154228. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibiotikus hatású anyagok előállítására
154228 23 24 A keletkező szuszpenziót leszűrjük, két ízben minimális mennyiségű vizes metanollal mossuk (8,3 térfogat/térfogat% víz) és vákuum-exszikkátorban szobahőmérsékleten szárítjuk. Sötétbarna csapadékot kapunk. A fentiek szerint előállított csapadékot 4340 ml metanolban oldjuk, szűrjük és 0 C°-on, 3 óra alatt lassan 672,7 ml vizet adunk hozzá. A kapott elegyet (—0) C°-os hűtött fürdőbe helyezzük és egy éjjelen át keverjük. A kiváló kristályokat leszűrjük, (—20) C°-on minimális mennyiségű vizes metanollal (15,5 térfogat/térfogat% víz) mossuk és szobahőmérsékleten, vákuumban szárítjuk. Sárga, tűszerű, kristályos anyagot kapunk. Az ily módon nyert kristályos terméket ismét 4340 ml metanolban oldjuk, keverés közben 6,95 g aktív szenet adunk hozzá és 10 perc elteltével szobahőmérsékleten leszűrjük. A szűrlethez 0 C°-on 3 óra alatt lassan 672,7 ml vizet adunk. Az elegyet (—9) C°-os hűtött fürdőbe helyezve egy éjjelen át keverjük. A kiváló kristályokat leszűrjük, (—20) C°-on minimális mennyiségű vizes metanollal mossuk és szobahőmérsékleten, vákuumban szárítjuk. Világossárga, kristályos, (I) képletű vegyületet kapunk. Az (I) képletű vegyület acetofenonos átkristályosítása után annak megfelelő, vízmentes (la) képletű származékát nyerjük. A törzs jellemzésénél felhasznált táptalajok összetétele a következő: La. fenntartó táptalaj Triptikáz Élesztőextrakt Szaccharóz Trágyaextrakt* Melasz MgS04 -H 2 0 FeS04 • 7H2 0 Mikróelem-oldat** 0,5 % 0,3 % 0,5 % 0,5 ml/100 ml 0,5 ml/100 ml 0,05% 1,0 mg/100ml 0,1 ml/100 ml I.b. táptalaj Az La. táptalajhoz 2,5% nyers burgonya-pürét adunk. i II. táptalaj dl-aszparagin Glükóz Élesztőextrakt MgS04 • 7H2 0 FeS04 • 7H2 0 % % 0,1 0,1 0,5 % 0,05% 1,0 mg/100 ml 10 15 20 25 S0 35 IV. táptalaj (árpa) Gerber-féle árpa 1,0% Trágyaextrakt* 1,0 ml/100 ml D-mannit 0,2% V. táptalaj (b asamin) Basamin (Anheuser-Busch) 0,5% Oldható keményítő 0,5% Triptóz 0,2% Glükóz 0,2% VI. táptalaj N-Z-Amin B 0,5% Élesztőextrakt 0,2% Soytone 0,2% Oldható keményítő 1,0% D-mannit 0,5"/o FeS04 -7H 2 0 1,5 mg/100 ml Mikróelem-oldat** 0,1 ml/100 ml VII. táptalaj (szintetikus) NaN03 0,2 % K2 HP0 4 0,1 % MgS04 -7H 2 0 0,05% KCl 0,050/0 FeS04 • 7H2 0 1,0 mg/100 ml Mikróelem-oldat** 0,1 ml/100 ml Szaccharóz 1,0 % D-mannit 0,5 % 40 45 50 55 Valamennyi táptalaj pH-ját 7,0—7,2 értékre állítottuk; szükség esetén 2,0% mennyiségig agart adtunk a táptalajhoz. * Trágya- és talaj-extrakt: 25% szárított báránytrágyát (trágyaextrakt-készítés esetén) vagy 50% levegőn szárított, 0,1% kalciumkarbonátot tartalmazó kerti talajt (talaj-extrakt készítése esetén) csapvízben szuszpendálunk, 30 percen át autoklávozunk, szűrünk és a szűrletet toluol alatt lehűtjük. ** A mikroelem-törzsoldat összetétele a következő (per ml): Fe [mint Fe(NH 4) 2 S0 4 ] Zn (mint ZnS04 ) Mn (mint MnS04 ) Cu (mint CuS04 ) Co (mint CoS04) B (mint H3BO3) Szabadalmi igénypontok: 1,0 mg 1,0 mg 0,5 mg 0,08 mg 0,1 mg 0,1 mg III. táptalaj (talaj extrakt) Talaj extrakt* N-Z-Amin B Oldható keményítő Glükóz •5,0 ml/100 ml 0,2% 0,5% 0,1% 60 1. Eljárás antibiotikus hatású anyagok előállítására azzal jellemezve, hogy valamely, a refuineus var. thermotolerans fajhoz tartozó, 3143 vagy 3144 NRRL-számú termofil Streptomycetát keverés és levegőztetés mellett kb. 65 0,1—9,0 súly% fehérjeforrást — mimellett az 12
