158163. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dezocisztreptamin származékok és savas addiciós sóik előállítására
158163 21 22 Például Dowex 1X2 gyantát (50—-100 mesh méretű) használhatunk. A gyantát átalakítjuk hidroxid-formába oly módon, hogy 16 liter 2 mólos nátriumhidroxid-oldatot vezetünk rajta keresztül. Ezután (körülbelül 9,5 liter vízzel) mossuk, míg az eltávozó folyadék pH-ja 9,2 lesz, ezután 17,5 liter 5%-os bórsavoldattal kezeljük, végül vízzel addig mossuk, amíg az eltávozó folyadék pH-ja körülbelül 5,5 lesz. 6,01 g ambutirozin A-ból és ambutirozin B-ből álló ambutirozin mintát feloldunk 15 ml vízben és az oszlopra felöntjük. Az oszlopot 6,42 liter vízzel eluáljuk körülbelül 7 ml/perc sebességgel és frakciókat különítünk el. A terméket tartalmazó frakciókat azonosítjuk és egyesítjük. Így pl. a szokásos elválasztási eljárásnál a terméket a 2,25 liter víz utáni eluátumban találjuk egészen addig, amíg az oszlopot összesen 4,95 liter vízzel eluáltuk. A vízzel való eluálással ily módon kapott termék ambutirozin B-től mentes ambutirozin A-t tartalmaz. Az oszlopot ezután sorrendben 4 liter 1%-os bórsavval, 2 liter 2! %-os bórsavval és végül 5%os bórsav-oldattal eluáljuk. Az eluátumot frakciók formájában gyűjtjük össze és a terméket tartalmazó frakciókat azonosítjuk, majd egyesítjük. A szokásos elválasztási eljárásnál a terméket főleg azokban a frakciókban találjuk, amelyek megfelelnék 2,64—4,00 liter folyadéktérfogatnak az 5%-os bórsav alkalmazása után. Ez a termék ambutirozin B-ből áll, amely ambutirozin A-tól lényegében véve mentes. Az ambutirozin A-t tovább tisztíthatjuk az alábbi módon. Az előbb említett gyantaoszlopról származó azon frakciókat, amelyek megfelelnek 3,0—3,6 liter eltávozott folyadéknak (eluálószerként vizet használva) átvezetjük egy oszlopon, amely 11 ml ammónium formában levő karboxil-gyantát tartalmaz. Ez körülbelül 20 órát vesz igénybe és gyantaként például Amberlite IRC—50-et használunk. Ezt az oszlopot vízzel, majd 40 ml 0,1 mólos ámmóniumhidroxid-oldattal mossuk a szennyező anyagok eltávolítása céljából. Az ambutirozin A-t ezután kétszer 80 mles részletekben 1 mólos ammóniumhidroxid-oldattal eluáljuk. Az első részletet vákuumban bepároljuk és liofilizáljuk és így 584 mg ambutirozin A-t kapunk, amely nyomokban bórt tartalmaz. A bór eltávolítása céljából ezt a terméket 5 ml vízben oldjuk és az oldatot átvezetjük 4 ml borra nézve specifikus anioncserélő gyantán. Gyantaként például Amberlite XE 243-at használhatunk szabad bázisos formában. Az oszlopot további 8 ml vízzel eluáljuk és az eltávozó folyadékot liofilizálva ambutirozin A szabad bázist kapunk, amely bórsavat már nem tartalmaz. A bórmentes ambutirozin A 8 ml vízzel készült oldatát átvezetjük 6 ml hidroxid-formában levő erős anioncserélő-gyantán. Például Dowex 1 X 16 gyantát használhatunk. Az oszlopot további 15 ml vízzel eluáljuk és az elfolyó oldatot liofilizálva tisztított ambutirozin A-t kapunk szabad bázis formájában, melynek a következő tulajdonságai vannak: Fajlagos forgatóképessége, [a]^25 (1,46%, vízben) különböző hullámhoszszaknál az alábbi:. +26,0° 589 millimikronnál, + 27,2° 578 millimikronnál, +30,4° 546 millimikronnál, +49,5° 436 millimikronnál, és +74,4° 365 millimikronnál. Vákuumban 24 órán át 100 C°-on végzett szárítás utáni mikroanalízis-eredmények: 44,94% szén, 7,05% hidrogén és 12,23% nitrogén. A termék káliumbromidban infravörös abszorbciós maximumokat mutat 700, 1028, 1090, 1340, 1390, 1457, 1498, 1550—1610, 1652, 2938, 3040 és 3410 reciprok centiméternél. 5. példa Egy másik példa az ambutirozinnak ambutirozin A és ambutirozin B komponensekre történő szétválasztására az alábbiakban következik. Borát formában levő erős anioncserélő gyantát készítünk a következő módon: 3,4 liter klorid formában levő erős anioncserélő gyantát betoltunk egy 5,4 cm átmérőjű oszlopba. Például Dowex 1X1 (50—100 mesh méretű) gyantát használhatunk. Ezt a gyantát 2 mólos nátriumhidroxid-oldattal átalakítjuk hidroxid formába, ezután vízzel addig mossuk, amíg az elfolyó folyadék pH-ja 10,5 lesz, majd 12 liter 5%-os bórsavval kezeljük és végül vízzel addig mossuk, amíg az elfolyó folyadék pH-ja 6,9 lesz. 4,03 g ambutirozin 7,5 ml vízzel készült oldatát felöntjük - az oszlopra. Az oszlopot 14 ml/perc sebességgel 11 liter vízzel eluáljuk és az eluátumot frakciók formájában gyűjtjük össze. Azok a frakciók, amelyek 3,96 liter lefolyási térfogatnál kezdődnek és 6,97 liter elfolyási térfogatnál végződnek, tartalmazzák a terméket. A termék ambutirozin A, amely ambutirozin B-től lényegében véve mentes. Ezeket a frakciókat egyesítjük és az ambutirozin A-t ammónium formában levő karboxil-gyantán végzett adszorbcióval és ezt követően a már leírt módon 1 mólos ammóniumhidroxid-oldattal történő eluálással elkülönítjük. A borát formában levő erős anioncserélő gyantát tartalmazó oszlopot ezután 7,1 liter 2,5 %-os bórsavval, végül 5 liter 5%)-os bórsavval eluáljuk. A terméket az oszlopról 5%-os bórsavval végzett eluálással tudjuk eltávolítani. A legtöbb terméket azokban a frakciókban találjuk, amelyek 0,5—3,2 liter elfolyási térfogatnak felelnek meg az 5%-os bórsavból. A termék ambutirozin B, amely ambutirozin A-tól lényegében véve mentes. További tisztítás céljából az ambutirozin B 5%-os bórsavas oldatát nagyon lassan átvezetjük egy 0,6 cm átmérőjű oszlopon, amely 5 ml ammónium formában levő karboxil-gyantát tartalmaz. Az oszlopot vízzel mossuk, majd 90 ml 1 mólos ammóniumhidroxid-oldattal eluáljuk. Az ammóniumhidroxidos eluátumot vákuumban bepároljuk és liofilizáljuk. Így 624 mg ambutirozin B-t kapunk szabad bázis formájában, amely szennyezésként kis mennyiségű bórsavat tartal-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 11
