157648. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kallikrein-inaktivátor dúsítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1967. V. 26. (FA—703) Német Szövetségi Köztársaság-beli elsőbbsége: 1966. V. 26. (F 49 298 IV. a/6 a) Közzététel napja: 1970. II. 06. Megjelent: 1970. XII. 31. 157648 Nemzetközi osztályozás: C 07 g 7/00; 7/02 Feltalálók: Dr. Wérle Eugen egyetemi tanár, Dr. Fritz Hans tudományos munkatárs, München, Német Szövetségi Köztársaság Tulajdonos: Farbenfabriken Bayer AG., Leverkusen, Német Szövetségi Köztársaság Eljárás kallikrein-inaktivátor dúsítására Ismeretessé vált az, hogy enzimeket vagy feliéijeszerű vegyületeket polimer anyagokkal lehet összekaesolni. Így pl. E. Katzhalski et al. [Biochem. 3 .(1964) 1906. oldal] megjelent közleménye szerint tripszint valamely maleinsavanhidrid-etilénkopolimerrel kapcsoltak össze. Az így képzett adduktban levő enzimek biológiai hatékonyságiikat többé-kevésbé megtartják. Ismeretessé vált továbbá az is, hogy a polimerekkel összekapcsolt enzimek hatékonyságát inhibitorokkal gátolni lehet. (Lásd: idézett Katzhalski et al. közlemény.) A fentiekkel szemben a szakirodalom állása szerint nem ismeretes az, hogy az utóbbi esetben a nyers inhilbitoroldatból az inhibitort szelektív módon a polimerrel összekapcsolt enzimmel lehet megkötni és emellett az így kapott komplex izolálható is. Azt találtuk, hogy a kallikrein-jnaktivátort, amely a tripszin, foimotripszin és plazmin enzimeket is gátolja és a Kunitz-inhibitarral azonos (v. ö. F. A. Anderer, Z. Naturfforsch. 20 b, 462 oldal, 1985 és 20 to, 499 o., 1965) azáltal lehet dúsítani, hogy valamely, a kallikrein-inaktivátor által gátolt' enzimet kovalens kötéssel valamely oldhatatlan vagy oldható hordozóanyaggal összekapcsolunk, az így kapott addu'ktot vizes közegben a kallikrein-inaktivátor valamely oldatával érintkezésibe hozzuk, majd a kapott komplexet kimosással tisztítjuk, dissaociáUható állapotba hozzuk, végül pedig a kallikrein-inaktivátort. izoláljuk. 5 Hasonló módon lehet a tripszin-iníhibitorökat ondóholyaglhól és ga)bonaimagvakból (búza, árpa, kukorica) feldúsítani. A találmány szerint alkalmazandó oldhatat-10 lan vagy oldható hordozoany.agokn.ak elsősorban polimer anyagok tekinthetők. Ezek a polimer anyagok olyan funkciós csoportokat tartalmaznak, amelynek .folytán a peptidkémia módszereivel az említett enzimekkel reakcióba 15 hozhatók. A .polimer anyagok közül főként azokat a műgyantákat emeljük ki, amelyek anhidriid-, savklorid-, izacianát- és azid-csoporto<kat tartalmaznak, továbbá azokat a műgyantákat is, amelyekben aktivált fluoratom [Mafcro-20 molekular Chemie 39, (1960), 1,3. oldal, Ann. Rev. Biochem. 35 (1966) 873. oldal] található. Ennek megfelelően a kereskedelmi forgalomlban beszerezhető karboxil^csoportoikat tartalmazó ioncserélő gyanták is a találmány szerinti oél-25 ra alkalmassá tehetők, ha azokba aktivált csoportokat viszünk be. A kalliferein-inaktivátorral gátolt enzimek közül pl. a tripszint, kimotripszint (Chymo-30 tripsin) és kallifcreint említjük. 157648
