158175. lajstromszámú szabadalom • Eljárás daunorubicin atibiotikum előállítására

9 158175 A szűredéket felöntjük egy 6 liter savas fázisban levő Amberlite IRC—50 ioncserélőt tartalmazó oszlopra oly módon, hogy az az ioncserélő rétégen óránként 15 liter mennyiségben haladjon át. Ezután* az oszlopot felülről lefelé 30 liter ugyanolyan sebességgel mozgó vízzel, aniajd 30 liter .1 : .1 arányú metanol-víz eleggyel alulról felfelé óránként 15 liter sebességgel, majd 10% vizét tartalmazó 50 liter metanollal ugyanolyan sebességgel alulról feinfiele mossuk. Az átfolyt folyadékot és a mosófolyadékokait kiontjuk, és az oszlopot az ioncserélőn felülről lefelé áramló következő összetételű oldattal 15 eluáljuk: 10 nátriumklorid 10 g víz 100 ml metanollal kiegészítve 100 ml-re. Az eluátumot. narancsvörös színeződés megjelenéséitől ennek a színnek az eltűnéséig össze^gyűjtjük. így 50 liter folyadékot kapunk, amely az antibiotikum zömét tartalmazza. Az eluátumot 35 C°-on 2 torr nyoimiáson 10 literre koncentráljuk. A fconcentrátumot 8,5 pH-nál 3 ízben ;5—5 liter kloroformmal extraháljuk. A kloroformos kivonatot 30 C°-on 5 torr nyomáson 50 ml-re koncentráljuk, Az antibiotikumolt 500 ml hexánnal bázis diákban kiválasztjuk, centrifugáljuk, mossuk és megszárítjuk. Végül 4,9 g nyers bázist kapunk 64% daunorubiöin és 20% daunorufoidn-aglulkon tartalomimal, amely azonkívül szervetlen anyagokat és nehezen meghatározható • szerves anyagokait tartalmaz. 20 25 30 35 3. példa: A; 2. példában leírt módon kapott, 64% daunorufoíicint tartalmazó 6,8 g terméket 40 ml vízben Bzuszpendálunk, és 7 ml n sósav hozzáadásával lassan feloldjuk. Az oldatot szűréssel derítjük, és a deunorubitin-todrokloridöt 1 liter aceton lassú hozzáadásávall kikristályosítjuk, Az így kapott kristályokat szűrőn elkülönítjük, 50 trnl aoetonnal mossuk, és 5 torr nyomáson 50 C°-on 15 óra hosszat száritjuk. 3,3 g 00% daunorubicint tartalmazó kristályos hidrokloridot kapunk 68% hozammal. 4. példa: A 3. példa szerint kapott 3 g termákat 10 ml metanolban oldunk, majd lassan hozzáadunk 100 ml kloroformot, mire a daunorubicin-hidroklorid kikristályosodik. Az: így kapott kristá^ lyokat szűrőre visszük, 20 ml kloroformmal mossuk, és 5 torr • nyomáson 50 C°-on 15 óra hosszat szárítjuk. 1,8 g 90% daunorubicint tartalmazó átíkristályosított hidrokJbridot kapunk. A kristályosítás anyalúgjához 2Ó0 ml hexánt adva újabb daunorubicint választhatunk ki. Szűrés, 50 ml hexánnal való mosás és 5 torr 40 45 50 55 60 05 Táptalaj . Fejlettség * •-Hiokey-Tresner-agair jó <A) Benebfc-iagar (B) elég jó EmersonJagar (C) elég jó Pridham-féle jó élesztőkivoriat^agár (D) Vegetatív micéliuni vagy a tenyészet fonákja v. m. világos barnássárga, jól fejlett v. m. sárgástól világos sárgásbarnáig v. m. sárgástól világos sárgásbarnáig v. in. világos narancsbarna Légmioélium és spórázószervek világosszürke, igen mérsékelten fejlett nincs nincs világos kékesszürke, 'mérsékelten fejlett Oldható pigment kissé rózsaszínes barna nincs gyengén rózsaszínes barna világos vöröses narancsbaroa Miegjegyzések és biokémiai tulajdonságok 0,4—0,6/1,0—1,2/* méretű hengeres spórák Egyenes vagy kissé kacskaringós sporofórák. Gyakoriak a kettéágazó sporofórák