154112. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fermentációs táptalajok sterilizálására
154112 tartalmát közömbösíti és minden vegyszer hozzáadása nélkül pillanatszerűen olyan táptalajt kapunk, amelyen a beoltott niikroorganizmiusok épp olyan, jól fejlődnek, mint a szokásos módon hővel sterilizált táptalajokon. A klór pillanatszerűen semlegesítődik, aminek az az egyik előnyös következménye, hogy a nevezett vegyület nem fejt ki fcorrozív hatást a készülék fémrészeire. Eddig még nem vállt teljes bizonyossággal ismeretessé, hogy a kukorioalekvárnak melyik alkatrésze vagy alkatrészei reagálnak sámán a klórral, de tekintve a kukori'calekvár növényi eredetét, világosi, hogy ezek az anyagok lényegesen különböznek a szokásos klórmegkötő reagenseiktől. Valószínű, hogy elsősorban szabad szulfhidíril-csoportokról van szó. Az eljárás nem alkalmazható olyan táptalajok sterilizálására, amelyek 1—1,5%-nál több keményítőt tartalmaznak. Ezeknél a sterilizálás lényegesen csökkentett térfogatiban nem vihető keresztül, ment 5—6%-osnál töményebb keményítőoldatok gélt képeznek, nem keverhetők megfelelően és így nem biztosítható bennük a sterilizáláshoz szükséges egyenletes hőfok. Példák: 1. Egy 30 liter térfogatú femfermentorfoa 5 liter vizet töltünk, lebben feloldunk 400 g 50 %-os szárazanyagtartalimú kukoricalekvárt, 400 g tejcukrot és 100 g CaC03-ot szuszpendálunk az oldatban és a készüléket 122 C°-on 1 órán át sterilizáljuk az ismert elővigyázatossági intézkedések betartása mellett. Egyben hővel sterilizáljuk a levegőszűrő-irendszert és a készülék egyéb tartozékait (tabzásgátló-tartály stlb.) is. Ezután a készülékben levő folyadékot lehűtjük 60 C°-ra. Közben egy .sav- és Hörálló edényben 16 1 csapvízhez 8 ml Hypo-lúgot és annyi kénsavat adunk:, hogy a pH 3 körül legyen. Félórai állás után — amikor a ferment oirlban sterilizált folyadék: hőmérséklete 60 C°->na csökkent, a tartály alján levő csövön át 15 liter klórral sterilizált vizet juttatunk a készülékbe keverés közben. 15 liter víz betáplálása után kb. 26—28 C°-os, oltásra kész steril táptalajt kapunk, amelyét 1,2 liter P. chrysogenum tenyészettel oltunk be. — A fenmentációt az ismert módon, fenilecetsav és habzásgátló olaj adagolása mellett levezetve, a 1120 órában azonos értéket — 2,3 mg/ml ibenzüpemcillint kapunk, mint a párhuzamos, azonos módon levezetett kísérletben, ahol azonban a táptalajt a szokásos módon, hővel sterilizáltuk. 2. Egy 3 m3 űrtartalmú fermentáló berendezést direkit gőz befúvatásáival 130 C°-ra melegítünk és ezen a hőfokion tartjuk 30 percig, majd a kondlenzvizet leeresztjük. Ezután a 5. készülékbe juttatunk egy folyamatos sterilizáló készülékben sterilizált 100 liter folyadékolt, amely 10% kukoricalekvárt, 2% CaC03 -ot és 10 g Co Cl2-ot tartalmaz. Ezután az 1. példában leírt módon klórral sterilizált 1,7 ms vizet jutta-10 tunk a készülékbe keverés közben, végül pedig a folyamatos sterilizáló készüléken át 200 liter' 50%-os glukóz-oldatot. Így 2 m3 steril, kb. 31 C° hőmérsékletű táptalajt kapunk, amelyet azonnal beoltunk 100 liter oltóanyag céljául szolgáló 15 Propionibacterium shermanii-tenyészéttel. A fermentációt az ismert módon lefolytatva, a pH-t 6 és 7 között tartva, a fermentáció végső szakaszaiban 20 jiig/ml 5,'6-dimétiülbenzimidazoit beadagolva, 11,8 /tgi/ml Bi2-vitamimt 20 nyerünk, ugyanannyit, mint a hagyományos módon, hővel sterilizált táptalajon végzett ellenőrző kísérletben. 3. 2 db 10 1 űrtartalmú üvegifermenitor'ba a következő anyagokat mérjük be: 180 g glu-25 kózt, 30 g 50%-os kukoriealekivárt és 200 g malátakivonatot. Az egyik fermentorba 6 liter vizet töltünk, a táptalajaHkatrészeket keveréssel féloldjuk, majd 120 C°-on -60 percig sterilizáljuk. £0 A másik fermentorba 1,2 liter vizet töltünk, a táptalaj alkatrészeket keveréssel feloldjuk és a fermentart ,120 ,C°-on 60 percig sterilizáljuk, majd az előző példákban leírt .módon klórral sterilizáltt vízből 4,8 liternyit adunk hozzá és 35 jól összekeverjük. Lehűlés után mindkét ferméntort beoltjuk Khizopus nigrieans-spórával és 24 ónai 26 C°-on intenzív levegőztetés és keverés közben való tenyésztés után acetonos oldatban 6 g progesteront aduink mindkét te-40 nyészethez. Mindkét fermentorhan 68%-os kitermeléssel ll-oxi-progesteron képződik. 45 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás ipari fermentációs .táptalajok sterilizálására, azzal jellemezve, hogy a fermentációs berendezést, valamint a tömény oldatban levő tápanyagokat, amelyek legalább egy 50 könnyen oxidábilis komponenst is tartalmaznak, ismert módon, hővel sterilizáljuk, majd a sterilizált tömény oldatot keverés közben klórral sterilizált vízzel feltöltjük a teljes fermentációs térfogatna. 55 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve:, hogy a táptalaj oxidábilis komponense kukoricalekvár. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 6708270. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. 2
