153086. lajstromszámú szabadalom • Eljárás araneatoxin készítmények előállítására

.3 fém-, üveg- és gumirészekből való berendezéseket nehéz aszeptikus állapotba hozni. Meglepő módon azt találtuk, hogy az arariea-toxin élő állatokból aszeptikus körülmények között kinyerhető és rendkívül nagy kémiai labilitása ellenére a kinyerés után stabilizáló és konzerváló folyékony közegbe bevihető, mimellett kémiai és mindenekelőtt fermentatív befolyások lehetősége messzemenően kiküszöbölhető, továbbá a toxin legalább egy évi tárolható farmakológiailag aktív gyógyszerformába alakítható át. Ezáltal lehetővé válik az is, hogy a toxinelvételnél kinyert méreg veszteség nélkül ampullázható legyen, továbbá olyan készítmény állítható elő, amely a természetes toxinban rejlő tulajdonságokat megtartva megfelelő hígítással gyógyászatilag hasznosítható alakba hozható. Az injekciós oldatok elkészítési követelményei között gyógyászati szempontból általában a csíramentességet említik meg. Állati mérgek feldolgozása során (kígyóméreg, méhméreg, pókméreg) az említett vegyületek komplex fehérje.természete miatt a hővel való sterilizálás lehetősége ki van zárva. A toxinoldatok azbesztszűrőrétegeken való előzetes, szűrése az adszorpciós veszteségek miatt a csekély toxinkonoentráció folytán szintén nem kivitelezhető. A találmány szerinti eljárás során alkalmazott aszeptikus körülmények a munkahelyre, a pincettákból, üvegedényből, kapillárisokból és a toxinoldatoik f elfagóedényeiből álló munkaeszközökre terjednek ki. A póktoxin-szierű állati váladékoknál komplex természetű fehérjével kell számolnunk, ezért víz kiküszöbölése fontos követelményt jelent. Mivel a póktoxinek, liofilizálásra nem .alkalmasak, így a több pókból egymásután kinyert toxinmennyiséget azonnal vízmentes többértékű alkoholba visszük be, .amelyben azok feloldhatók, majd beállítjuk a kívánt koncentrációt és vattával szűrt nitrogénnel létesített védőgázlégkörben az oldott toxint ampullákba töltjük le. 1. példa: A toxinelvételt sterilmunkára alkalmas térben, aszeptikus körülmények között végezzük. A pineettákat, üvegedényeket, kapillárisokat és minden egyéb munkaeszközt, amennyire csak lehetséges, túlnyomású gőzzel, ill. meleg levegővel csíramentesítünk, a immkateret UV besugárzással vagy bakteriad hatású aeroszolokkal csíraszegénnyé alakítjuk át. Majd kifejlett, Latrodectus tredecimguttatus (Fam. Theridiidae) fajtába tartozó nőstény pókot pincetta segítségével, amely végein félgömbalakú fémedényben végződik, úgy rögzítünk, hogy csak a Cephalothorax része marad szabadon. A pókot ezt követően a Ohelizerák kapillárissal való érintésével izgatunk, amikoris a toxin kiválasztás megtörténik. Ezt a műveletet sztereomikroszkóp alatt végezzük, amikoris a kilépő váladékot a Chelizeráknál gyengén zöldes cseppecske formájában jól észlelhetjük. A váladékot a kapil••••'" 4 láris segítségével leszívatjuk és előre kimért ^ mennyiségű, sterilizált vízimentes glicerinbe juttatjuk. A toxinoldat tárolására használt edényeket és ampullákat a betöltés előtt és után vat-5 tával szűrt nitrogéngázlégkörbe helyezzük. Ily módon több pókból származó toxint gyűjtünk össze és súlyát meghatározzuk. A glicerines toxinoldatot homogenizáljuk és úgy osztjuk el ampullákra, hogy egy ampullába mintegy 0,2 10 mg, vagyis annak a toxinmennyiségnek fele jusson, amelyet egy pók egy harapás során kiválaszt. A glícerinmennyiséget úgy mérjük ki, hogy ampullánként 0,1 ml' kerüljön letöltésre. Injekció beadása előtt az ampulla tartalmát 15 fiziológiás konyhasóoldattal 1 : 9 arányban hígítjuk. 2. példa: 20 A Chiracanthium punctorium Villers fajtába tartozó nősténypókok kezelését az 1. példa szerint végezzük. A toxin leadásának gyorsítása céljából a Chelizerák és a potroh közé helyezett platinaelektródákkal egy-egy állatot 2—10 V és 25 0,5—2 mA-s áramkörbe helyezünk. (Nagyobb pókfajták esetén 40 V és 4 mA áramkör alkalmazása is lehetséges.) Ezután pedig az 1. példa szerint járunk el. 3. példa: A Latrodectus mactans fajtába tartozó pókok toxinjának kinyerése az 1. és 2. példa szerint 35 történik. A váladékot kimért mennyiségű sterilizált, vízmentes 1,2-propilénglikolba visszük be. A toxinoldat felfogására szolgáló ampullákat és edényeket a kezelés előtt és után vattán szűrt' nitrogénnel kezeljük. 40 Az 1,2-propilénglikolíban oldott toxin homogén oldatát úgy osztjuk el ampullákra, hogy egy ampullára mintegy 0,2 mg, vagyis egy méregmirigypár egy csípéséből származó toxinimenynyiség jusson. Az 1,2-propilénglikol mennyisé-45 gét emellett úgy szabjuk meg, hogy ampullánként 0,1 ml kerüljön letöltésre. A toxinoldat felhígítása 1 :9 arányú steril 6%-os izotoniás dextránoldattal (közepes mólsúlya 60—90 000) történik. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás gyógyászati célokra alkalmazható 55 injekciós készítmények előállítására élő pókok természetes toxinjainak kinyerése útján, mimellett a pókokat a toxin leadására célszerűen gyenge eleJd:romosára<mmal való izgatással késztetjük, azzal jellemezve, hogy a toxint aszep-60 tikus körülmények között nyerjük ki és azt közvetlenül, vízmentes többértékű alkoholokba mint glicerinbe, l,3Jbutilénglikolba vagy 1,2--propilénglikolba visszük be. 2. Az 1. igénypont, szerinti eljárás foganato-65 sítási módja, depothatású és pontos dózisada-