154046. lajstromszámú szabadalom • Eljárás prazinomicin előállítására
154046 A lúgos, vizes oldatot háromszor 75—75 ml nbutanollal extrahiáljuk, A kaipott sötétvörös vizes fázist 0,35 ml 6 n sósavval 5,0 pH-ra állítjuk; be, és kétszer 75-—75 ml n-butanollal nioissuk, A vizes fázist 0,'6 ml 6 n sósavval megsavanyítva 1,5—2,0 pH-na állítjuk: be, és kétszer 75—75 ml1 n-butanollal extraháljulk. Az egyesített butainolos kivonatok pH-ját nátronlúggal 0,7-re állítjuk be, és a keveréket vákuumban foepároljufc. 2: g aimoirtf nátriumsót kapunk, 3 440 egység/mg aktivitással. A szabad sav -előállítására 1 g nátriumsót feloldunk: 215 ml, desztillált vízben, és a savat erős savas ionkicserélő gyantával felszabadítjuk, amikoiris az oldat pH-ja kb. 2,5 lesz. A gyantát szűréssel elválasztjuk, ás a szabad savat a vizes szűredékből liofilizálássáL kinyerjük. 0,7 g világosbarna port kapun 3 200 egység/mg aktivitással, 6. példa Kétszeres hígításos próbáit végeztünk több mikroarganizmiusisal. Az ezekben a vizsgálatokban használt prazinomicin tisztasága megfelel a 4 .példában ismertett savas frakcióinak. 10 15 20 25 8. példa A prazinomicin fémsói Prazinoimicint víziben szuszpendálunk (30 mg/ml). Báiriumhidiro(xid oldatot adunk hozzá 8 pH-ig, és az oldatot az antibiotikum teljes oldódásáig keverjük. 5 térfogait etanolt adunk hozzá, és a háriumisóból álló csapadékot szűrőre visszük: és etanollal mossuk. Szabad levegőn a só 9,7% hidriátvizet vesz fél, amely 80 C°-on 0,1 torr nyomás alatt szárítva ismét eltávozik. Összetétele (hidrétvíz tartalmú alak): 40,93 % C 6,25 o/0 H 9,212 % Ba 1,79 % P tit-Semlegességi egyenértéke penklórsawal rálva: 647. Hasonlóan a fenti eljárást követve, de egyenértékű mennyiségű nátriumhidroxiddlal, illetve káliumlhiidroxiddal helyettesítve a báriumíhidroxidot, a megfelelő nátrium-, ill. káliumsót kapjuk. Mikroorganizmus Átlagos gátló koncentráció, ug/ml Staphylococcus aureus 209 P 0,09 Streptococcus pyogenes O203 0,214 Streptococcus agalactiae 0,25 Salmonella schottimuelleri No. 3850 > 50.00 9. példa 30 A 2., 3. és 4. példák szerint eljárva, de a Streptomyoes prasinust Streptomyoes hirsutussal (ATOC 1(9 001) helyettesítve, szintén prazinomicint kapunk. Salmonella typhimurium No. 38211 Pseudomonas aeruginosa No. 3840 Proteus vulgaris No. 3856 Proteus mirabilis No. 3873 Candida albicans: No. 1539 > 50,00 > 50,00 26,00 18,70 > 50.00 35 10. példa A 2., 3. és 4. példák szerint eljárva, de a Streptomyces prasinust Streptomyoes prasinopilosussal (ATOC 19 092) helyettesítve, szintén 40 prazinomicint kapunk. 11. példa Mycobacterium tuberculosis var B. C. G. 1,00 7. példa Egereket beoltunk intraperitoneálisan Streptococcus pyogenes C203 1000 LDso-es adagjaival, és a fertőzés után öt órával szubkután befees^ kendezzük az antibiotikum, keveréket a következő eredményekkel: 1. gyógyszer táblázat mg/kg: t/Ö'+ Penicillin G 2,0 2/10 1,0 3/10 0,5 1/10 Prazinomicin 10,0 10/10 5,0 6/10 2,5 8/10 1,26 4/10 Kezeletlen •— 0/10 + túlélők/összes egér 45 50 55 60 65 Az 5. példa sezrint kapott anyagból ellenáramú megosztással prazinomiein-A-t, prazinomicin-B-t, prazinomicin-^C-t, prazinomicin-D-t és prazinoimicin-E-t különítünk el n-propanolbutanol-0,2 M N-metil^morfolin-oldószeirrendszert (2:3:6 térfogat) használva. 4,4 g savat feloldunk 200 ml-ben az alsó fázisból, N-etil-morfólinnal 9-^re állítjuk be a pH-ját, és egy ellenáramú megosztási készülékben nitrogénatmoszférában lí 500 átvitelt végzünk. Az egy-egy egyedi aktív összetevőnek megfelelő anyagokat a csövekből egyesítjük, és az oldószert vákuumban eltávolítjuk, A kapott N-etil-morfolin-sőkat víziben felvesszük, és a savakat felszabadítjuk ionkicserélő gyantával való kezeléssel, A gyantát szűrőn, elválasztjuk, és a szűredéket vákuumlban szárazra pároljuk. A maradványt etilacetáttal kicsapjuk a metánok» oldatból, és így színtelen amorf antibiotikumot kapunk. nymodon 600 mg prazinomicin-A-t, 4
