuk. 15 Salétromossavat szolgáltató vegyületekként a szokásos vegyületek jönnek szóba. Különösen alkalmasak az alkálifém- (előnyösen nátriumvagy kálium-) és alkáliföldfémnitritek, vala- 20 mint az izoamilnitrit, de természetesen a nitrogénoxidok is. A találmány szerinti eljárást általában víz jelenlétében valósítjuk meg, amely reakcióközegként szolgál. Adott esetben a salétromossavnak a sóból való felszabadítására 25 megfelelő mennyiségű savat (például rövidszénláncú alifás karbonsavat, előnyösen ecetsavat, vizes sósavat, kénsavat, brómhidrogénsavat) adunk hozzá. Ekkor a pH-értéket kb 3,5—6,5-re, előnyösen kb. 5-re állítjuk be. 30 Adott esetben célszerű lehet az is, ha reakcióközegként közvetlenül a fenti savak egyikét alkalmazzuk. Az alkalmazott savmennyiségnek legalább ahhoz kell elegendőnek lennie, hogy a szükséges mennyiségű salétromossavat szabaddá tegye és a fenti pH-értéket beállítsa. A reakciót természetesen víz és szerves oldószerek .elegyeiben is megvalósíthatjuk. Ilyen oldószerek lehetnek például az egy- és többértékű, 1—4 szénatomos, előnyösen 1—2 szénatomos alkoholok, a ketonok, például az aceton, metiletilketon vagy dietilketon. Számításba jönnek továbbá az ismert, vízzel elegyedő oldószerek is, így például a dioxán, tetrahidrofurán, dimetilformamid vagy dimetilszulfoxid. A találmány szerint eljárás egy előnyös foganatosítási módja szerint olyan vizes L-aszparagináz-oldatokat alkalmazunk, amelynek legfeljebb kb. 10 súly% 500—50 000, előnyösen 1000— 6000 mólsúlyú polietilénglikolt tartalmaznak. Alkalmazhatunk természetesen többértékű alkoholokat is, így például etilénglikolt, propilénglikolt, butándiol-l,4-et, glicerint és hasonlókat a fenti mennyiségben vízzel összekeverve. Szerves oldószerként használhatunk továbbá fenolokat, kreozolokat, xilenolokat is legfeljebb kb. 10 súly% mennyiségben, vízzel vagy vízzel elegyedő szerves oldószerekkel összekeverve. 159088