157908. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polimixin B fermentálására

MAGTAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1968. XI. 26, (GO—10,72) Közzététel napja: 1970. IV. 08. Megjelent: 1971. IV. 01. 157908 Nemzetközi osztályozás: C 12 « 9/20 ^ESH»ÍÍ^N ^-^l'Jhlúnl Feltalálók: Dr. Bérdy János oki. vegyész, 12%, Dr. Horváth István oki. vegyész, 12%, Dr. H-Kiss Géza oki. vegyész, 12%, Dr. Magyar Károly oki. vegyész, 12%, Dóczi Bálint vegyészmérnök, 10%, Alföldi László vegyészmérnök, 6%, Bittera Vilmos vegyésztechnikus 6%, Dr. Boromissza Eva orvos 6%, Dr. Gyimesi József oki, vegyész, 6%, Scholtz Vilma asszisztens, 6%, Dr. Szarka László gyógyszerész, 6%, Tölgyesi László vegyésztechnikus, 6%, Budapest ___ Tulajdonos: Gyógyszerkutató Intézet, Budapest Eljárás polimixin B fermentálására A találmány tárgya eljárás magas egységszámú polimixin B-t tartalmazó f er mentievek előállítására Bacillus polymyxa tenyésztésével. Az antibiotikumnak klinikai felhasználása során egyre inkább fordul a figyelem a gramnegatív kórokozók leküzdésének jelentőségére. Ezen indikációval bíró antibiotikumok között kiemelkedő helyet foglalnak el a polimixinelc, amelyeknek gazdaságos előállítása egyre nagyobb fontossággal bír. A polimixin B fermentációjára vonatkozóan néhány szabadalmi leírás ad részleteket, ezek példái azonban vagy nem adnak meg számszerű adatokat, vagy meglepően alacsony fermentációs eredményeket ismertetnek.. így a 619 572 sz. angol, valamint a 2 599 950 és 2 771 397 sz. amerikai szabadalmak írnak le polimixin B termelésére különösen alkalmas törzsszelekciós és fermentációs kutatási eredményeket. Legjobb eredményt a 2 571104 sz. amerikai szabadalom ismertet, amennyiben 116 órás kísérletben 4 párhuzamos rázott lombik eredményének átlaga 900 I. E/ml. Ez a szaibadálom eljárást ad meg a Bacillus polymixa B—719 ultraibolyával besugárzott variánsnak 1—2% cukortartalmú táptalajon való fermentálására, ahol a fermentáció során sovábbi cukrot adagolnak. Bacillus polymyxa-val végzett fermentációs kísérleteink során meglepő módon azt találtuk, hogy a mikroorganizmus bioszintetizáló képessége 3—4 szeresre fokozható külön az inokulum 5 és a főfermentáció optimális energiaforrásának megkeresésével, és annak a fermentáció lefutásától függő adagolásával. A találmány eljárás polimixin B előállítására 1° fermentációs úton Bacillus polymyxa felhasználásával, mely abban áll, hogy glükózos inokulumot energiaforrásmentes, az antibiotikum iparban általában használt nitrogénforrásokat (szójaliszt, kukoricálekvár) tartalmazó táptalajig ra oltunk, és energiaforrásként szacharózt adagolunk a lag-fázis eltelte után úgy programozva, hogy az aktuális cukorkoneentráció 1% alatt legyen az utolsó szacharóz adag hozzáadásáig. Energiaforrásként előnyösen csak szacharózt al-20 kalmazunk 3—5% mennyiségben. A szacharózadagolást oly módon célszerű végezni, hogy a tenyésztés folyamán 1 súly% érték alatt legyen, csupán az utolsó adag lassabb elfogyasztása következtében emelkedik kissé magasabbra. Az 25 első 5—8 adag cukor hatására a CC>2-fejlődés megnő, amivel egyidejűleg a levegőztetés mértékét emeljük, majd 8—10 adagoknál már lecsökken. A 10. cukor-adagolás után a fermentációt még 8—20 óráig folytatjuk a tenyészet 30 aktivitásának változásától függően. 157908