158546. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoportok átmeneti megvédésére peptidszintéziseknél
158546 2-tfenü^zopropiloxikarbonil4ádrazidot kapunk színtelen, viszkózus olaj formájában. Op.: 95— 98°/l(T3 Hgmm. A hidrazid 20,6 g-ját (0,106 mól) 320 ml dimetiMormamidban oldjuk, —20° — —30°-ra hűtjük, és 160 ml 1,94 n sósavval elegyítjük, miközben a hőmérséklet —20°-on marad. Ezután —15° — — 20°-on 23,2 ml 5—M nátriiumnitritoldatot csepegtetünk hozzá. Még 15 percig ugyanezen a hőmérsékleten keverjük, majd telített nátriumkarbonátoldattal a pH-t 6—7nre állítjuk be. Az elegyet 800 és 400 ml éterrel extraháljuk, mindkét étenes oldatát 0°-on vízzel háromszor mossuk, egyesítjük, nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban 30°-on szárazra pároljuk. A maradékot óvatosan nagyvákuumban ledesztilláljufc, és így 17,5 g azidot kapunk sárgás olaj formájában. Op.: 47—51"/ /Ö7OO5 Hgmm. Az infravörös spektrum a várt vonalakat mutatja. (Azid-vonalak 4,6 és 4,7 /x (felhasadás); karbonil-vonalak 5,8 /x). 2,45 g (12 mmól) fenilHizopropiloxikarboniil-azid 14 ml dimetüformamidos oldatát 5,75 g N^teroier-butiiloxáJkaiiHbonil-L-lizin-nietilészter-Haeetáttal (18 mimól) és 2 ml dimetilformamiddal elegyítjük. Keverés közben 0°-on 1 1/3 órán át lassan 4,15 ml trietiüiamint csepegtetünk hozzá. A tiszta oldatot ezután 3 napon át hűtőszekrényben állni hagyjuk, 50 ml éterrel történő hígítás után 0°-on többször 0,1 mól citromsavoldattal kirázzuk, majd vízzel semlegességig, nátriumszulfát felett szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradákot nagyvákuumban súlyállandóságtig szárítjuk és kroniatagráíiailag egységes, viszkózus olajat - kapunk. ra áll be. 7 perc múlva 2—N sósavat adunk hozzá 8,5 pH-ig. A keletkezett oldatot vákuumban kb. a felére töményítjük, még 50 ml vízzel elegyítjük és éterrel kétszer extnaháljuk. 5 Az éteres oldatot még kétszer vízzel mossuk, az egyesített vizes oldatokat 0°-on citromsavval 2 pH-ra savanyítjuk és éterrel extraháljuk. Az éteres oldatot semlegességig történő mosás, náitriumszulfátos szárítás és szűrés után dicik-10 lohexilamiinnal lúgosítjuk, kb. 30 mlnre törnényítjük, ugyanannyi petroléterrel elegyítjük és kristályosítjuk. így 8,4 g N--(2-jp-itolálliíz;opropil-OxifearibonüJ-glicinndiciiklo^hexiiila'mímániumsóit kapunk. Op.: 145—147°. Ecetésztertbői kikristá-15 lyosítva. az anyag 147—148°-<m olvad. 3. példa: («) 20„ -6° +0,5° (c=2 kloroformban). Ki-20 termelés: 4,83 g = 95%-a az elméleti Ná-(2--fenil-izopropiloxi-karbonilJ-Ns-tercier-butiloxikarbonil-L-lizin^metilészter kitermeilésnek. Az 1. pontban leírtak szerint lehet a para-diifenilizqpropiloxilkaribonil-ctsoportot glicinetilészteirhez kapcsolni, így N^(2-p^difenilizoprop;noxikarb»nil)-glieinetüészterhez jutunk, amely metanoillból kristályosodik. Op.: 122°. 2. példa: 2-p-tolíil-izopropiloxikairibonil-csoport bevezetése 6,i22 g p-tolil-dimetilikarbinolt (41,5 mmól), 4 ml abszolút piridint és 5,35 g (41,5 mmól) izociáneoeltsavetilésztert 38 órán át 50°-on tartunk és az 1. példában leírtak szerint feldolgozunk. 9,8 g N-(2-p-tolil-izopropiloxi!kanbonil)-glicinetilésztart kapunk sárga olaj formában; Rí = 0,25—0,35 kloroformban. Elszappanosítás céljából az észtert 100 ml 80%-os metanolban oldjuk, pH-mérőn 24 ml 1,9 n nátronlúggal gyorsan elegyítjük, mélynek során a pH 11,8-2-í enil-izopropiloxikarfooníil-csoport lehasítása 1) 418,6 mg N-(2-jfenil-izopropiloxikarbonil)-gliein-dioifckfeexilamímóniumsót szobahőmér-25 sélkleten 4,2 ml 7 tf. eeétészter-, 1 tf. 82,8%-os hangyasav-, 2 tf. vízelegyben oldunk. 4 óra múlva vékonyréteg-kromatograim kimutatja, hogy kb. 95% lettiasadt. Az elegyet 6 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd 20 mi 50 acetonnal elegyítjük, a kivált glicint leszűrjük és acetonnal jól kimossuk. Az víztiszta és kromatográfiásan egységes. Kitermelés: 68,5 mg = = az elméleti 91,4%-a. Hasonló körülmények között a tercier-bütiloxikarbinol-gflieinjetilész-35 ter változatlan marad. 2) 71,7 mg (0,27 mmól) N-(2^fenil-izopropil-O'xikaribonilJ-glacin-etiléisztert 25°-on 1,35 ml 80%-os ecetsavban oldunk. Különböző időnként 40 0,20 ml mintát veszünk, azt 4 ml dimatilformamidhoz adjuk és 0,1 n jégecetes perklórsavval megtitrálj.uk. (A felszabadult glicin-etilésziter, titrálása.) A vódőcsoport lethasításának fielezésii ideje kb. 2 óra. 24 óra múlva a lehasadás 45 kvantitatív. A vakonyrétag-kromatogramon sem mutathatók ki kiindulási anyag nyomok. Ugyanilyen körülmények között az N-tercier-butiloxikarlbonil-gllicin-etilészter 'N-védőcsoportja változatlan marad. 50 Hasonló módon az N-(2-p-difenilizopropiloxikarbonil)-gliciin^etilészter 3 1/2 óra. alatt kvantlitatíve lehasítható. 55 3) 68,8 mg N-(2-ifenil-izQpropiloxikaírbonil)-glicin-etilésztert 2,6 ml 60%-os klóreoetsaVban szobahőmérsékleten oldunk. Különböző időközökben 0,20 ml próbákat veszünk, azokat 4 ml díimetilformamidhoz adjuk és 0,1 n ecetsa-60 vas perklórsavval megtitráljuk. 15 perc múlva a vegyület kvantitatíven letbasad. A BOC-cS'O-port kb. 1900-szor lassabban hasad le. A következő táblázatiban a hasítási sebességéket adjuk meg a különböző savakra, ill. savélegyekre 65 vonatkozóan. 3
