157077. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ACTH-hatású peptidek előállítására

5 157077 6 .tanollal, benzilalkohollal, p-nitrobenzilalkohollal vagy amid-képzéssel, az. aminocsoportot pl. a tozil-, tritil-, formil-, trifluoracetil-, o-nitrofenilszulfenil-, ftalil- vagy karbobenzoxicsoport vagy színes védőcsoportok, így p-feniíazo-benziloxikarbonilcsoport és a p-(p'-metoxi-fenilazo)-benziloxikarbonilcsoport vagy különösen a terc. butiloxikarbonilgyök bevitelével. Az arginin guanido-csoportjában levő aminocsoport védelmére a nitrocsoport alkalmas, az arginin említett aminocsoport ját azonban a reakció folyamán nem szükséges védeni. A hisztidin iminocsoportját a benzil- vagy tritilgyökkel védhetjük. Egy védett amino- vagy iminocsoport szabad csoporttá, valamint egy funkcionálisan átalakított karboxilcsoport szabad karboxilcsoporttá való átalakítását az eljárás folyamán önmagában ismert módon valósíthatjuk meg hidrolizáló-, ill. redukálószerek segítségével. A találmány szerinti eljárás egyik előnyös foganatosítási módja abban áll, hogy az első 3 aminosavat, pl. H-D-Ser-Tyr-Ser-OH-t tartalmazó tripeptidet (a rövidített írásmód L-aminsavakat jelöl, ha a D nincs-külön megjelölve) vagy az ezenkívül a 4. aminosavat is tartalmazó "tetrapeptidet a következő aminosavak hepta-, ill. hexapeptidjével 10 aminosavvá kondenzáljuk, előnyösen az azid-módszer szerint, majd a dekapepti'det a 11—24 aminosavak tetradekapeptidjével kondenzáljuk. A kondenzáció folyamán kapcsolódó-módszerként előnyösen a karbodiimid-imódszert vagy az aktivált észterek módszerét, mindenek előtt a p-nitrofenilésztert alkalmazó eljárást alkalmazzuk. Az utóbbi esetbena dekapeptid p-nitrofenilészterét nem kell elkülöníteni, hanem a kondenzációs lépésben is kialakíthatjuk a szabad karboxilcsoporttal rendelkező dekapeptidből, p-nitrofenolból és diciklohexilkarbodiimidből. A dekapeptid tehát mint védett a-aminocsoporttal és szabad karboxilcsoporttal vagy p-nitrofenilésztercsoporttal rendelkező peptid van jelen. A tetradekapeptidet észter, előnyösen terc. butilészter vagy coamid alakjában alkalmazzuk. Ä kondenzálódó peptid-egységekben jelenlevő oldallánci aminocsoportokat célszerűen terc. butiloxiíkarbonilcsoporttal, az oldalláncban levő karboxilcsoportokat terc. butilésztercsoporttal védjük meg. A védőcsoportokat az utolsó lépésben trifluorecetsavval hasíthatjuk le. A találmány szerinti eljárás egy előnyös foganatosítási módja szerint az első 4 aminosavat tartalmazó tetrapeptidet, a H-D-Ser-Tyr-Ser-Nle-OH-t az 5—24 aminosavak eikozapeptidjével kondenzáljuk. A kondenzáció folyamán kapcsolódó módszerként előnyösen az azid-módszert alkalmazzuk. A tetrakozapeptidhidrazid, ill.- azid a-aminocsoportját előnyösen a terc. butiloxikarbonilcsoporttal védjük. Az eikozapeptid, mint szabad peptid vagy mint észter, különösen terc. butilészter vagy mint Pro24--amid fordulhat elő. Az eikozapeptidben is az oldalláncban levő aminocsoportokat előnyösen terc.-butiloxikarbonilcsoporttal, az oldalláncban levő karboxilcsoportot pedig terc.-butilésztercsoporttal védjük meg. Miután a peptid-egységek kondenzációjával megkapjuk a tetrakozapeptidet, amelynek aaminocsoportja és oldallánci aminocsoport jai ter'c.-butiloxikarbonilcsoporttal és terminális és oldalláncban levő karboxilcsoport ja terc.-butilésztercsoporttal van védve, az összes ilyen védőcsoportot egyidejűleg lehasítjuk savas hidrolízissel, pl. trifluorecetsavval. Ha a terminális karboxilcsoport nem mint terc.-butilészter-, hanem mint amidcsoport fordul elő, peptidamidokat kapunk. A találmány tárgyát képezik az eljárás olyan kiviteli formái is, amikor az eljárás bármelyik lépésében közbenső termékként kapható vegyületből indulunk ki, és a hiányzó eljáráslépéseket valósítjuk meg, vagy az eljárást bármelyik lépésnél megszakítjuk. A munkamódszer szerint az új vegyületeket bázisuk vagy sóik alakjában kapjuk. A sókból önmagában ismert módon nyerhetjük a bázisokat. Az utóbbiakból újra sókat nyerhetünk, ha gyógyászatilag alkalmazható sók képzésére alkalmas savakkal reagáltatjuk ezeket, így pl. szervetlen savakkal, így halogénhidrogénsavakkal, pl. sósavval vagy brómhídrogénsavval, perklórsavval, salétromsavval vagy tiociánsavval, kén- vagy foszforsavakkal, vagy pedig szerves savakkal, így hangyasavval, ecetsavval, propionsavval, glikolsavval, tejsavval, piroszőlősavval, oxálsavval, malonsavval, borostyánkősavval, maleinsawal, fumársavval, almasavval, borkősavval, citromsavval, aszkorbinsavvál, hidroximaleinsavval, dihidroximaleinsavval, benzoesavval, fenilecetsavval, 4-aminobenzoesavval, 4-hidroxibenzoesavval, antranilsavval, fahéj savval, mandulasavval, szalicilsavval, 4-aminoszalicilsavval, 2-fenoxibenzoesavval, 2--acetoxibenzoesavval, metánszulfonsavval, etánszulfonsavval, hidroxietánszulfonsavval, benzolszulfonsavval, p-foluolszulfonsavval, naftalinszülfonsavval vagy szulfanilsavval. A találmány szerinti eljárással kapott peptideket gyógyászati készítmények alakjában alkalmazhatjuk. Ezek a peptideket enterális vagy parenterális adagolásra alkalmas gyógyászati, szerves vagy szervetlen hordozóanyaggal összekeverve tartalmazzák. Hordozóként az olyan anyagok jönnek.számításba, amelyek nem reagálnak a polipeptidekkel, pl. a zselatin, tejcukor, glükóz, konyhasó, keményítő, magnéziumsztearát, talkum, növényi olajok, benzilalkoholok, gumi, polialkilénglikolok, vazeíin, koleszterin vagy egyéb ismert gyógyszer-hordozóanyagok. A gyógyászati készítmények lehetnek pl. liofilizátumok vagy folyékony alakúak, így oldatok, szuszpenziók vagy emulziók. Adott esetben sterilizáltak és (ül.) vagy segédanyagokat, 10 15 20 25 Í0 35 40 45 50 55 60 3