153664. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új ACTH-hatású peptidek előállítására
153664 35 13. példa: 36 Szabadalmi igénypontok 2,0 g poli-L-glutaminsavat, amelynek, átlagos molekulasúlya kb. II 000, feloldunk kb. 5,7 ml 10%-os nátriumnidroxidoldatban, olymódon, hogy ' 7,4 pH-értékű oldatot kapjunk. Ebben az oldatban 5,0 mg D-szeril-L-tirozil-L-szeril-L-metionil-L-glutamil-L-hisztidil-L-fenilalanil-L-arginil-L-triptofanil-glicil-L-lázil-L-prolil-L-valil^glicü-L-lizü^L-lizil-Li--arginil-Li-arginil-L-prolil-L-valil-L-lizil-L-valil-L-tirozil-L-prolin-hexaacetátot (D-Serljbéta' ~ 2 4 -kortikotropin-hexaacetát) és 0,2 mg mertiolátot oldunk és az oldat térifogatát desztillált vízzel 10 ml-re töltjük fel. Az így kapott oldatot sterilre szűrjük. Az oldat 1 ml-ben az alábbi .anyagokat tartalmazza: D-SerM>éta1_24 -kortikotropin 0,5 mg poli-L-glutaminsav 200,0 mg nátriumhidroxid 7,4 pH-értékig mertiolát 0,02, mg desztillált víz 1,0 ml-re. 14. példa: 2,0 g poli-L-glutaminsavat feloldunk kb. 5,7 ml 10%-os nátriumhidroxidoldatban olymódon, hogy 7,4 pH-értékű oldatot kapjunk. Ebben az oldatban 5,0 mg D-Ser1 -béta 1_24 -kortikotropin-hexaacetátot és 0,2 mg mertiolátot oldunk. A kapott oldathoz 1 ml sósavas cinkkloridoldatot (pH = 2,ß, cinkklorid-tartalom 5,2 mg/ml) adunk. Az elegy pH-értékét nátriumhidroxiddal 7,8-ra állítjuk lbe és 10 ml végső térfogatra töltjük fel desztillált vízzel. 15. példa: 2,0 g poli-L-glutaminsavat kb. 5,7 ml 10%-os nátriumhidroxidoldatban oldunk, olymódon, hogy az oldat pH-értéke 7,4 legyen. Ebben az oldatban 5,0 mg D-Ser1 -béta I_24 -kortikotropin-hexaacetátot és 0,2 mg mertiolátot oldunk. Az így kapott oldathoz 1 ml sósavas cinkkloridoldatot (pH = 2,18, cirikklorid-tartalom 5,2 mg/ml) és 0,85 mg vízmentes din átriumfoszfátot adunk. Az elegy pH-értékét nátriumhidroxidoldattal 7,8-ra állítjuk be. Desztillált vízzel 10 ml végső térfogatra töltjük fel. 16. példa: A 8—15. példákban leírthoz hasonló módon állíthatunk elő olyan készítményeket is, amelyek aktív pepiidként D^Ala1 -'béta 1_24 -kortikotropint (leírva a 2. példában), D-SerMréta1-1 -5 -kortikotropint (leírva a 3. példában), D-Ser1 -Orn17 ' 18 -béta 1_24 -kortikotropint .(leírva a 4. példában), D-Ser d -béta ! ~~ ' 6 -kortikotropin-amidot leírva az; 5. példában), D-SerMséta'~39 -kortikotropint (leírva a 6, példában) vagy D-Ser1 ,-Gly3 -béta 1 "~ 24 -ko i rtikotropint -(leírva a 7. példában) tartalmaznak. 1. Eljárás új, ACTH-hatású peptidék, amelyek a legalább az N-terminusig teljes ACTH-5 szekveneiájú és legalább 16 aminosavból álló láncú, az ACTH-szekvencia egyes aminosavai helyett azonban esetleg más természetes alfa-aminosavakat tartalmazó ACTH-hatású peptidektől abban különböznek, hogy első amino&av-10 ként egy D-konfigurációjú aminosavat tartalmaznak1 , valamint savakkal képezett addíciós sóik és egyéb származékaik és komplexeik előállítására, azzal jellemezve, hogy egy D-konfigurációjú N-terminális aminosavból kiindulva, 15 az aminosavakat — célszerűen a reakcióban részt nem vevő funkcionális csoportok átmeneti megvédése mellett — egymással összekapcsoljuk, a jelenlevő védőcsoportokat lehasítjuk és kívánt esetben a kapott szabad peptidet 20 valamely savval képezett addíciós sóvá, származékká vagy komplex vegyületté alakítjuk át. (1965. március 4.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a kondenzációt 25 feanbodiimid-módszerrel, azid-módszerrel, az aktivált észterek módszerével vagy anhidrid-módszerrel folytatjuk le. i(1964. augusztus 13.) 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy egy oly 30 dekapeptidet, amely az ACTH-szekvencia 1—10. aminosavából áll, amelyben azonban egyes aminosavak más természetes alfa-aminosavakra lehetnek kicserélve és amelyben az első aminosav D-konfigurációjú, amelyben továbbá 35 az alfa-aminocsoport és adott esetben az oldalláncbeli funkcionális csoportok is védve vannak, a teljes peptid szekvencia hátralevő részével, amelyben az oldalláncbeli funkcionális csoportok védettek és a terminális karboxilcso-40 port előnyösen észtercsoport vagy amidcsoport alakjában van jelen, kondenzálunk. (1964. augusztus 13.) 4. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az 45 ACTH-szekvencia 1—4. aminosavát tartalmazó tetrapeptidet, amelyben egyes aminosavak más természetes aminosavakra lehetnek kicserélve és amelyben az első aminosav D-konfigurációjú, az alfa-aminocsoport pedig védve van, 50 a teljes peptid-szekvencia még hiányzó részével, amelyben az oldalláncbeli funkcionális • csoportok védettek, a terminális karboxilcsoport pedig szabad állapotban vagy pedig észtervagy amidesoport alakjában van jelen, konden-55 zárjuk. (1964. augusztus 13.) 5. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az aminocsoportok védelmére terc.butiloxikarbonil-esoportot alkalmazunk. (1964. augusztus 60 13.) 6. Az .1-—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a karboxilcsoportok védelmére terc.butilészter-esoportot alkalmazunk. (1964. augusztus 13.) 65 7. Az 1—6. igénypontok bármelyike szerinti 18
