154699. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mumpsz-elleni vakcina előállítására

154699 szövetkultúrákat. Mindegyik palatík-kultúrahoz 70 ml „199" közeget adunik, amely 10% menynyiségű arányban valamely alkalmas vírus-fertőzőképesség stabilizálószert is tartalmaz; a palackokat ezután 130—34 C° hőmérsékleten inkubáltatjuk. A kultúra kifejlesztéséhez és ienntartásához alkalmazott közegbe 50 gamma/ml neomioint is Ibeviszünk. Az inkubáltatás folyamán a terméket 2—4 napos időközökben többször begyújtjuk és a palack-kultúrákat friss fenntartótápközeggel {amely a fentemlített stabilizálószert is tartalmazza) feltöltjük. Tíz sorozatos átvitelt folyttatunk le, mindvégig 32 C° körüli hőmérsékleten. Minden egyes begyűjtésnél fertőzőképessóg-titrálást végzünk „HeLa" vagy majom-veseszövet kultúrában. A termék begyűjtését aszeptikus körülmények között végezzük, steril edénybe; a mikroibiális sterilitási próbák céljaira jmíintákat veszünk, a megmaradó részt pedig alkoholos szárazjégifürdő.ben megfagyasztjuk. A vírust tartalmazó folyadékokat —'70 C° hőmérsékleten tároljuk elektromos hűtőberendezésben, amíg a terméket a vakcina készítéslére fel nem Ibasználjuk. Egyes begyűjtött termékeket fertőzőképesség-titrálás /végzésére használunk fel az alábbi módon: A kiválasztott termék^adagöt kivesszük a fagyasztóbeirendezésből és felengedni hagyjuk. Ellenőrző vizsgálat céljaira mintát veszünk ki az anyagból. A visszamaradó folyadékot derítjük ós mintát veszünk belőle, »hogy a készítmény veszélytelenségét majmokon ellenőrizzük. A visszamaradó folyadékot további stabilizáló -szer hozzáadása után apró palack okba osztjuk szót és megszárítjuk. Szárítás után a palackocskákait sapkáikkal lezárjuk és a vakcina elkészítésekor steril vizet adunk a palackocska tartalmához. ' Kipróbálás embereken: Kb. 150 gyermeket, akik mompiszHmegibetegedésen .még nem estek át, parenterálisan kezeltünk a fenti módon elkészített legyengített mumpsz-vírus vakcina magfelelő adajával. A vakcinával. való kezelés után egy «hónapon belül lényegileg valamennyi gyereknél számottevő antitesttiter volt megállapítható. A gyermekek vagy egyáltalán nem, vagy csak egészen csekély .mértékben mutattak klinikai tüneteket; a klinikai reakció mértéke az alkalmazott mumpsz-vírus törzstől és az embrionált tyúktojásokon vagy csirkeembriószövetkultúráfcon történt átvitelek számától is függött. 2. példa: Az 1. példában leírthoz hasonló emódon dolgozunk, a mumpsz-vírus inkubál tatását azonban 35—^38 C° hőmérsékleten, általában 36 C° körül végezzük. elkészített mumpsz-vírus inokulumot alkalmazunk. A vírus legyengítóse céljából több vagy kevesebb egymást követő átvitelt végezhetünk 5 csirfceernbrió-szövetkultúrán. Ezt megelőzően végezhetünk sorozatos átviteléket embrionált tyúktojásokon is. :Ezt a munkamódszert szemléltetik az alábbi példák: 10 4. példa: Három átvitelit végzünk embrionált tyúktojásokon, 30—38 C° hőmérsékleten, majd egy szaporítást csirkeembrió^szövetkultúrán . 30—-38 15 C°-on. 5. példa: Tízszer oltjuk át a kultúrát embrionált tyúk-20 tojásokon, 30—-38 C°-on, majd további tíz alkalommal esirkeemlbrió-szövetkuttúrán, ugyan, csak 30—38 C° hőmérsékleten. 25 6. példa: Hússzor oltjuk át a kultúrát embrionált tyúktojásokon, 30—38 C°-an, majd további két alkalommal csirkeembrió-szövetkulltiúrán, 'ugyancsak 30'—38 C° hőmérsékleten. 7. példa: 3. példa: Az 1. példáiban leírthoz hasonló módon dolgozunk, de a fentemlített 2, módszer szerint Közvetlen elkülönítést végzünk csirkeembrió^szövetkultúrán 30—38 C° Ihőmérsékleteri, 35 majd egy szaporítást cskkeerribrió-szövetkultúrán 30—34 C°-on. 8. példa: 40 Közvetlen elválasztást végzünk csirkeeimbriószövetkultúrán 30—38 C° hőmérsékleten, majd tíz átoltást csirkeembrió-szövetkultúrán 30—34 C°-o:n. 45 9. ipélda: Közvetlen elkülönítést végzünk csirkeembriószövetkultúrán 30—38 C° hőmérsékleten, majd egyszer átoltjuk' csirkeembrió-szövátkultúrára 50 35—^38 C°-on. ' 10. példa: Közvetlen elkülönítést végzünk csirkeembrió-55 szövetkultúrán 30—38 C° hőmérsékleten, majd tíz sorozatos átvitelt végzünk, ugyancsak csirkeembrKHSzövetkultúrán 35—38 C° 'tjőmérsékleten. A fentebbiekben a találmány szerinti eljárást 60 példaképpen csiirkeemlbrió-szövetkultúrákon történő tízszeri átoltás (passzázs) alkalmazásával írtuk le. Meg kell azonban jegyezni, hogy adott esetekben kisebb számú átoltás is elegendő le,het, a vírus megfelelő mértékű legyengítésére. 65 így eljárhatunk oly módon is, hogy a vírust 3