158336. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (-) (cisz-1,2-epoxipropil)-foszfonsav előállítására mikrobiológiai úton
53 158336 54 Gátlási zóna átVizsgálati mikromérője organizmus Adalék mm (korong 7 mm) Escherichia coli MB—60 Escherichia coli MB—60 Escherichia coli MB—60 0,1 m foszfátpuffer, 5 pH 9 0,1 m foszfátpuffer, 7 pH 7 0,1 m foszfátpuffer, 9 pH 7 Whatman féle 3 mm-es szűrőpapírcsítkokkal kroimatogirafáitunk. A csíkokat 7,0 pH értékű, 0,033 m foszfáttpuffenrel való telítés után megszárítottuk 'és 7,0 pH értékű, 0,0:33 m foszfátpuifferrel telített n-foütanolal előhívtuk. E vizsgálatiból kitűnt, hogy az antibiotikum vízben oldható vegyület, amelynek Rf értéke = 0. Hűtött készülékben 600 volt feszültségen 2,5 óra hosszat 7,0 pH értékű 0,165 m foszfátpufferben végzett papírcsík-elektroforézis a kezdővonaltól 11,5 cm távolságra egy rendkívül mozgékony savas foltot mutatott ki. Az aktivitás jelenlétét mind a papírcsík-kromatográfia, mind pedig a papírcsík-elektroforézis esetében Escherichia coli MB—60-nal beoltott ágarlemezeken végzett bioautográfiával mutattuk ki. Végeredményben kitűnt, hogy a (—) (cisz-1,2-5 -epoxipropil)^foszfonsav vízben oldható, elektroforetikusan mozgékony savas vegyület, amely. nek újszerű a baktériumellenes spektruma és keresztrezisztenciás viselkedése. Az antibiotikum in vivo hatékonyságának 10 megállapítása céljából intraperitoneális úton fertőzött egereket a fertőzéssel egyidejűleg, valamint hat órával később kezeltünk az antibiotikum fent leírt módon készített nátriumsóját tartalmazó szilárd anyag különböző adag.15 jaival. A gyógykezelés vagy intraperitoneális vagy orális úton történt. A vizsgálati időszak leteltével — rendszerint hét nappal a fertőzés után — kiszámítottuk az antibiotikumnak azt a mennyiségét, amely szükséges volt ahhoz, hogy 20 az egerek 50%-át (EDB0 ) megvédje ettől az egyébként halálos fertőzéstől. Azonos időbeosztással nem-fertőzött egerek is kezelésben részesültek, hogy megállapíthassuk, nem mérgező-e az antibiotikum a kísérleti állatokra. 25 Egerek orális, illetőleg intraperitoneális gyógykezelési arányadatai, nátrium (—) (cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonáttal három különböző fertőző mikroorganizmussal szemben: Fertőző mikroorganizmus ED50 mg/egér/adag* orális: i. p. arány Nátriumsó Tetraciklin Nátrium- Tetrap. or. i. p. or. só ciklin Salmonella schottmuelleri 3010 Salmonella schottmuelleri ,1814 Staphylococcus aureus 2949 0,009 0,041 0,024 0,756 5 31 0,026 0,190 0,026 0,581 8 22 0,312 1,18 0,006 0,187 4 31 *A gyógykezelés a megjelölt módon történt, a fertőzés időpontjában, valamint 6 órával a fertőzés után. Minden adat csupán egyetlen vizsgálatra vonatkozik. A következő vizsgálati eredmények ugyanannak a (—) cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonsavnak az intraperitoneális végpontjait mutatják, a tetraciklinnel összehasonlítva. A (—) (cisz-l,2-epoxipropil)-fo,szfonsav nátriumsójának és a tetraciklinnek intraperitoneális végpontjai egereken végzett vizsgálatokban (minden adat csak egy próbára vonatkozik). i.p. ED60 mg/adag Fertőző mikroorganizmus Salmonella schottmuelleri 3010 Salmonella schottmuelleri 1814 Salmonella gallinarum 3069 2 adagos próba Nátriumsó Tetraciklin 0,010 0,020 0,017 0,007 0,009 0,024 0,017 0,013 0,027 0,026 0,377 0,055 45 50 55 60 65 Fertőző mikroorganizmus i.p. ED50 mg/adag 2 adagos próba Nátriumsó Tetraciklin Salmonella pullorum 3198 0,625 0,108 Salmonella typhimurium 2637 3,57 0,200 Escherichia coli MB—1939 J,294 0,059 Escherichia coli MN^2017 0,331 0,008 Klebsiella pneumoniae 3068 4,27 0,il00 Klebsiella pneumoniae B 4,27 0,016 Proteus mirabilis 3201 0,156 0,068 Proteus morganii 3202 0,937 0,031 Proteus vulgaris 1810 3,57 0,!188 Pseudomonas aeruginosa 2616 5,0 0,201 Pseudomonas aeruginosa 3210 5,0 0,267 Diplococcus pneumoniae I 37 5,0 (p)* 0,103 Staphylococcus aureus 2949 0,312 0,006 Streptococcus pyogenes 3009 4,27 0,011 Staphylococcus aureus 2957** 0,302 0,002 27
