154859. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dekapeptidek előállítására az adrenokortikotrop hormon molekula első tíz aminosav-gyökének szekvenciájával a molekula N-végződésétől számítva

154859 5 6 2. táblázat Adag jx ekvivalens NEFA/1 szérum adott Készítmény (mg) Állat időpontokban i. v. (óra) 0 1/2 1 2 4 „Csupa L"- 1,0 V 1 400 1370 710 710 710 -dekapeptid 1,0 V 2 92 1650 710 650 950 5,0 V 3 630 2590 2020 843 800 5,0 V 4 790 3050 2680 544 576 7-D-Fhe- 0,2 V 5 705 756 768 1250 1120 -dekapeptid 0,2 V 6 534 2290 1910 1205 1055 1,0 V 7 576 3160 2470 1535 1230 1,0 V 8 394 2810 2240 1980 1040 5,0 V 9 156 4230 4280 3520 5,0 V 10 1120 4300 5100 4450 Megjegyzés: a 1000 JX ekvivalensnél nagyobb NEFA értékeket pozitív reakciónak tekintettük. Ebből a táblázatból kitűnik, hogy a 7-D-femil-^dekapaptid és a „csupa L"-dekapeptid in vivo hatásának aránya kb. ugyanakkora, mint az in vitro mórt hatásoké. Az első készítmény még 2 és 4 óra múlva is hatásos, míg az utóbbi készítmény által előidézett NEFA-tartalorn növekedés sokkal rövidebb időtartamú. Ezért indokolt az a következtetés, hogy a D-Phe-peptid a testben kevésbé könnyen bomlik el. Az egyik kísérleti felszerelésben, amelyben a patkányok kondicionált viselkedése tanulmányozható, „rúdra ugrató kalitka" van elhelyezve. A patkányokat arra szoktatjuk, hogy egy rúdra ugorjanak, mihelyt fény villan fel, vagyis az ún. feltételes inger jelentkezik. 5 másodperccel ez után a feltételes inger után elektromos áramot bocsátunk a fémrács padlóba, .ami sokkot okoz. 3 egymás utáni napon 10 szoktató próbát végzünk, közben 60 másodperces szünettel. Azokat a patkányokat, amelyek legalább 10 poxitív választ adtak e 3 nap alatt a 30 végzett próbára, szoktatottnak tekintettük, és ezeket használtuk a leszoktató próbákhoz. Ezeken a próbákon a patkányok feltételes ingerre adott -pozitív válaszai számának az alapján megállapítjuk, hogy az állatok az elsajátított viselkedést milyen gyorsan felejtik el. Ugyanazt a módszert követjük, mint a rászoktatásnál, azonban a kondicionáló ingert, azaz az elektromos sokkot elhagytuk. Minden egyes patkány pozitív feltételes válaszainak a teljes száma, amelyet vagy a szoktatás vagy a leszoktatás folyamán jegyeztünk fel, az állat szoktatott elkerülési indexét adja. Ismeretes, hogy az ACTH késlelteti a feltételes reflex megszűnését [lásd J. V. Murphy, J. comp. physiol. Psychol. 48, 47 (1955)]. Az ACTH N-végződésű dekapeptidjének azonos hatása van, ha a bőr alá adjuk állatonként 10 /xg adagban, cinkfoszfáttal alkotott adszorpciós komplexének alakjában, azonnal a szoktatási periódus után és közvetlenül a leszoktatási periódus előtt. Meglepődve tapasztaltuk, hogy azok a dekapeptidek, amelyekben legalább a fenilalanin gyök D^konfigurációjú, leszoktatást gyorsító hatásúak a leszoktatás késleltetése helyett, ha cink, nikkel, kobalt, réz vagy vas egy oldhatatlan sójával, oxidjával vagy hidroxidjával képzett rosszul oldódó komplexüknek alakjában adagoljuk. Az eredményeket a következő táblázatban adjuk meg. 3. táblázat 8—10 állat átlagos szók* uknanyozott Beadott peptid tátott Perlod,us

elkerülési indexe Szoktató periódus — 13 Leszoktató periódus Placebo 10 ACTH, 3 i. v. 23 „Csupa L"-dekapeptid, 10 ixg 20 7-D-Phe-dekapeptid, 10 pg 6 40 45 50 55 S0 3