156121. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cefalosporin C elválasztására
156121 értéken tartjuk. Ezután a reakcióoldatot 1 liter nnbutilacetát — n-butanol (1 : 1) elegyével egyesítjük és a pH-t sósavval 2-re állítjuk be. Tíz perc múlva a fázisdkat elválasztjuk. A vizes fázist még kétszer 500—500 ml n-^butilaoe- 5 tát —• n-toutanol eleggyel utána extraháljuk. A szerves extralktumokat egyesítjük, a pH^t nátronlúggal 5,5-re állítjuk be, és 300, majd 200 és végül 100 ml vízzel extraháljuk. Az összes vizes oldatot 2 pH értéknél a fenti n^butil- 10 acetát — n-butanol eleggyel (100 ml, majd 2x50 ml) és a szerves kivonatokat mégegyszer 5,5 pH-nál vízzel (100 ml, majd 2x50 ml) extraháljuk. Az összesen 200 ml vizes oldatot 10 g „Hyflo-Supercel"-lel hozzuk össze, 0—4°- 15 ra hűtjük, és a pH-t 2 n sósavval 1,8—2-re állítjuk be. Így kiválik a 2,4,6-trinitrofenil-cefalosporin C. Ezt a szűrősegódanyaggal együtt leszívatjük, jéghideg, ionmentes vízzel mossuk, és 15 órán át 40°-on szárítjuk. A ki- 20 termelés 18,07 g 2,4,6-trinitrofenil-cafalosporin C 10 g ,,Hyflo-Supercel"-re. A szilikagéles vékanyretegikromatogram az 1. példa szerinti rendszerben a 0,51 Rfp értéken kívül még erősebben poláros és kevésbé poláros trinitrofenil 25 vegyületek foltjai is elkülöníthetők. A terméket a következőik szerint alakíthatjuk át dibenzilhidrilészterré: A csapadék elegyet 180 ml n-butilacetátban 30 szuszpendáljuk, és 36 g difenildiazotmetán 180 ml n^butanolos oldatával elegyítjük. A szuszpenziót 3 óra hosszat keverjük, a ,,Hyflo-Supercel"-t leszűrjük, és a tiszta szűrletet 20 percen át 1800 ml petroléterrel (fp. 50—70°) 35 állni hagyjuk. A világossárga csapadékot, amely nyers 2,4,6-trinitro-fenil-eefalosporin C-dibenzilhidrilészter, leszívatjük, petroléterrel mossuk és 40o -on, vákuumban szárítjuk. A kitermelés 24,7 g (66%) = a kiindulóanyag cefa- 40 losporin C-tartalmának 65,3%-a. 4. példa: 45 17,3 g pikrilkloridot 35 ml nnbutilacetátban oldunk, 9,8 g vízmentes nátriumszulfit 60 ml vizes oldatát adjuk hozzá, és 15 percig erőteljesen keverjük. A butilaoetátos fázis színtelen lesz és a vizes fázis, mely 22 g 2,4,6-tri- 50 nitrobenzolszulfonsavas nátriumot tartalmaz: erőteljesen vörös. A vörös oldatot 6 liter nyers eefalospoirín C (számítva 12 g,. elsőrendű aminocsoport-tartalom 1,3%) tartalmú vizes oldathoz adjuk, a pH-t nátronlúggal 9-re állítjuk 55 be és 2 órán át 8,5—8,7 pH értéknél keverjük. A feldolgozás a 3. példához hasonlóan történik. 21,8 g nyers 2.4,6-trinitro'fenil-cefalospoirin C-t kapunk 40 g „Hyflo-Superoel"-re. 60 43,6 g difemldlazoimetánnal a 3. példához hasonlóan történő észterezéssel 28,65 g 2,4,6-trinitrofenil-cefaloisporin C-dibenzil!hidrilésztert (55% tisztaság) kapunk, azaz az elméletinek 64,6%-át. 65 5. példa: 16,29 g pikírilkloridot, 34,2 ml butilacetátban oldunk, 9,15 g vízmentes nátriumszulfit 66,6 ml vizes oldatát adjuk hozzá, 15 percig erőteljesen keverjük. Az elegyet 3 liter Cefalosporin C tartalmú, az 1. példában leírt eljárás szerint; kapott kultúrtenyészet szűrletébe öntjük. A szűrleit literenként 1809 ml cefalosporin C-t és 205 mg nitrogént tartalmaz primer aminocsoport formában. Az elegy pH-ját nátronlúggal 9,0-re állítjuk be. A reakcióidő 2 óra, és ennek során a pH-iértéket 8,5 és 9 között tartjuk. A reakció befejezése után 60 g ,,Hyflo-Supereel"-t adunk hozzá és a pH értéket jégecettel 4,0-re „állítjuk be. Az ennek során keletkezett inaktív csapadékot a ,,Hyflo"-val együtt leszűrjük. Az átlátszó szűrletet három részletben Airuberlite LA—2 5%-os butilaicetátos oldatával extraháljuk. A három rész 600, 300 és 150 ,ml. Az' extrakeiós elegyek pH értékeit jégeoettel mindenkor 4,5-re állítjuk be. 15 perces keverés után a fázisokat egyéniként tisztítás céljából centrifugáljuk. Az inaktív vizes fázisdkat eldobjuk. Az egyesített szerves fázisokat 300 ml vízzel egyesítjük és az elegy pH értékét 5 n nátronlúggal intenzív keverés közben 8,5-re állítjuk be. A vizes fázist elválasztjuk és az extralkciót még kétszer 80—180 ml vízzel, megegyező módon megismételjük. Az egyesített vizes extraktumoikat petroléterrel mossuk, 0—4°-ra lehűtjük és a pH-t 5 n sósavval 2-re állítjuk. A keletkezett nyers 2,4,6-trinitrofenil-cefalosporin C csapadékot leszívatjuk, hideg vízzel mossuk és vákuumban szárítjuk. A kitermelés 10,7 g 30% 2,4.6-trinitrofenil-eefalosporin C tartalommal, ami' 45 %)-os kitermelésnek felel meg. A nyers 2,4,6-trinitrofenil-cefalosporin C-t 21,3 g difenildiazometán 107 ml kloroformos oldatával 2 1/2 órán át keverjük. A reakcióoldatot tisztára szűrjük és keverés közben 650 ml petroléterbe folyatjuk. A sárga csapadékot leszívatjük, petroléterrel átmossuk és szárítjuk. A kitermelés 12,3 g 34,1% 2,4,6-trinitrofenil-cefalosporin C tartalommal, ami 38%-os teljes kitermelésnek felel meg. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás cefalosporin C származéka formájában történő elválasztására, azzal jellemezve, hogy cefalosporin C-tartalmú vizes oldatban trinitroibenziolszulfons&wal 7—10 pH-nál, előnyösen 8,5—9,0 pH-nál történő reakcióval N-trinitrofenil-oefalosporin C-t állítunk elő, és azt az oldattól elválasztjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganat osítási módja, azzal jellemezve, hogy cefalosporin C-tartalmú tenyészetléből indulunk ki. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót szobahőmérsékleten hajtjuk végre. 4
