157617. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aminosav-arilamidáz kvantitatív kolorimetriás meghatározására

157617 6 A háromféle módszer előnyei egyenként a következők: Az alaninhidrazid szubsztrát könnyen szintetizálható. Ez a módszer az általunk javasolt leucinaminopeptidáz meghatározással analóg, ugyanazok a reagensek ugyanabban a koncentrációban szükségesek és így egyúttal a leucinaminopeptidáz (LAP) meghatározására is használható. A módszer hibája 2,7%. Az alanin-p-nitrqanilid közvetlenül mérhető hasítási terméket szolgáltat. A módszer hibája 4,8%. A alanin-/?-naftilamid szubsztrátot az aminosav-arilamidáz a többinél gyorsabban hasítja. Ennek a módszernek a hibája 2%. Igen előnyös mikroliter-módszer. Irodalomjegyzék 1. Rehfeld—Peters: Acta biol. med. germán. 19 809—818 (1967) 2. Rehfeld—Peters: Acta biol. med. germán. 19 819—830 (1967) 3. Peters—Rehfeld: Clin. Ohim. Acta, 19 277— 286 (1968) 4. Peters—Rehfeld—Haschen: Clin. Chim. Acta, 17 516 (1967) ' . . 5. Pf leiderer—Celläers: Biochem. Z. 339 186 (1963) 6. Hanson—Hütter: Z. physiol. Chem. 348 680—688 (1967) 7. Hanson—Gläser: Z. physiol. Chem. 348 689—704 (1967) 8. Farr—Rehfeld: Z. med. Labortechnik 9 78—86 (1968) 9. Tuppy—Wiesbauer—Wintersberger: Z. physiol. Chem. 329 278—288 (1962) 10 15 20 25 30 35 10. Braun—Falco—Saalfeld: Arch. Klin. exp. Dermat. 204 407—415 (1957) 11. Green—Chung—Tsou: Arch. Biochem. Biophys. 57 458—474 (1955) 12. Rässler—Schön: Clin. Chim. Acta 6 583— 584 (1961) 13. Takenaka: Bull. Yamaguchi Med. Shool 11 57—61 (1964) 14. Barth, A„—H,off mann—Pilch:. Acta biol. med. germán. 16 575—585 (1966) Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás aminosavarilamidáz kvantitatív, kolorimetriás meghatározására azzal jellemezve, hogy szubsztrátként DL-alaninhidrazidot, DL-alanin-/?-naftilamidot vagy L-alanin-p-nitroanilidet használunk, a lehasított szubsztituenst p-dialkilaminobenzaldehiddel mint színképző reagenssel színezékké alakítjuk és ezt a színezéket vagy közvetlenül a lehasított szubsztituenst kolorimetriásan mérjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a szubsztituált alaninszármazék ammosav-arilamidázzal végzett hidrolízisét 6,5—7,5 pH-éntéken hajtjuk végre. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a lehasított szubsztituens színezékké való alakítását sósavas közegben, etanolban vagy metanolban oldott pdimetilaminobenzaldehiddel történő kondenzálásával végezzük. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a képződött színezéket 7 alatti pH-tartományban kolorimetriásan mérjük. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 7008100. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. 3