154035. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ergotoxin típusú alkaloidokat termelő, stabil termelőképességű anyarozstörzsek előállítására
154035 6 pögő szürletben az apró spórák száma erősen feldúsult. Mennyiségi aránya mikroszkóp alatt ellenőrizve mintegy 30% volt. A szürletet 1:1000 arányban hígítva, szelesztést végeztünk 100 lapos tenyészedényben. A szélesztéshez használt tenyészedények táptalaja: Mannit 2% Aszparagin 0,5% KHaPOí 0,1% MgS04 -7H 2 0 0,025% Agár-agár 2% csapvízlben. A szélesztés után 4 hétre az óriás. telepek zöme sima fehér küllemet mutatott, elvétve egy-egy világos rózsaszínű telep volt látható. A rózsaszínű telepek között találtunk egy színben eltérő, lila árnyalatú óriás telepet, ez felülről lila színt mutatott, mert légmioelium fedte az alatta levő feketés lila telepet. Ezt a telepet kiemelve az említett módszer szerint ugyancsak tovább szelektáltuk, de most már a tola .színű telepek irányaiban. Már a második szélesztés után tiszta lilásfekete tenyészetíhez jutottunk. Az aszparaginos táptalajon tehát az eredeti fehér, majd az abból kialakult rózsaszínű és lilásfekete féleségeket lehetett megkülönböztetni. Ha a, lila színű féleségeket akárhányszor visszavittük a leírt borsólisztes táptalajra, úgy ez a, változat itt is mendenkoir lila színű tenyészetet adott. A tenyészet színanyaga bediffundált a táptalajba. Ebiből a lila színű tenyészetlből készítve fertőzőanyagot és azzal ismert módon a rozsot mesterségesen megfertőzve, a termett anyarozs megtartotta a kiindulási 0,36%r-os összalkaloidtantalma't, de ezen túlmenően, qualitativ változást is mutatott, mert az ergotamintartalom benne teljesen eltűnt és csak ergotoxint tartalmazott. Az így nyert tenyészet több évi parazita termesztés mellett új tulajdonságait megtartja. 10 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás ergotoxin^típusú alkaloidokat rozson, parazita körülmények között stabilan termelő anyarozs-törzsek előállítására szelekció 15 útján történő nemesítéssel, azaal jellemezve, hogy bármilyen vegyes alkaloidtermelő, pl. vadontermő anyarozsból kiindulva, ezt az anyarozsot hüvelyes növények magvaiból, célszerűen borsóból készült, szacharózt és ásványi 20 sókat is tartalmazó táptalajon tenyésztjük, majd a kapott micéliumból spóraszuszpenziót készítünk, ebben a kisebb méretű — előnyösen 2—3 mikron hosszúságú és 1,5—2 mikron átmérőjű — spórák mennyiségi arányát szűréssel 25 feldúsítjuk az így kapott spórákíkal szelesztést végzünk oly táptalajra, amely szénforrásként valamely 4—6 értékű alkoholt, előnyösen mannitot, nitrogénlfbrrá'sként pedig asparagint tartarmaz, majd a keletkezett telepek közül a 30 lilás színűeket kiválasztjuk és adott esetben a szelektáló műveletet addig ismételjük, míg a lila szín a szélesztés minden telepén azonosan meg nem jelenik. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli 35 módja, amelyre jellemző, hogy a spóra-szuszpenzióban kisebb méretű spórák mennyiségi arányát szűréssel legalább 30%-ra növeljük, A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 6708132. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest, V., Balassi Bálint utca 21—23.