157501. lajstromszámú szabadalom • Eljárás citotetrinek előállítására

157501 23 24 8. példa A 7. példában leírt módon készített spóraszuszpenziót azonos térfogat 0,04 mól nátriumhidrogénkarbonátot tartalmazó 0,01 mólos nit- 5 rogénmustár oldattal elegyítjük, majd az elegyet 60 percig tartó 28 C°-on végzett kezelés után azonos térfogatú 0,1 mólos hexametiléntetramin oldattal elegyítjük. 30 perc eltelte után a kapott spóraszuszpenziót burgonyafőzet-glükóz- 10 agárra szélesztjük. 4 napos, 28 C°-os inkubáció után a 99%-os pusztulást mutató lemezekről burgonyái őzet-glükóz-agarra 100 ferde tenyészetet oltunk, majd bespórázás után ezekről az 1. példában megadott módon rázott kultúrákat ké- 15 szítunk. Tenyésztés után a legjobb termelőképességű kultúrákat kiválasztva kapjuk a 114, 152, 168, 188 és 195 jelzésű variánsokat, melyek citotetrin-termelő képessége sorrendben: 1700, 2650, 2750, 1950 és 2400 /tg/ml. 20 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás citotetrinek előállítására, azzal jel- 25 lemezve, hogy a Streptomyces griseoflavus „CBS—Cifferi" sugárgomba törzset (az Országos Közegészségügyi Intézetnél 1968. március 20-án 44/1968 szám alatt letétbe helyezve) vagy ennek variánsait, illetve mutánsait komplex fehérjét, jo szénhidrátot és ásványi sókat tartalmazó táptalajon aerob körülmények között tenyésztjük, majd a tenyészetből a felhalmozódott citotetrineket kivonjuk, és adott esetben a kapott citotetrin komplexet összetevőire választjuk szét. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a sugárgomba törzset szójalisztet, mogyorólisztet, fehérbablisztet, zablisztet, hallisztet, 'kukoricalekvárt, peptont, kazein hidrolizátumot, élesztőkivonátot, húskivonatot és/vagy glükózt, szacharózt, laktózt, keményítőt, glicerint, és/vagy kálium- vagy nátriumnitrátot, ammóniumnitrátot, nátriumkloridot, ammóniumszulfátot, és különféle szervetlen foszfátokat, célszerűen szójalisztet, glükózt, kukoricalekvárt, kazein hidrolizátumot, káliumnitrátot és nátriumkloridot tartalmazó komplex táptalajon 0,5/1—2,0/1 V/V, célszerűen 1/1 V/V sebességű levegőztetés közben, 25—35 C°-on, célszerűen 28 C°-on tenyésztjük. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a sugárgomba tenyésztése után az erjesztéses oldatból a citotétrineket extrakciós, ioncserélős vagy adszorpciós úton, célszerűen pH=5—10 között, legelőnyösebben pH—8,0 körüli értéken vízzel nem elegyedő, poláris szerves oldószerrel végzett extrakcióval elkülönítjük, majd az antibiotikum komplexet kromatográfiás vagy megosztásos módszerekkel összetevőire bontjuk szét, és a kapott egységes anyagokat szilárd állapotban elkülönítjük. 8 trajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 7008063. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. 12