155443. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-19-oxido-androszt-4-én-3,17-dion előállítására
155443 6 A 2. táblázat adataiból látható, hogy mind a Mycobacterium lacticola, mind a Mycobacterium smegmatis képes jó termeléssel 6,19-oxido-androszt-4-énJ3,il7-diont előállítani. 3. példa: A 2. példában leírt módon eljárva, de a szuszpenziókat Mycobacterium butyricum, ill. Mycobacterium aquae tenyészetéből készítve papírkromatográfiásan a 6,T9-oxido~androszt-4-én-3,17-dion képződését mutattuk ki. 4. példa: Az 1. példában leírt módon készített Mycobacterium phlei rázott MKA2 tenyészetének 100 ml-éhez adtunk 60 mg 6,19-oxido-progeszteront, majd a lombikot 37 C°-on rázatva inkubáltuk. A 6,l, 9-oxido-androszt-4-én-!3,17-dion képződését papírkromatográfiás méréssel követtük. Az eredményeiket a 3. sz. táblázat tartalmazza. 3. sz. táblázat Tenyészet kora órákban Fermentlé 6,19-oxido-androszt^4-érH3,il7-dion tartalma ^g/ml-ben 0 1:2. 24 48 0 167 286 315 10 15 A 3. sz. táblázatban közölt adatok alapján látható, hogy a 6,19-oxido-progeszteronból elő-Jiyös konverzióval 6,l'9-oxido-androszt-4-én-3,T7-^dion képződik. 5. példa: Az 1. példában leírt módon készített Mycobacterium phlei „MFG tenyészetének" 200 miével oltottunk 5 1 MKA2 jelű steril táptalajt 10 l-es f érmen toros üvegben. A tenyészetet 300/ perc fordulatszámmal kevertettük 5 l/pere levegő átáramoltatása mellett 37 C°-os vízfürdőben. Két nap múlva a tenyészethez 3 g 6,19-oxido-Jkolesztenont adtunk, majd az inkübálást folytattuk újabb 48 órán keresztül. Ezután 3 x 1/5 térfogat széntetrakloriddal extraháltuk a fermentlét. Az extraktumot .Na2 S0 4 felett való szárítás után szárazra pároltuk. A bepárlási maradékot éterből kristályosítva 1230 mg 6,19^oxido-androszt-4-én-3,17--diont nyertünk. Op.: 185—188° {a)D = 34 1% 25 30 35 40 45 (c = 1, kloroform), 1„ 238 m^-nál E 438. 1 cm Irodalom: 1. K. Heusler, J. Kalvoda, Oh. Meystre, H. Ueberwasser, P. Wieland, G. Anner, A. Weitstem: Experientia, 18, 464 (1962) 20 2. A. Bowers, R. Villotti, J. A. Edwards, E. Denot, O. Halpern: J. Am. Chem. Soc. 84, 3204 (1962) 3. OH. J. Siti, S. S. Lee, Y. Y. Tsong, K. C, Wang, F. N. Chang: J. Am. Chem. Soc. 87, 2765 (1965). Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás 6,19-oxido-androszt-4-én-3,17-dion előállítására mikrobiológiai úton, azzal jellemezve, hogy az átalakítást 17^?-helyzetű oldallánccal rendelkező, a 0-os és 19-es szánatomok között oxigénhídat tartalmazó szteroidokból kiindulva az Országos Közegészségügyi Intézetben 29. szám alatt letétbe helyezett Mycobacterium phlei vagy a 37. szám alatt letétbe helyezett Mycobacterium lacticola vagy a 36. szám alatt letétbe helyezett Mycobacterium smegmatis süllyesztett tenyészetével széniforrást, nitrogénforrást, valamint egy- és kétértékű kationok oldatát tartalmazó táptalajon aerob körülmények között végezzük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy nitrogénforrásként kukoricalekvárt, aszparagint és éleszrtőkivonatot használunk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 6907927. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23.