154485. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rákellenes hatású szer előállítására

154485 15 jük és centrifugáljuk. A szupernatáns folyadékot (3) eltávolítjuk. A csapadékot kismenynyiségű vízben oldjuk és az oldatot liofilizáljuk. Ily módon 2200 mg száraz terméket kapunk, amelynek elemzési adatai: 16 nukleinsav fehérjék 6,64%, J8 %. Ezt a terméket intravénás injekcióban, 2 mg- 10 os adagokban beadtuk jól kifejlett „180" szarkomával fertőzött egereknek; mind a 20 kezelt állatnál a tumor messzemenő nekrózisát tapasztaltuk, a kezelt állatok közül 8 pedig 10 nap alatt teljesen meggyógyult. 15 18. példa: A 15. példa szerint kapott végtermék 1500 mg mennyiségét 45 ml só oldatban oldjuk és az oldathoz 15 mg átkristályosított tripszint adunk. Az elegyet 37 C° hőmérsékleten tartjuk 20 óra hosszat állandó keverés közben, miközben az elegyet pH-értékét időnként 7-re állítjuk viszsza. Ezután az elegyet centrifugáljuk, az abszorbeálatlan" anyagból álló '(1) csapadékot eltávolítjuk. A szupernatáns folyadékhoz (2) nátriumkloridot adunk 12%-os koncentráció eléréséig. Ennek hatására a csapadék leülepszik; ezt percenként 2700 fordulattal 30 percig centrifugálva elkülönítjük; az így kapott (3) csapadékot vízben feloldjuk és az oldatot liofilizáljuk. Ily módon 400 mg száraz terméket kapunk, amelynek elemzési adatai: nukleinsav 0,5%, fehérjék 11 %. Ez a termék egereknek intravénásán beadva, még 8 mg-os adagokban sem okoz semmi változást a tumorokon a kezelt 20 egérnél. A fentiek során kapott szupernatáns folyadékhoz (4) a folyadék fél térfogatának megfelelő mennyiségű alkoholt adunk. A képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük, kevés vízben oldjuk és liofilizáljuk. Ily módon 120 mg száraz anyagot (5) kapunk, amelynek elemzési adatai: nukleinsav fehérjék 7,3%, 21 .%. Ezt a terméket 4 mg-os adagokban intravénásán beadtuk 20 jól kifejlett „180" szarkomával fertőzött egérnek; 18 egéren a tumor meszszemenő nekrózisát tapasztaltuk, ezek közül 8 állat 10 nap alatt teljesen meggyógyult. 19. példa: 5 g liofilizált Lactobacillus bulgaricus LB—51 baktériumsejtet 50 ml só oldattal, (amelynek pH-értékét 7-re állítottuk be) hígítunk. Az •elegyhez 50 mg lizozimet adunk, 37 C° hőmérsékleten, majd az elegyet ezen a hőfokon 2 óra 20 25 30 3a 40 45 50 55 60 65 hosszat állandóan keverjük. Az elegyet ezután sósavval 2 pH-értékre savanyítjuk és 50 mg pepszint adunk hozzá. Az elegyet 4 óra hosszat 37 C° hőmérsékleten tartjuk, majd percenként 2700 fordulattal 30 percig centrifugáljuk. A kapott szupernatáns folyadékot eltávolítjuk. A csapadékot i(2) feloldjuk előzetesen 7 pH-értékre beállított só oldatban, majd 50 mg „Difco" tripszint adunk hozzá. Az elegyet 4 óra hosszat folytonosan keverjük 37 C° hőmérsékleten, majd percenként 2700 fordulattal 30 percig centrifugáljuk. Az abszorbeálatlan maradékokból álló (3) csapadékot alkohollal mossuk és megszárítjuk. 640 mg száraz anyagot kapunk. A szupernatáns folyadékot (4) egyenlő térfogatú alkohollal keverjük. Az elegyet centrifugáljuk, a csapadékot (5) kismennyiségű vízben oldjuk és cellofán-diafragmával dializáljuk, áramló vízben, majd az oldatot liofilizáljuk. Ily módon 500 mg száraz terméket kapunk, amelynek elemzési adatai: nukleinsav fehérjék 11,36% 37 %• Fentiek során kapott szupernatáns folyadékot (6) egyenlő térfogatú alkohollal elegyítjük és centrifugáljuk. A képződött csapadékot (7) feloldjuk kismennyiségű vízben, majd az oldatot áramló vízben 24 óra hosszat dializáljuk, majd liofilizáljuk. Ily módon 80 mg száraz terméket kapunk, amelynek elemzési adatai: nukleinsav fehérjék 41,24%, 29 %. A fentiek szerint kapott (5) és (7) csapadékokat 4 mg-os adagokban beadtuk „180" szarkomával fertőzött egereknek; mind a 20 kezelt állaton a tumor igen határozott nekrózisát tapasztaltuk. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás antikarcinogén hatású szer előállítására, azzal jellemezve, hogy a Lactobacillus bulgaris, Lactobacillus casei, Lactobacillus helveticus vagy Lactobacillus acidophilus mikroorganizmus-fajok valamelyikének tumor-nekrotizáló hatóanyag termelésére képes variánsához (varietas tumoronecroticans) tartozó mikroorganizmus törzset asszimilálható szénforrást és nitrogénforrást tartalmazó vizes tápközegben tenyésztünk, a kapott kultúra baktérium sejtjeit vagy az azokból nyert termékeket — szükség esetén az említett sejtek, ill. termékek szétroncsolása útján — oldószerrel, célszerűen vízzel vagy fenollal extraháljuk és a kapott kivonatból az antikarcinogén hatóanyagot, célszerűen kicsapás útján kinyerjük. (Elsőbbsége: 1965. június 01.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmusként az alábbi törzsek valamelyikét alkal-8