158690. lajstromszámú szabadalom • Eljárás száj- és körömfájás elleni oltóanyag előállítására
3 158690 4 talajokat elválasztjuk, és azokból önmagáiban isimért módon végzett inaktiválás után oltóanyagot állatunk elő. A találmány szerinti eljárás előnyös foganatosa tási módja szerint két egymás után következő tenyésztést végzünk ugyanazon nyelvfaármzavet-preparátummál; eljárhatunk azonban úgy is, hogy hasomló módon egymás után több tenyésztési lépést alkalimazunik. A találmány szerint eljárhatunk úgy is, hogy a tenyésztés végén a nyelrvfaámszövet-prieparátumlban található vírusokat extraháltjuk. Ennek az extrakidiós lépésnek azokban nines jelentősége, minthogy a vírusok nem a nyelvhámszövefben, hanem főként a folyékony táptalajban találhatók. — A Allier 60 — A Valais 68 — A Gréce 69 -—- C Corréze 65 — O Espagme 64 — O Lausanne 65 — O Grand e-Bretagne 67. Általában jó eredményeket ellhetünk el oly módon, hogy az első tenyésztést kb. 15—.30 óráig végezzük, majd a második tenyészetet kb. 3—12 óra alatt fejlesztjük ki. Az optimális tenyésztési időt minden esetiben a kapott oltóanyag aktivitásának vizsgálatával határozhatjuk meg. A találmány szerinti eljárásit az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbiakban részletesen ismertetjük. Legföljebb 1 órával korábban leölt marhák nyelvét vízzel és alkohollal mossuík, majd ultraibolya fénnyel besugározzuk, s ezután eltávolítjuk a nyelvhámszövetet. A nyelvihámszövetet sonikavágó géphez hasonló szerkezettel feldaraboljuk. Az így kapott bámszövert-dairaibokat antibiotikumot tartalmazó tartósító folyadékba helyezzük, és 4 C° alatti hőmérsékleten tároljuk. A hámszövet-preparátumok így maximálisan 48 órán át tárolhatók, a preparátumokat azonban előnyösen 24 órán belül ftíUtoaszniáljiuk. A nyelvtómBzavetHpreparátumolkat táptalajba helyezzük, majd viirustenyészettel beoltjuk. 1 liter tenyészetihez kfo. 0 db nyelwhárnszöfvet-fpreparátumot hiasznáiunk fel. 10 15 A találmány szerinti eljárásban valamely ismert tenyészitáptalajt, mint pl. Frenkel-táp- 20 talajt is alkalmazhatunk. A Frenkel-taptalarj összetételére vonatkozó részletes táj>ákoztatás található H. S. Frenlkel fentebb megadott cikkeiben. Az egymást követő tenyésztések időtartama függ a felhasznált virus típusától. Jó erediményslket értünk el a száj- és körömfájás vírusának alábbi törzseivel szemjbsn: 25 30 35 40 45 50 55 60 A tenyészetet folyamatosan levegőztetjük állandó 37 C° hőmérsékleten. Ezt a hőméTsékletiet vagy úgy tartjuk fenn, hogy a tenyészetet tartalmazó, rozsdamentes acélból készült, kettősfalú edény falai között viaet áramoltatunk, vagy pedig külön hőmérsókletszabályzó berendezést alkalmazunk. Az eljárásban a következő, a klasszikus Frenkel-táptalajnak megfelelő összetételű táptalajt alkalmazzuk: Pepton CEsztein • HCl Hemin Inzulin Tiroxin Q'ükóz Glutation NiaCl KCl Cad, MgC\>-QH.2 0 N&H2 PO„ • 2H2 0 Na,HP04 -2H,0 NaHOQ, NiaCH (N) Niacin Lizin Arg'inin Meitonin Leucin Panto ténsav Fenilalanin Treonin Triptofán Hisztidin Víz g. s. ad [Dufoouclard, Bouimiantzefif, Fontaine és Machowialk: Bull. Soc. Sei. Vet., Lyon, 1966. 68 (3), 243—53 old.] A tenyészetet „C, Vosges 60" vírussal oltjuk be. 30 nyelvhez 1010 DEOP 50 vírust alkalmazunk. A DECP 50 megjelölésen olyan virusdózist értünk, amely 1 mil dísznóvese-egysejttenyészetre az esetek 50%-ában citopatogén hatást gyakorol. A táptalajokat 37 C°-ra melegítjük, és az első tenyészetet 15 órán át ezen a hőmérsékleten tartjuk. Ezután az e!$ő tenyészetet a reakicióedényből leeresztjük, a fertőzött hámszöveteket az edényben hagyjuk, és az edényt az előzővel azonos mennyiségű friss táptalajjal töltjük feil. A rendszert 37 C°-4Pa melegítjük, és a második tenyé.szetet 4 órán át fejlesztjük. A tenyészetet lehűtjük, és a második tenyészet-oldatot felfogjuk. 3,000 g 0,096 g 0,096 mg 0,9 NE 0,0-9 mg 1,00 g 0,01 g 7,2 g 0,18 g 0,18 g 0,09 g 0,076 g 0,524 g 1 g 1,25 ml 0,001 g 0,200 g 0,041 g 0,200 g 0,130 g 0,250 mg 0,025 g 0,0425 g 0,05 g 0,0306 g 1000 ml A kapott táptalajok a következő tulajdonsá-65 gokkal rendelkeznek: 5
