157738. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a glükózoxidáz fermentációs úton történő előállítására és tisztítására, továbbá kataláz előállítására

157738 10 10%-ával beoltunk és állandó intenzív keverés és levegőztetés mellett 27—30 C°, előnyösen 28 C° hőmérsékleten, 1—2.atm. nyomáson, 16— 24 órán át fermentáljuk, ezt követően a tenyészetet szűrjük vagy centrifugáljuk, az így kapott micéliumtömeget mossuk, vízzel 1:1,5—1:7 arányban hígítva gyöngymalomban feltárjuk, a feltárt szuszpenziót szűrjük s a szűrletből az enzimet izopropilalkohollal kicsapjuk és szárítjuk vagy a szűrletet liofüizáljuk, az így kapott termékből vizes oldatot készítünk, azt dietilaminoetil-cellulóz oszlopon adszorbeáljuk, 4,5 pH-értékű 0,07 mólos acetát-pufferral eluálva a katalázt és az amilázt elkülönítjük, majd a glükózoxidázt 3,7 pH-értékű 0,1 mólos acetát-pufferral eluáljuk, s az így kapott tiszta glükózoxidáz oldatot vákuumban 20—32 C° hőmérsékleten térfogatának 1/10 részére bepároljuk, a kataláz- és 10 15 amiláztartalmú eluátumot pedig Sephadex G— 150 vagy G—200 oszlopra felvisszük és a katalázt és amilázt 5,1 pH-értékű 0,05 mólos acetátpufferral frakcionáltan eluáljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a fermentáláshoz 5—15% melaszt, 1—3% kukoricalekvárt, 0,5—1,0% szuperfoszfátot, 0,3—1,0% ammóniumnitrátot és adott esetben egyéb ásványi sókat tartalmazó természetes táptalajt használunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a fermentáláshoz 2,5—7,5% szacharózt, 1—3% kukoricalekvárt, 0,2—1,0% kalciumnitrátot, 0,010— 0,030% káliumdihidrogénfoszfátot, 0,010— 0,030% magnéziumszulfátot és 0,02—0,08% citromsavat tartalmazó félszintétikus táptalajt használunk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 7008273. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23.