155978. lajstromszámú szabadalom • Eljárás algák és algákat tartalmazó takarmány enzimatikus feltárására

155978 6 0,01 súly% Cellulase pract. (Serva Lab.) enzimmel, melynek 1 mg-ja 190 [jcg glukózt volt képes felszabadítani cellulózból, 37 C°-on félóránként 1—!l percig kevertettük. A szuszpenzióból ' 20 óra múlva mintát véve a sejtmentes oldatból háromszoros mennyiségű redukáló cukrot (48 /ig/rnl) mutattunk ki a kontrolhoz képest. 3. példla: Ohlorella pyrenoidosa 5%-os, 4,7 pH-jú szuszpenzióját 10 súly%i-nyi Meicelase P (Meiji Seika Co.) enzimmel, melynek aktivitást 440 E/g volt, 50 C°-on kevertettük. 2 óra múlva a szuszpenzióból kivett minta séjtmentes oldatából kimutatott redukáló cukor mennyisége 376 /*g/ml, 47-szerese volt az enzim nélküli kontroll mintáénak. 5. példa: 10 15 20 6. példa: 25 4. példa: Scenedesmus quadricauda 15% töménységű, 6,i8 pH-jú szuszpenzióját 47 C°-o:n 0,íl% oetylpyridind'umbrornid és 0,01% oxytetraciklin jelenlétében Takamine Cellulase (N. W. Chemische Fabriek, ISFaarden) enzim, mely 20 000 E/g aktivitású volt, 1 súly%-nyi mennyiségével kevertettük 20 óra hosszat. A feltárt sejtekből oldatba került fehérje többletmennyisége ml- 30 énként 23,3 mg volt az enzim nélküli kontrollhoz képest. 35 40 Scenedesmus quadricauda 4,5 pH-jú 10%-os szuszpenziójához len-sejtextraktuím koncentrátumából 10 súly%-nyi mennyiséget adtunk, melynek cellulolitikus aktivitása ml-enként 1*3 mg Takamine CeUulase-nak felelt meg. A szuszpenziót 37 C°^on 1% butanol, valamint 100 /tg/iml tetraciklin jelenlétében 48 óra hosszat kevertettük. A kontroll algaszuszpenzióhoz képest a redukáló cukormennyiség 6-szorosra, 120 /ig/ml-re növekedett az enzimoldattal kezelt 45 mintában 24 óra múlva és a 48 órai mintában 7,8-iszeres, 185 /xg/ml volt a redukáló cukor. 50 Scenedesmus obliquus szuszpenziója 40 C°on 4,5 pH-jú közegben 200 ^g/ml tetraciklin jelenlétében Cellulase Typ. I. (Sigma Chem. Co.), melynek 1 mg-ja 1,23 pM glukózt volt képes felszabadítani cellulózból, 1%-nyí meny- 55 nyiségével kevertetve 24 óra után 4-szeres mennyiségű, 88 jttg/ml oldott szénhidrát és 14,0 mg/ml oldott fehérje tartalom volt kimutatható az enzim nélküli kontrollhoz képest. 7. példa: 65 g árpa, 5 g korpa, 15 g kukorica, 10 g zab őrleményhez 5 g Chlorella pyrenoidosa-t adva 4,5 pH-jú 300 ml-nyi szuszpenziót készítettünk és 300' mg Cellulase pract (Serva Lab.) enzimet adtunk hozzá, melynek 1 mg-ja 190 ,ag glukóz felszabadítására volt képes cellulózból. Mértük a szuszpenzió fehérje- és redukáló cukortartalmát az enzim hozzáadásakor, majd 47 C°-on történő kevertetés közbeni inkubáció után is, 4 óra múlva. Az infcubálás megkezdésekor mért 72 mg/ml fehérjetartalom és az 1,34 mg/ml glukózban kifejezett redukáló cukortartalom az infcubálás befejezése után mérve 78,8 mg/ml fehérje illetve 3,96 mg/ml redukáló cukortartalomra emelkedett. 8. példa: 45 g kukorica, 3 g zab, 12 g árpa, 5 g szója, 7 g lucerna őrleményéhez 28 g Scenedesmus quadricauda-t kevertünk és 150 ml 4,5 pH-jú szuszpenziót készítettünk, melyhez 0,15 g oxytetradfclinhidrokloridot adtunk. Meicelase P (Meiji Seika Co.) 440 E/g aktivitású enzimkészítmény 1,5 g-ját oldottuk fel a szuszpenzióban és meghatároztuk inkubálás előtt a szuszpenzió fehérje- illetve redukáló cukortartalmat. 278 mg fehérjetartalmat, illetve 0,87 mg redukáló cukortartalmat mértünk ml-enként. 30 C°-on 24 óra hosszat történő inkubálás után az ml-enként! fehérjetartalom 368 mg-ra, a redukáló cukortartalom pedig 1,74 mg-ra emelkedett. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás algák és algákat, elsősorban egysejtű zöldalgákat tartalmazó takarmányok és/ vagy takarmányadalékok feltárására, azzal jellemezve, hogy a sejtek falát növényi, vagy mikroorganizmus eredetű cellulolitikus enzimekkel, adott esetben bakteriosztatikus, vagy bakterdcid anyagok jelenlétében, részben vagy egészben leibontjuk és a sejtállamányt a sejtekből 'kiszabadítjuk. i2„ Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja azzal jellemezve, hogy a sejteket 2,5—7,0, célszerűen 4,5 pH-jú szuszpenzióban a sejtek szárazaínyagtartalmára számított 0,01—10 súly% mennyiségű szilárd vagy oldatban levő cellulolitikus enzimekkel hozzuk össze, előnyösen kevertetés közben 2—48 óra hosszat és célszerűen 15—60 C° közötti hőmérsékleten. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 6908389. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. 3