155883. lajstromszámú szabadalom • Eljárás lizergsavszármazékok előállítására
MAGTAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Pótszabadalom. a 153 131 számú törzsszabadalomhoz. Bejelentés napja: 1967. III. 08. Svájci elsőbbsége: 1966. III. 10. Közzététel napja: 1968. IX. 25. Megjelent: 1969. X. 15. (SA—1782) 155883 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Dermal osztályozás: Feltalálók: Dr. Kobel Hans vegyész, Dr. Schreier Emil vegyész, Basel, Svájc Tulajdonos: SANDOZ A. G., Basel, Svájc '"Y Eljárás lizergsavszármazékok előállítására A 1531131 sz. szabadalmunkban eljárást is. mertettünk 6-metil-zl8 " 9 -ergolén-8-karbonsav és/vagy lizergsav és izolizergsav előállítására a Claviceps paspali Stevens et Hall gombafaj egyik új, in vitro konidiumokat alkotó törzsének alámerített, ill. fermentortenyészetben való szaprofita tenyésztése, majd a 6-metil-zl8' 9 -ergolón-8-karbonsavnak a tenyészet szűrletéből önmagában ismert módon való extrahálása útján. Ezt a gombát az United States Department of Agriculture (Northern Utilisation Research and Development Division) Peoria, Illinois őrzá NRRL 3080 deponálási szám alatt. Azt találtuk, hogy ebből a gombatörzsből röntgen- és/vagy ultraibolya besugárzás és/vagy etilénimines kezelés hatására önmagában ismert módon olyan mutánsokat lehet előállítani, amelyek több 6-metil-/I8 ' 9 -ergolén-8-karbonsavat képesek termelni, mint a kiindulási törzs. Ezeknek a mutánsoknak egyikét az United States Department of Agriculture (Nothern Utilisation Research and Development Division) Peoria, Illinois őrzi NRRL 3167 deponálási szám alatt. A mutánsok például a következőképpen állít- 25 hatók elő: Az NRRL 3080 gombatörzs konidiumait vízben szuszpendáljuk, és úgy osztjuk el malátaagarral kiöntött Petri-csészékben, hogy minden Petri^csészére kb. 1000 spóra jusson. Ezután az agar-felületet ultraibolya sugarakkal s0 10 15 20 besugározzuk, amíg csak 5—10 konidium csírázik ki Petri-csészénként; ez 99—99,5%-os pusztulási aránynak felel meg. A sugárforrás távolságát és megvilágítási időt előkísérletekben empirikusan határozzuk meg. A .túlélt spórákból 10—14 nap alatt 22 C°-on mikroszkopikusan látható telepek keletkeznek. Ezeket továbboltjuk, hogy a törzsszabadalomban leírt módon konidiumos kultúrákat nyerjünk. Az így nyert mutánsokból tenyésztési kísérletekkel (pl. a törzsszabadalomban leírt kultúrák egyikében) kiválasztjuk' azokat a törzseket, amelyek különösen nagy alkaloidképzési hajlammal tűnnek ki, és ezeket etiléniminnel való további mutagen kezelésnek vetjük alá. Ehhez a konidiumokat 24 C°-on, 2 órán át l^/oo-es etilénimin oldatban szuszpendáljuk, a spórákat membránszűrővel elválasztjuk az oldattól, a szűrön steril vízzel mossuk, majd agarlemezekre oltjuk. Ennél a kezelésnél a pusztulási arány kb. 99%. A túlélő törzsekből a fentebb leírt módon isimét kiválasztjuk a legtöbb alkaloid képzésére hajlamos mutánsokat, és ezeket adott esetben még 5—10-szer etilénimines mutagen kezelésnek vetjük alá. Így például az etilénimines mutagen kezelés 6. ismétlésével különösen erősen alkaloidképző törzset kapunk. Ennek a United States Department of Agriculture 155883
