155996. lajstromszámú szabadalom • Eljárás proghrombin visszanyerésére prothrombin-tartalmú adszorbensekről

155996 sal különítjük el az adszorbenstől. A desztillált vizes mosás után elkülönített adszorbenshez 0,05 mól/liter citrát-iont tartalmazó, 100 ml 0,50 mólos nátriumszulfát-oldatot adunk, és szobahőmérsékleten 1 óráig kevertetünk. Az adszorbenstől szűréssel elkülönített eruátumhoz kétszeres térifogatú telített animóniumszuífátoldatot adunk. Az így kicsapott nyers prothrom» bint szűréssel elkülönítjük az oldattól, majd i2ű ml desztillált vízben oldjuk és váltott desztillált vízzel szemben szulfát-ionmentesre dializáljuk. Ezután a prothrombin-oldatot 2—4 C° közötti hőmérsékletre hűtjük, majd belőle a prothrombint kétszeres térfogatú, — 20 C°-ra hűtött acetonnái kicsapjuk és megszárítjuk. A végtermék súlya 80—100 mg/liter plazma, aktivitása 100—il'50 N. I. H. E/mg, a hozam: 8000—45 000 E/liter plazma. 3. példa: mázó 2,36 mólos ammóniumszulfát-oldatot adunk az adszorbenshez és szobahőmérsékleten 2 órán át kevertetünk. Az így nyert első eluátumot eentrifugálással vagy szűréssel elkülö-5 nítjük az adsziorbeinstől, majd a leoldást 400 ml oldószerrel megismételjük. A két eluátumot egyesítjük és a prothrombint szobahőmérsékleten azonos térfogatú telített amrnóniumszulfát-oldattal kicsapjuk, majd .centrisfugálással 10 elkülönítjük, A csapadékot 200—300 ml desztillált vízben oldjuk és váltott desztillált vízzel szemben szulfát-ionmentesre dializáljuk. Az ionmentes prothrombin-oldatot 2'—4 C° közötti hőmérsékletre hűtjük és kétszeres térfogatú, 15 —20 C°-ra hűtött acetont adunk hozzá. Az így kicsapott prothrombint oentriffugálással elkülönítjük, majd acetonnal mossuk és megszárítjuk. A végtermék súlya — a kiindulási plazma minőségétől függően — 460'—100 mg/liter 20 plazma, akitivitásia 90<—'200 E/mg. A hozam: 10 0ÜO—20000> E/liter plazma. 20 liter 10 C°-ra hűtött oxalates marhapiazmához előbb 8 liter ugyanilyen hőmérsékletű 2'%-ios nátrium-oxalátot, miajd 2 liter 10%-os báriumklorid-oldatot adunk keverés közben. A képződő, majd kiülepedő báriumoxalát-prothrombin csapadékról a fölöttes oldatot leszívatjuk, s a csapadékot előbb 3 liter 2,%-os nátrium-oxalátot tartalmazó élettani konyhasóoldattal, majd 1,5 liter 0%-os konyhasóoldattal, végül desztillált vízzel mossuk; az adszorbenst az egyes mosások között oentr if ugálással vagy szűréssel különítjük el a mosófolyadéktól. Ezután 600 ml 0,05 mól/liter citrát-iont tartal-25 30 Szabadalmi igénypont: Eljárás prothrombin visszanyerésére prothrambin-tartalmú adszorbensekről vizes oldattal való eluálás, majd az eluált prothromíbiinnak a vizes oldatból a sókonoentráció növelésével végzett kicsapása és izolálása útján, azzal jellemezve, hogy a kísérő fehérjéktől mentesített adszorbens eluálását kénsav alkáli-, ammónium- és/vagy magnéziumsójánaik vizes oldatával 0—0,05 mól/liter citrát-ion jelenlétében végezzük. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 6908391. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest v., Balassi Bálint utca 21—23. 3