154055. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és készítmény aldoláz meghatározására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Bejelentés napja: 1965. IX. 30. (AE—190) Német Demokratikus Köztársaság-beli elsőbbsége: 1965. III. 11. 154055 Közzététel napja: 1967. IV. 22. Megjelent: 1968. III. 15. Szabadalmi osztály: 42 1 3 INemzetközi csztály; G 01 n Decimái osztályozás: Feltaláló: Dr. Wagenknecht Claus orvos, Berlin-Treptow, Német Demokratikus Köztársaság Tulajdonos: VEB Arzneimittelwerk Dresden, Radebeul, Német Demokratikus Köztársaság Eljárás és készítmény aídoláz meghatározására A találmány tárgya eljárás és készítmény emberi ós állati szervezetiben, az extra- ós intraoeBulíáris folyadék aldoláz aktivitásának kimutatására és meghatározására. Ismeretessié vált az, bogy az alodláz a fruktóz"l,6-difoszfát és két triazföszfát, mégpedig a difaidroKiacetonfoszíát és 3-foiszfogliicerinaldehid közötti kémiai egyensúly beállását katalizálja. A zaltdoláz aktivitást úgy leihet meghatározni, hogy a képződött triozfoszfátokiat használják fel az aktivitás meghatározására. Ismeretesek olyan módszerek, amelyek a triózok megfelelő fenilhidrazonjainak képződésén alapszanak. Ez utóbbiak ugyanis színűk alapján fotometriás úton könnyen meghatározhatók. Más módszer szerint a triózfoszfátok hidrolízise során képződő foszfátok meghatározását értékesítik az enzimaktivitás megihatarozására. Ezek a lehetőségek nem engedik meg azt, hogy az anzimaktivitást kinetikailag lehessen nyomon követni. Az enzjmimegihatározáis egy másik módszere értelmében a gHoerin-1-foszfátdehidrogeriáz vagy a glioerinaldehid foszfátdehidrogenáz és koenzim (redukált ill. oxidált nikotinsavadenindinukleotid) mint segédenzimek beadagolása útján lehet az a'Moláz aktivitást mérőMncban optikai úton meghatározni. A bevezetőben leírt nem kinetikai módszerek hátránya az, 'hogy igen körülményesek, ezenkívül az; enzimaktivitáis állandó és folyamatos 10 Í5 20 25 30 nyoimonikövetését sem biztosítják. A többi módszer1 hátránya az, 'hogy mérésükhöz különleges optikai berendezések szükségesek. Az optikai műszerekkel szemben támasztott követelmény ugyanis az, hogy az időiegységben történő extinkcióváltozásnak az ibolyántúli tartományban (340, ill. 366 nmi) való mérésére1 legyenek alkalmasak. Ezáltal, természetesen csak megfelelően felszeneit laboratóriumokban válik lehetővé az etnzimaktirvitiás mérése. A technikai fejlődés során követelményként merül fel az, hogy az .aldoláz-aktivitást a legegyszerűbb körülmények között és ibolyántúli hulMmhoisBZ mérésére alkalmas; optikai berendezés, ill. más típusú fotométerek nélkül kinetikailag lehessen meghatározni. A találmány feladata a kinetikailag csak az ultraibolya tartományban nyomon követhető reakciót a látható fény hullamíbosiszába átvinni, vagyis az emberi szem számlára érzékelhető reakcióvá átalakítani. A kitűzött feladatot úgy oldottuk meg, hogy a képződött foszforglioerinaldiefhidiet a foszforglicerinaldehidhidrogenáz segédenzim segítségével arzenát jelenlétében oxidáljuk és a képződött redukált nikotinsavadenindinuklieotidet a találmány szerint egy szímezékrendíszerihez, éspedig a fenazinmietoszulfáit és; diiklóirfenolindofenol rendszerhez kapcsoljuk. A színezékanyagrendsezr felveszi a hidrogént, így a színezák-154055
