154485. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rákellenes hatású szer előállítására

154485 8 Ha egereknek intravénás injekcióban megfelelő adagban beadjuk, akkor a jól kifejlett intradermális Krocker-típusú szarkomával („180" szarkoma) vagy intradermális Ehrlidh-karcinomával fertőzött egereken gyakorlatilag min- 8 den esetben a tumor jól definiált nekrózisa tapasztalható és az állatok fele néhány nap alatt gyakorlatilag teljesen meggyógyul. Az új antikarcinogén anyag tulajdonságai arra mutatnak, hogy ez az anyag igen bonyo- io lult molekuláris szerkezetű. Tulajdonságaiban valamennyi eddig ismert antikarcinogén szertől különbözik. A találmány szerinti új antikarcinogén anyaggal végzett számos kémiai elemzés azt 15 mutatja, hogy az anyag bonyolult kémiai szerkezetű, emellett az anyag ribonukleinsavat is tartalmaz, amelynek kémiai és fizikai tulajdonságai lehetővé teszik az új antikarcinogén anyag definiálását. 20 Az új antikarcinogén anyag egy részét képező ribonukleinsav sóképző fémként nátriumot tartalmaz, emellett az alábbi jellemző elemeket tartalmazza: 25 szén 33,35% hidrogén 4,43% nitrogén 13,70% foszfor 9,80% Ez a ribonukleinsav abszorpció-csúcsértéket 30 mutat 258 millimikronnál. Ibolyántúli színképét az 1. ábra, infravörös színképét pedig a 2. ábra szemlélteti. Az anyag hidrolízise után végzett kromatográfiás szénhidrát-elemzés, amelynek során 35 1:1:1 arányú butanol — propanol — víz oldószer-rendszert alkalmaztunk, 0,35 R/-értéknél mutat a ribóznak megfelelő görbét. ' A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szem- 40 léltetik. 1. példa: 2O0 ml tápközeget, amely 3% szójakivonatot, 0,5% eptont, 0,5% húskivonatot, 0,5% élesztő- 45 kivonatot, 0,5% szacharózt és 0,1% magnéziumszulfátot tartalmaz, beoltunk Lactobacilus bulgaricus var. tumoronecroticans LB—51 törzzsel. 37 C° hőmérsékleten 24 óra hosszat inkubáltatunk. A kultúra pH-értékét ezután 50 6,5-re állítjuk és 5000 g-nek megfelelő fordulatszámmal 30 percig centrifugáljuk. A szupernatáns folyadékot (1) 0,5 ml menynyiségben intravénásán beadjuk „180" szarkomával szubkután implantáció útján fertőzött 55 egereknek .(a szarkoma jól kifejlett állapotában). A kezelt 20 egér közül egynél sem tapasztaljuk a tumor nekrózisát. A baktériumsejteket tartalmazó üledéket (2) némi fekete homokkal mozsárban eldörzsöljük, majd 100 60 ml desztillált vízzel extraháljuk. Ezt az elegyet azután ismét centrifugáljuk 5000 g-nek megfelelő fordulatszámmal és a szupernatáns folyadékot (3) ugyancsak intravénás injekcióban beadjuk 0,5 ml adagban a „180" szarko- g5 mával fertőzött egereknek. 24 óra elteltével a kezelt 20 egér közül 17-hél a tumor nekrózisát tapasztaljuk és 10 nap múlva 8 egér teljesen meggyógyul. Lactobacillus casei var. tumorpneceroticans; No. 17 törzsből kapott baktériumsejt-kivonattal ugyanilyen kísérleti körülmények között á kezelt 20 egér közül 14-nél mutatkozott a tumor nekrózisa és 4 egér mutatott teljes gyógyulást. Lactobacillus helveticus var. tumoronecroticans No. 31 törzsből nyert baktériumsejt-kivonattal a kezelt 20 egér közül 15-nél tapasztaltuk a tumor nekrózisát és 5 egér mutatott teljes gyógyulást. Lactobacillus acidophilus var- tumoronecroticans No. 43 törzsből nyert baktériúmsejt-kivonattal a kezelt 20 egér közül 12-nél tapasztaltunk nekrózist és 3-nál teljes gyógyulást. 2. példa: 1200 liter alábbi összetételű tápközeget 3 % szójakivonat 0,5% húskivonat 0,5% pepton 2 % melasz (cukorra számítva) 0,1%) magnéziumszulfát 1200 liter vízvezetéki víz beoltunk Lactobacillus bulgaricus var. tumoronecroticans LB—51 törzzsel és 24 óra hoszszat inkubáltatjuk,37 C° hőmérsékleten. A kultúra pH-értékét azután 6,5-re állítjuk, majd centrifugálunk. Az üledéket 50 térfogat fiziológiás sóoldattal öblítjük, majd ismét centrifugáljuk, így 14 200 g nedves természetes baktériumsejtet kapunk. 5000 g ilyen baktériumsejtet 15 000 ml vízzel hígítunk, majd homogenizáló készülékben szétroncsoljuk a sejteket. A homogenizált terméket 5000 g-nek megfelelő fordulatszámmal centrifugáljuk és a szupernatáns folyadékot (1) elkülönítjük. 10 ml ilyen folyadékot oly arányban hígítunk desztillált vízzel, hogy a 8 mg/ml szárazanyagot tartalmazzon és ezt a folyadékot 0,5 ml adagban intravénásán beadjuk kifejlett Krocker-szarkomával fertőzött egereknek. A kezelt 20 egér közül 19-nél a tumor nekrózisát tapasztaljuk; 12 egér végülis teljesen meggyógyult. 100 ml fenti módon kapott (1) szupernatáns folyadékot liofirizálunk; a kapott száraz termék kémiai elemzése az alábbi összetételt mutatja : nukleinsav 0,5%, fehérjék 70 %. 3. példa: 3000 ml- (1) szupernatáns folyadékot — amelyet a 2. példában leírt módon nyertünk — hozzáadunk 6000 ml 96%-os etanolhoz. Az elegyet 2 óra hosszat 4 C° hőmérsékleten tartjuk, majd centrifugáljuk. A szupernatáns folyadékot elkülönítjük és a centrifugálási üledéket (3) feloldjuk 6O0 ml vízben, majd a vízben nem oldódó mara-4