155100. lajstromszámú szabadalom • Eljárás virulens Propionibacterium oltóanyag előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGALATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1967. IX. 27. Közzététel napja: 1968. IV. 30. Megjelent: 1969. V. 20. (Cl—731) 155100 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: C12k Jfo Decimái osztályozás: Feltalálók: Dr. Járai Miklós mikrobiológus, 35%, Piukovich Sándor vegyészmérnök, 20%, Karádi Zoltán vegyésztechnikus, 18%, Balázs Ákos vegyészmérnök, 12%, Valkaliosz Thanasziszné mikrobiológus, 6%, Huszti József vegyészmérnök, 3,5%, Dr. Szilágyi Györgyné vegyésztechnikus 3,5%, Válás Györgyné vegyészmérnök, 2,0%, Budapest Tulajdonos: Ghinoin Gyógyszer- és Vegyészeti Termékek Gyára Rt., Budapest Eljárás virulens Propionibacterium oltóanyag előállítására A kobalamin-termelő Propionilbacterium törzsek termelőképességének fokozása az alkalmazott mikrobiológiai gyakorlatban, illetőleg a fermentációs iparban általában genetikai .módszerekkel történik (pl. 152.435 sz. magyar szabadalom), hasonlóképpen, mint az antibiotikíumtermelő mikroorganizmus törzsek esetében (pl. GO—948, 151.985 sz. magyar szabadalmak). Ezek a genetikai módszerek általában nagy munkabefektetéssel járnak, hoszszú időn keresztül nem hozzák meg a kívánt eredményt. A termelt B12 vitamin mennyisége az üzemi viszonyok között azonban nem csupán a törzsek termelőképességétől függ (vagyis attól a képességtől, hogy a törzs milyen mennyiségű vitamint képes szintetizálni), hanem többek közt a törzs szaporodóképességétől, a szaporodás gyorsaságától, a szénhidrát lebontásának sebességétől és ezzel párhuzamosan a kobalamin szintézis sebességétől is. Találmányunk alapja az a felismerés, hogy fokozottan virulens (gyorsabb szaporodó képességgel rendelkező, a szénhidrátokat gyorsabban lebontó) oltóanyag alkalmazása a termelékenységet emeli, különösen Propionibacteriumok esetében, minthogy azok viszonylag lassú osztódásúak — osztódási idejük 5—8 óra. Jelen találmányunk tárgya eljárás kobal-10 15 20 25 30 aminők fermentációjához alkalmazható virulens Propionibaeteirium oltóanyag előállítására amelyre jellemző, hogy Propionibacterium törzset magnéziumkarbonátot tartalmazó szilárd vagy folyékony táptalajon inkubálurik, anaerob körülmények között. A magnéziumkairbonát alkalmazása virulens oltóanyag előállításához újszerű és lényegében egy speciális, „biológiai puffer-rendszer" felismerését jelenti. A szénhidrátbontás eredményeképpen ugyanis a fejlődő törzs a tenyésztés során szerves savakat, itt elsősorban a propionsavat, ecetsavat és szénsavat termel. A tenyészet pH-ja ezért gyorsan csökken és eléri azt a pH-tartományt, ahol az élettani folyamatok lelassulnak, illetve megállnak. A fiziológiai folyamatok jelentős lelassulása már pH 6 alatt megfigyelhetően bekövetkezik. A megfelelő pH tartása tehát (6—7 között) az egész fermentáció során lényeges és ezért ezt általában gyenge lúg (ammóniumhidroxid, híg nátriumhidroxid, nátriumkarbonát) adagolásával szabályozták a fermentációk során. E módszerek hátránya, hogy az optimális pH beállítása nehézkes üzemi körülmények között és különösen az inokulum előállítás során alkalmazható rosszul, ahol a sterilitási problémák és az ingadozó pH, valamint az anaerobitás csökkenése fokozott károkat okoz és csökkenti a törzs virulenciáját. 155100